目的:百草枯（Paraquat,簡稱PQ）是一種廣泛使用的除草劑,對人畜均有較強的毒性,且無解毒劑,PQ中毒晚期可導致肺部纖維化直至呼吸衰竭而死亡。根據(jù)中毒后肺部上皮細胞轉(zhuǎn)化為間質(zhì)細胞的生理過程。我們認為缺氧誘導因子（HIF）在PQ中毒導致肺纖維化中起到了重要作用。在PQ中毒導致細胞嚴重缺氧的條件下,HIF通過結合缺氧反應元件激活下游眾多靶基因,從而參與與肺部上皮細胞的血管生成和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的環(huán)節(jié)。HIF也可以直接與細胞信號通路發(fā)生反應。本文旨在探索HIF-1α通過Notch1信號通路來調(diào)節(jié)PQ中毒所致肺部EMT的機制,從而控制纖維化的發(fā)生和進展,為PQ中毒的治療尋找潛在的靶點。方法:1、PQ中毒的小鼠模型建立:以腹腔注射方式染毒,構建PQ染毒后小鼠的肺纖維化模型。方法:A組（生理鹽水對照組）,B組10mg/kg（單次染毒組）,C組:20mg/kg（單次染毒組）,D組（10mg/kg隔日一次染毒組,共三次）染毒后觀察至第21天麻醉處死小鼠取肺組織,鏡下觀察病理組織變化,馬松染色,Ashcroft評分等方法來評估纖維化程度,提取小鼠肺組織蛋白以Western Blot檢測HIF... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 百草枯中毒致小鼠肺纖維化模型建立
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 動物與試劑
        2.2 處理方法
        2.3 蘇木精-伊紅染色（hematoxylin-eosin,HE染色）、馬松（Masson染色）三色染色及Ashcroft評分
        2.4 Western Blot蛋白檢測
        2.5 觀察指標
        2.6 統(tǒng)計學方法
    3 結果
        3.1 一般情況
        3.2 生存分析
        3.3 蘇木精-伊紅（HE）染色
        3.4 Masson染色
        3.5 小鼠肺組織的Ashcroft評分
        3.6 Western Blot檢測
    4 討論
    5 結論
第二部分 HIF-1α通過調(diào)控Notch1通路誘導百草枯中毒發(fā)生EMT機制研究
    1 材料與方法
        1.1 材料人肺腺癌A549細胞
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器設備
    2 方法
        2.1 細胞模型制備
        2.2 Western Blot
        2.3 Transwell實驗
        2.4 MTT法檢測細胞活性檢測
        2.5 Realtime RT-PCR
        2.6 瞬時轉(zhuǎn)染
        2.7 免疫共沉（Co-IP）
    3 結果
        3.1 在體外模擬百草枯中毒致纖維化的細胞模型
        3.2 Transwell結果
        3.3 Western Blot結果
        3.4 MTT結果
        3.5 Realtime RT-PCR結果
        3.6 HIF-1α和Notch1的Co-IP結果
        3.7 HIF-1α通過調(diào)控Notch1 通路調(diào)節(jié)PQ誘導的EMT
    4 討論
    5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Hypoxia inducible factor（HIF） in the tumor microenvironment:friend or foe?[J]. Yanqing Huang,Daniel Lin,Cullen M.Taniguchi.  Science China（Life Sciences）. 2017(10)
[2]雷帕霉素對小鼠百草枯中毒導致肺纖維化的治療作用(英文)[J]. Xue SHAO,Meng LI,Chong LUO,Ying-ying WANG,Ying-ying LU,Shi FENG,Heng LI,Xia-bing LANG,Yu-cheng WANG,Chuan LIN,Xiu-jin SHEN,Qin ZHOU,Hong JIANG,Jiang-hua CHEN.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(01)



本文編號：3161420