目的:探索因嚴重感染、器官移植排斥反應等臨床重大疾病所導致的胸腺退化和萎縮的可能機制,以期為臨床治療上述疾病引起的胸腺萎縮和T細胞免疫缺陷的重建提供理論依據(jù)和技術支持。方法:采用GM-CSF和IL-4體外誘導EGFP^Tg/+小鼠骨髓細胞分化為髓源樹突狀細胞（bone marrow derived dendritic cell,BMDC）,經LPS誘導活化成為成熟的DC后,心內注射過繼到同品系小鼠體內,并通過流式細胞術檢測過繼小鼠胸腺中GFP⁺CD11c⁺細胞比例。流式細胞術檢測BMDC上Jagged1的表達水平,免疫熒光檢測Notch受體（Notch1和Notch3）在不同周齡的小鼠胸腺中的分布。將BMDC與小鼠胸腺上皮細胞系mTEC1共培養(yǎng)以及包被不同濃度的Jagged1重組蛋白與mTEC1細胞共培養(yǎng),Edu增殖試劑盒檢測mTEC1細胞增殖水平變化。在兩個共培養(yǎng)的體系中分別加入高濃度和低濃度γ分泌酶抑制劑DAPT處理,Edu增殖試劑盒檢測mTEC1細胞增殖水平的改變。最后構建Notch3胞內活化片段NICD3的慢病毒表... 

【文章來源】：江蘇大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠DC發(fā)育圖解

ged1/Notch3 信號抑制胸腺上皮細胞系 mTEC1 細胞增殖； 4℃預冷的 10%CaCl2-甘油，輕輕吹打重懸，0 μL/管，-80℃儲存。載體的構建及擴增nk 中 Notch3 基因（NM_008716.2），NICD3 位，共計 1968bp，按照該序列進行人工合成包含D3 的 DNA 序列（生工生物工程（上海）股份有3.1，將合成的 NICD3 的 DNA 片段退火酶載體；

BMDC上MHC-Ⅱ,CD80,CD86的表達Fig4.1TheexpressionofMHC-Ⅱ,CD80,CD86inBMDC


本文編號：3458915