本文關鍵詞：活血化瘀通絡方對糖尿病腎病大鼠的保護作用及對血管緊張素Ⅱ1型受體的影響實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：本實驗通過建立糖尿�。―M）的動物模型，應用活血化瘀通絡方對動物模型進行藥物干預性治療，通過觀察實驗動物的24小時尿蛋白定量、血清肌酐（Scr）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、腎臟病理學變化、免疫組化法檢測腎組織中血管緊張素II1型受體（AT1R）的表達、RT-PCR法檢測腎組織AT1R mRNA的基因水平、Western-blot方法檢測腎組織中AT1R的蛋白含量，研究活血化瘀通絡方對糖尿病腎病的治療作用及可能機制，為臨床應用提供理論依據(jù)和實驗基礎。 方法：選用清潔級健康雄性Sprague-Dauley大鼠80只，體重90g～120g。普通飼料適應性飼養(yǎng)一周，測定尿蛋白、尿糖均為陰性者，隨機選取15只大鼠作正常組，余65只大鼠為造模組，造模組大鼠禁食不禁水12小時后一次性腹腔注射由0.1M枸櫞酸緩沖液（PH4.5）配制成的鏈脲佐菌素（STZ）55mg／kg，正常組注射等體積的枸櫞酸緩沖液，72小時后尾靜脈取血測血糖，連續(xù)三次隨機血糖值以≥16.7mmol／L為DM模型成功，3只大鼠血糖值未達標予以剔除。造模組在DM模型成模后，隨機分成5組：模型組、活血方治療組、化瘀通絡方治療組、活血化瘀通絡方治療組、厄貝沙坦組。其中模型組大鼠14只，余各組各大鼠12只。成模一周后予以給藥，給藥組按大鼠與人體型系數(shù)折算出各組大鼠每日所需灌胃的劑量：丹參1.2g/kg/d，川芎0.96g/kg/d，地龍0.8g/kg/d，全蝎0.48g/kg/d，水蛭0.48g/kg/d，厄貝沙坦0.024g/kg/d；正常組、模型組大鼠每天給予2ml純凈水灌胃，每日一次連續(xù)給藥共16周。16周末留取各組大鼠24小時尿液，測定24小時尿蛋白定量，大鼠尾靜脈取血測血糖及糖化血紅蛋白(HbA1c)，大鼠禁食不禁水12小時，稱量大鼠體重，10%水合氯醛麻醉動物，腹主動脈取血，摘取右腎剝離被膜后稱重，留取腎臟皮質標本，觀察腎組織超微結構變化及AT1R的表達。 結果： 1實驗大鼠的一般情況 正常組大鼠飲食正常，尿量正常，肌肉豐滿，毛色光澤，反應靈敏。其余各組大鼠在注射STZ后逐漸出現(xiàn)多飲，多食、多尿癥狀，實驗最后一周，與正常組相比，造模組及各給藥組大鼠反應遲鈍，精神萎靡，體型偏小，模型組大鼠的癥狀比各給藥組大鼠的癥狀嚴重。給藥期間造模組及各給藥組均有大鼠死亡情況：模型組死亡6只，活血化瘀通絡方治療組死亡1只，厄貝沙坦組死亡2只，死亡原因可能是由于糖代謝障礙所致血糖過高最終導致多臟器衰竭。 2各組大鼠體重、右腎重、肥大指數(shù)（右腎重/體重）的比較 與正常組相比，模型組和各治療組的體重明顯減輕（P0.05），模型組與各治療組及各治療組之間體重無明顯的差異（P0.05）；右腎重各組之間無顯著性差異（P0.05）；與正常組相比，模型組和各治療組的肥大指數(shù)明顯偏高（P0.05），模型組與各治療組及各治療組之間無顯著性差異（P0.05）。 3各組大鼠24小時尿蛋白定量的比較（24h UTP） 與正常組相比，模型組和各治療組24小時尿蛋白定量明顯升高（P0.05）；與模型組相比，各給藥組24小時尿蛋白定量明顯降低（P0.05）；各給藥組之間比較，活血方治療組24小時尿蛋白定量高于其他治療組（P0.05）；化瘀通絡方治療組、活血化瘀通絡方治療組、厄貝沙坦組之間無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 4各組大鼠糖化血紅蛋白（HbA1c）的比較 與正常組相比，模型組和各治療組的糖化血紅蛋白明顯升高（P0.05）；模型組與各治療組及各治療組之間的糖化血紅蛋白無顯著性的差異（P0.05）。 5各組大鼠血清肌酐（SCr）的比較 各組大鼠血清肌酐水平無顯著性差異（P0.05）。 6腎臟病理學改變 6.1光鏡觀察 正常組大鼠腎臟腎小球結構清晰完整，未見明顯肥大，未見基底膜增厚，未見系膜增生；模型組大鼠腎臟腎小球明顯肥大，腎小囊腔呈裂隙狀，基底膜明顯增厚，系膜細胞和系膜基質彌漫增生、系膜區(qū)增寬；與模型組比較，各治療組大鼠腎小球均輕度肥大，腎小球基底膜均輕度增厚，均可見系膜細胞和系膜基質輕度增生，活血方治療組表現(xiàn)略重于其他治療組。 6.2電鏡觀察 正常組大鼠腎小球基底膜結構完整，足細胞足突分布均勻，未見融合；模型組大鼠腎小球基底膜顯著性均質樣增厚，足細胞足突廣泛融合；與模型組相比，各治療組大鼠也有類似的病理改變，但程度較輕，活血方治療組表現(xiàn)略重于其他治療組。 7免疫組化觀測腎組織AT1R的表達 正常組AT1R在大鼠腎臟的表達主要位于腎小管內，以近端腎小管為主，遠端腎小管、腎小球、腎血管周圍也可見少量表達。與正常組相比，模型組及各治療組的表達明顯增加（P0.05）；與模型組相比，各治療組的表達明顯降低（P0.05）；活血方治療組的表達強于其他治療組（P0.05）；化瘀通絡方治療組、活血化瘀通絡方治療組、厄貝沙坦組之間無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 8Western-blot方法檢測腎組織AT1R蛋白的表達 與正常組相比，模型組和各治療組蛋白表達量均增加（P0.05）；與模型組相比，各治療組蛋白表達量均減少（P0.05）；活血方治療組的蛋白表達量多于其他治療組（P0.05）；化瘀通絡方治療組、活血化瘀通絡方治療組、厄貝沙坦組之間無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 9RT-PCR方法檢測腎組織AT1R mRNA表達水平 與正常組相比，，模型組和各治療組AT1R mRNA表達均增高（P0.05）；與模型組相比，各治療組AT1R mRNA表達均降低（P0.05）；活血方治療組AT1R mRNA表達高于其他治療組（P0.05）；化瘀通絡方治療組、活血化瘀通絡方治療組、厄貝沙坦組之間無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 結論： 1活血化瘀通絡方具有對糖尿病腎病大鼠腎臟的保護作用。 2活血化瘀通絡方可以抑制AT1R的表達，與厄貝沙坦作用相似，提示活血化瘀通絡中藥對DN的治療作用可能與阻斷腎臟局部RAS系統(tǒng)途徑有關。
【關鍵詞】：糖尿病腎病 血管緊張素Ⅱ1型受體 厄貝沙坦 動物模型 活血化瘀通絡中藥
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R587.2;R285.5
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• ABSTRACT7-12
• 前言12
• 材料與方法12-22
• 結果22-25
• 附圖25-34
• 附表34-36
• 討論36-42
• 結論42
• 參考文獻42-45
• 綜述 RAS 系統(tǒng)與糖尿病腎病45-54
• 參考文獻50-54
• 致謝54-55
• 個人簡歷55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 丁英鈞;肖永華;傅強;潘莉;趙進喜;;糖尿病腎病“微型ve瘕”病理假說解析[J];中華中醫(yī)藥雜志;2009年01期

2 王穎輝;龐博;李景;趙進喜;;糖尿病腎病病機當代研究述評[J];中華中醫(yī)藥雜志;2010年03期

3 程虹,諶貽璞;血管緊張素轉換酶抑制劑在腎臟病治療中的合理應用[J];中國醫(yī)藥導刊;2002年04期

4 郭學軍;鄒移海;吳凌;劉曉秋;;鏈脲佐菌素誘導1型糖尿病大鼠模型的影響因素探討[J];動物醫(yī)學進展;2008年04期

5 張麗,許玲,王德全;1型血管緊張素Ⅱ受體基因與糖尿病血管并發(fā)癥[J];國外醫(yī)學.內分泌學分冊;1999年03期

6 李競,高凌,甘佩珍,葉惠鳳;血管緊張素Ⅱ受體Ⅰ基因A1166C多態(tài)性對Ⅱ型糖尿病患者發(fā)生腎病的影響[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2001年02期

7 楊亦彬,張翥,蘇克亮,陳澤君,黃頌敏;鏈脲佐菌素誘導大鼠糖尿病腎病模型的方法學探討[J];華西醫(yī)學;2005年02期

8 王月華;郭登洲;王彥凱;張江華;趙雯紅;陳志強;;活血化瘀消ve通絡中藥對糖尿病腎病的干預作用[J];中國中西醫(yī)結合腎病雜志;2009年04期

9 戴京璋,呂仁和,趙進喜,楊曉暉,于秀辰,王世東,李靖;糖尿病腎病中醫(yī)證治[J];北京中醫(yī)藥大學學報;2002年05期

10 劉學政,蕭鴻;鏈脲佐菌素致大鼠糖尿病模型的研究[J];錦州醫(yī)學院學報;2001年04期

  本文關鍵詞：活血化瘀通絡方對糖尿病腎病大鼠的保護作用及對血管緊張素Ⅱ1型受體的影響實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：453979