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基于TMT蛋白組學(xué)技術(shù)篩選差異蛋白及OLFM4在RA-FLS炎癥發(fā)生中的功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-24 17:53
  目的1.基于TMT蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)鑒定類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis,RA)和骨性關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)膝關(guān)節(jié)滑膜組織中差異性表達(dá)蛋白,并篩選可作為RA診斷治療的潛在標(biāo)志物。2.探討嗅素結(jié)構(gòu)域家族蛋白4(Olfactomedin-domain family 4,OLFM4)在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞(Rheumatoid Arthritis Fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)炎癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的生物學(xué)功能及分子機(jī)制。方法1.利用TMT定量蛋白組學(xué)技術(shù)鑒定并篩選OA與RA患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織中差異表達(dá)蛋白,通過(guò)GO功能富集和KEGG通路富集分析,結(jié)合GEO datebase數(shù)據(jù)庫(kù)里的測(cè)序信息,利用GEO2R算法,篩選出目的基因。2.收集OA、RA患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織,利用WB、RT-q PCR、IHC等技術(shù)驗(yàn)證滑膜組織中OLFM4的表達(dá)水平。3.利用免疫熒光共定位技術(shù)檢測(cè)目的基因表達(dá)細(xì)胞種類(lèi)及位置,用DAPI染核,vimentin作為RA-FLS細(xì)胞標(biāo)志物,來(lái)確定目的基因OLFM4的表達(dá)。4.提取OA、R... 

【文章來(lái)源】:延安大學(xué)陜西省

【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

基于TMT蛋白組學(xué)技術(shù)篩選差異蛋白及OLFM4在RA-FLS炎癥發(fā)生中的功能研究


實(shí)驗(yàn)和分析流程圖

電泳圖,滑膜組織,蛋白凝膠,患者


A B 圖 2 OA、RA患者檢驗(yàn)指標(biāo)統(tǒng)計(jì)Fig.2 Statistics of OA and RA Patient Test Indicators中C反應(yīng)蛋白水平;B:OA、RA患者血液中類(lèi)風(fēng)濕因子水平;C水平;A患者滑膜組織蛋白質(zhì)樣品TMT定量蛋白組學(xué)結(jié)果量蛋白組學(xué)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織分別隨機(jī)分為 3 組,每組約 3相同質(zhì)量的樣本混勻,提取組織蛋白并進(jìn)行WB。,組間平行性好、組織蛋白提取成功并滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)需.2KD處,RA和OA患者組織中差異蛋白數(shù)量比較明RAOA0

檢驗(yàn)指標(biāo),患者,組織蛋白


圖 2 OA、RA患者檢驗(yàn)指標(biāo)Statistics of OA and RA Patient白水平;B:OA、RA患者血液中類(lèi)水平;組織蛋白質(zhì)樣品TMT定量蛋學(xué)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果節(jié)滑膜組織分別隨機(jī)分為 的樣本混勻,提取組織蛋白行性好、組織蛋白提取成功RA和OA患者組織中差異蛋

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Olfactomedin-4 in digestive diseases: A mini-review[J]. Xin-Yu Wang,Sheng-Hui Chen,Ya-Nan Zhang,Cheng-Fu Xu.  World Journal of Gastroenterology. 2018(17)



本文編號(hào):3360451

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