【摘要】：目的:類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是臨床表現(xiàn)以滑膜炎、對(duì)稱(chēng)性關(guān)節(jié)炎和骨質(zhì)破壞為主的慢性自身免疫性疾病。RA炎癥所致的骨質(zhì)丟失和破壞不能及時(shí)得到修復(fù)與重建,成骨細(xì)胞參與的骨形成與破骨細(xì)胞參與的骨吸收之間的動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞,導(dǎo)致骨量流失、骨密度和骨結(jié)構(gòu)的異常引發(fā)骨質(zhì)疏松(osteoporosis,OP),常伴有關(guān)節(jié)功能障礙及活動(dòng)受限。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究IL-35對(duì)成骨細(xì)胞增殖、凋亡及其對(duì)成骨細(xì)胞分泌血管新生因子的影響,以及上述作用和Wnt/β-catenin信號(hào)通路之間的關(guān)系,來(lái)探討IL-35對(duì)骨形成的影響,為RA合并OP提供新的治療方向。方法:利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成骨細(xì)胞細(xì)胞系MC3T3-E1,用不同濃度的IL-35(0-100ng/ml)刺激成骨細(xì)胞,CCK8法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,FCM分析細(xì)胞凋亡率,RT-PCR檢測(cè)FGF-2,VEGF及其受體Flt-1和Flk-1 m RNA的表達(dá)。加入Wnt/β-catenin抑制劑DKK-1(0.1ug/ml),加入不同濃度的IL-35共孵育,RT-PCR檢測(cè)VEGF m RNA的表達(dá)。結(jié)果:加入不同濃度的IL-35刺激后,隨IL-35濃度升高,光吸收值增大,與對(duì)照組相比,細(xì)胞增殖能力增強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。經(jīng)IL-35刺激后,25ng/ml組(4.25±0.35%)。50ng/ml組(3.0±0.14%)和100ng/ml組(1.3±0.28%)成骨細(xì)胞的凋亡率明顯低于對(duì)照組的凋亡率(6.35±0.64%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且升高趨勢(shì)和IL-35濃度梯度成正比。隨著IL-35濃度的升高,與對(duì)照組相比,成骨細(xì)胞內(nèi)FGF-2,VEGF,Flt-1 m RNA表達(dá)量均明顯增加(P0.05),未檢測(cè)到Flk-1m RNA的表達(dá)。經(jīng)DKK-1阻斷后,與對(duì)照組相比成骨細(xì)胞內(nèi)VEGF m RNA明顯減少且與IL-35濃度的升高呈負(fù)相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:IL-35可以促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖,抑制其凋亡。IL-35可能通過(guò)Wnt/β-catenin通路發(fā)揮促進(jìn)成骨細(xì)胞分泌血管新生因子FGF-2,VEGF及其受體Flt-1。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R593.22
【圖文】：

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3 結(jié)果濃度的 IL-35 對(duì)成骨細(xì)胞增殖能力的影響濃度 IL-35(0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml)與成骨細(xì)胞，隨 IL-35 濃度升高（25-100ng/ml），光吸收值增大，細(xì)胞（0ng/ml）明顯增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*P<0.05）。說(shuō)明 IL細(xì)胞增殖，且與 IL-35 濃度呈正相關(guān)。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

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本文編號(hào)：2761163