本文關鍵詞：自噬對胰腺脂質沉積及胰島素敏感性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：建立高脂飲食所致肥胖大鼠模型，同時給予自噬抑制劑干預，檢測胰腺脂質沉積程度與自噬相關蛋白LC3的表達情況，分析自噬對胰腺脂質沉積及胰島素敏感性的影響；觀察不同糖耐量人群胰腺脂質沉積與胰島素敏感性的差異，探討胰腺脂質沉積與胰島素抵抗的關系，為進一步探討自噬在人體內2型糖尿病發(fā)生發(fā)展中可能的作用提供參考依據(jù)。 方法： 1.實驗研究：8周齡雄性SD大鼠30只適應性喂養(yǎng)7天后隨機平均分為普通喂養(yǎng)(NC)組、高脂喂養(yǎng)(HF)組和高脂喂養(yǎng)加氯喹干預(HFC)組，12周后采集空腹血檢測甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)和空腹血糖(FBG)、胰島素(Fins)含量，計算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗(HOMA-IR)指數(shù)評估胰島素敏感性；口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)，評估大鼠糖耐量水平；胰腺組織切片行HE染色，觀察各組大鼠胰腺組織形態(tài)及脂質沉積情況；Western blot法檢測胰腺組織自噬相關蛋白LC3表達水平。 2.臨床研究：納入受試者120例，分為糖耐量正常的對照(NC)組37例，糖調節(jié)受損(IGR，包括空腹血糖調節(jié)受損和糖耐量異常)組37例，2型糖尿病(T2DM)組46例，收集身高、體重、腰圍、臀圍，計算體質量指數(shù)(BMI)、腰臀比(WHR)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)；空腹10小時留取外周血分離血清，采用全自動生化分析儀檢測FBG、糖負荷后2小時血糖(2hPG)、TG、TC、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。采用放射免疫法(RIA)檢測Fins和糖負荷后2小時胰島素(Ins)水平；采用穩(wěn)態(tài)模型評估HOMA-IR和HOMA-β指數(shù)；所有受試者均接受上腹部計算機斷層掃描(computed tomography, CT)技術平掃，用脾胰CT差值評估胰腺脂質沉積程度，以肝脾CT比值評估肝臟脂質沉積；采用SPSS13.0軟件分析自噬、胰腺脂質沉積的組間差異及其與各項指標的相關性。 結果： 1.實驗研究結果： 1.1三組大鼠生長指標的比較 各組大鼠基線體重、體長、腰圍等生長指標差異無統(tǒng)計學意義，至實驗第12周時高脂喂養(yǎng)的HF組、HFC組大鼠體重、Lee's指數(shù)、腰圍(WC)較普通喂養(yǎng)NC組大鼠明顯增加，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 1.2三組大鼠OGTT結果的比較 OGTT試驗結果顯示，HF組、HFC組大鼠各時點血糖值和葡萄糖曲線下面積(AUCG)均高于NC組(P＜0.05)，血糖在OGTT20'達到血糖峰值，后長時間處于較高水平，而NC組在OGTT40'達血糖峰值后逐漸降至正常水平。 13三組大鼠糖脂代謝及胰島素敏感性的比較 HF組、HFC組大鼠的FBG、TG、TC和Fins均較NC組明顯升高，HOMA-IR在3組中逐漸增加，而HOMA-β指數(shù)明顯降低(P＜0.05)。 1.4三組大鼠胰腺形態(tài)和脂質沉積的比較 胰腺組織病理切片HE染色結果顯示，，NC組大鼠胰腺組織內未見明顯的脂滴空泡，HF組大鼠胰腺組織細胞內空泡數(shù)量較NC組明顯增加；而HFC組胰島內大量脂滴空泡形成，胰島周圍可見脂肪組織浸潤。 采用圖像分析軟件，計算每高倍視野（小葉內、小葉間）內脂肪細胞的百分比，發(fā)現(xiàn)胰腺脂肪沉積程度在NC、HF及HFC三組間逐漸增加，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 1.5胰腺脂質沉積與代謝指標的相關性分析 線性相關分析表明，胰腺脂質沉積與體重、Lee’s指數(shù)、WC、TG、TC、FBG、Fins、HOMA-IR指數(shù)呈正相關，多元回歸分析表明，HOMA-IR指數(shù)、TC是胰腺脂質沉積的獨立影響因素。 1.6三組大鼠胰腺自噬蛋白LC3表達的比較 在相對分子量16ku附近可見LC3蛋白雜交條帶，經(jīng)光密度分析顯示，NC組蛋白表達基本相同，HF組蛋白表達較NC組明顯升高，而HFC組則明顯降低(P＜0.05)。 2.臨床研究結果： 2.1三組一般臨床資料和生化特征 NC組、IGR組、T2DM各組間性別、年齡、SBP、DBP、LDL-C差異無統(tǒng)計學意義(均P0.05)。 IGR組和T2DM組WHR、FBG、Fins、2hPG、Ins、HOMA-IR指數(shù)較NC組升高，T2DM組BMI、TG、TC較其余兩組明顯增加，而HDL-C、HOMA-β指數(shù)則明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 2.2各組脾胰CT差值和肝脾CT比值的差異 IGR組較NC組脾胰CT差值升高，肝脾CT比值降低，但差異無統(tǒng)計學意義，T2DM組脾胰CT差值較NC組、IGR組均明顯增加，肝脾CT比值明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 2.3脾胰CT差值與其他指標的相關性分析 線性相關分析表明，脾胰CT差值與HOMA-IR、HOMA-β、肝脾CT比值、年齡、BMI、WHR、FBG、FIns、2hPG、Ins、TG、TC及HDL相關(R分別為0.758，-0.549，-0.732，0.283，0.657，0.687，0.683，0.734，0.659，0.311，0.559，0.460，-0.294，P＜0.05)，與SBP、DBP、LDL-C無顯著相關性。 多元逐步回歸分析顯示，HOMA-IR、肝脾CT比值、BMI、WHR、年齡、TC與脾胰CT差值獨立相關，可能是胰腺脂質沉積的獨立影響因素(P0.05)。 結論： 1.高脂飲食能誘導肥胖、糖脂代謝紊亂和胰腺脂質沉積，加重IR和β細胞功能障礙。 2.高脂飲食可引起胰腺組織自噬激活，可能是一種代償性保護機制。 3.抑制自噬活性后，高脂飲食誘導的IR和胰腺脂質沉積更加明顯，可能與自噬的代償性保護機制缺失有關。 4.自噬可能參與IR和胰島β細胞功能調節(jié)，在2型糖尿病的發(fā)病中起重要保護作用。 5.隨著胰腺脂質沉積程度增加，不同糖耐量人群糖脂代謝紊亂和IR也明顯加重，提示胰腺脂質沉積可能參與IR的發(fā)生。
【關鍵詞】：自噬 胰腺脂質沉積 胰島素敏感性 2型糖尿病
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R589.2
【目錄】：

• 目錄4-5
• 主要英文縮略詞表5-7
• 摘要7-11
• Abstract11-16
• 第一部分 實驗研究 自噬對大鼠胰腺脂質沉積及胰島素敏感性的影響16-39
• 1．前言16-19
• 2．材料與方法19-25
• 3．結果25-31
• 4．討論31-35
• 5．結論35-36
• 6．參考文獻36-39
• 第二部分 臨床研究 不同糖耐量人群胰腺脂質沉積與胰島素敏感性的關系39-55
• 1．前言39-41
• 2．材料與方法41-44
• 3．結果44-48
• 4．討論48-52
• 5．結論52-53
• 6．參考文獻53-55
• 不足之處及下一步研究方向55-56
• 綜述56-66
• 參考文獻63-66
• 附錄66-68
• 致謝68

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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  本文關鍵詞：自噬對胰腺脂質沉積及胰島素敏感性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：448286