背景脂質代謝紊亂導是致諸多慢性代謝性疾病的重要危險因素。Metrnl是近年來發(fā)現(xiàn)的一個全新的分泌蛋白,可從多種不同的組織細胞中分泌,提示Metrnl可能具有廣泛的生物學功能。本課題組研究發(fā)現(xiàn)Metrnl是一個全新的脂肪因子,高脂飲食可以誘導小鼠脂肪組織Metrnl表達,脂肪組織特異性Metrnl過表達可以緩解高脂飲食誘導的高甘油三酯血癥和脂肪乳灌胃造成的血液甘油三酯水平急性升高,脂肪組織特異性Metrnl敲除則加重高脂飲食誘導的高甘油三酯血癥,提示Metrnl在脂質代謝調節(jié)中扮演了重要的角色。目的研究Metrnl對各種血脂成分的調節(jié)作用,探索Metrnl調節(jié)脂質代謝的機制,尋找脂質代謝紊亂治療新靶標。方法1.依據(jù)Cre/loxp重組體系的原理,將Ella-Cre小鼠和Metrnl^loxp/loxp小鼠交配構建Metrnl全身敲除(Metrnl^-/-)小鼠,將Alb-Cre小鼠和Metrnl^loxp/loxp小鼠交配構建Metrnl肝臟特異性敲除(Liver-Metrnl^-/-)小鼠。熒光實時定量PCR...

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1Metrnl基因打靶策略

Metrnl在脂質代謝中的作用及機制研究-25-實驗結果一、Metrnl基因打靶策略Cre/loxp系統(tǒng)是一種強大的基因編輯工具，借助它所建立起來的條件性基因敲除技術被廣泛應用于基因功能鑒定和人類疾病動物模型構建[28]。應用Cre/loxp系統(tǒng)對小鼠體內Metrnl基因進行敲除....

圖2Metrnl-/-小鼠的培育及鑒定

海軍軍醫(yī)大學碩士學位論文-26-DNA的PCR擴增產(chǎn)物凝膠電泳結果如圖2b所示，根據(jù)引物在基因上的位置，擴增得到的各基因片段長度分別為EIIa-Cre100bp，β-Actin324bp，Metrnlloxp243bp，Metrnlwt150bp，Metrnlko289bp，因此....

圖3Metrnl-/-小鼠的驗證

Metrnl在脂質代謝中的作用及機制研究-27-圖3Metrnl-/-小鼠的驗證。a.Metrnl-/-小鼠和對照（WT）小鼠肝臟、腸道、皮下白色脂肪（WAT）、棕色脂肪（BAT）組織MetrnlmRNA表達（n=6）。b.Metrnl-/-小鼠和WT小鼠血清Metrnl水平（n....

圖4Liver-Metrnl-/-小鼠的培育和鑒定

海軍軍醫(yī)大學碩士學位論文-28-圖4Liver-Metrnl-/-小鼠的培育和鑒定。a.Liver-Metrnl-/-小鼠的培育流程。b.小鼠鼠尾基因組DNAPCR擴增產(chǎn)物凝膠電泳結果。Figure4.CultureandidentificationofLiver-Metnl-/....

本文編號：4020154