【摘要】：目的探討在糖化白蛋白(glycated albumin,GA)刺激下,人近端腎小管上皮細胞(HK-2細胞系)中腎損傷分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)、中性粒細胞明膠酶相關載脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)及炎性反應相關細胞因子的表達情況。方法分別采用不同濃度的GA與白蛋白(albumin,Alb)刺激HK-2細胞12 h、24 h及48 h,通過real-time PCR和酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunesorbent assay,ELISA)分別檢測NGAL、KIM-1的mRNA表達與蛋白釋放水平,并運用流式液相多重蛋白定量技術檢測血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細胞介素-8(interleukin-8,IL-8)和可溶性細胞間黏附分子-1(soluble intercellular cell adhesion molecule-1,sICAM-1)等細胞因子的濃度。結果與對照組與Alb組比較,GA刺激HK-2細胞12 h、24 h和48 h均能顯著上調KIM-1和NGAL的mRNA表達(P0.05)以及KIM-1和NGAL蛋白的釋放(P0.05);GA組sICAM-1、VEGF與IL-8水平在各時間點均高于Alb組和對照組(P0.05)。結論 GA能上調KIM-1和NGAL mRNA的表達與蛋白的釋放,并促進炎性細胞因子的分泌從而對腎小管造成損傷,提示GA可反映糖尿病腎臟受累情況。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of renal injury molecule-1 (kidney injury molecule-1,KIM-1 in human proximal tubular epithelial cells (HK-2 cell lines) stimulated by glycosylated albumin (glycated albumin,GA). Expression of neutrophil gelatinase-associated apolipoprotein (neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL) and inflammatory response-related cytokines. Methods HK-2 cells were stimulated with different concentrations of GA and albumin (albumin,Alb) for 24 h and 48 h, respectively. NGAL, was detected by real-time PCR and enzyme-linked immunesorbent assay,ELISA. MRNA expression and protein release level of KIM-1 were detected by flow liquid phase multiplex protein quantitative technique. Vascular endothelial growth factor (vascular endothelial growth factor,VEGF), tumor necrosis factor- 偽 (TNF- 偽) and tumor necrosis factor 偽 (TNF- 偽) were detected by flow cytometry. Concentrations of cytokines such as interleukin-8 (interleukin-8,IL-8) and soluble intercellular adhesion molecule-1 (soluble intercellular cell adhesion molecule-1,sICAM-1. Results compared with control group and Alb group, GA stimulated HK-2 cells significantly up-regulated mRNA expression of KIM-1 and NGAL (P0.05) and release of KIM-1 and NGAL protein (P0.05). The levels of sICAM-1,VEGF and IL-8 in GA group were higher than those in Alb group and control group at each time point (P0.05). Conclusion GA can up-regulate the expression of KIM-1 and NGAL mRNA and release of protein, and promote the secretion of inflammatory cytokines, thus causing damage to renal tubules, suggesting that GA can reflect the renal involvement in diabetic patients.
【作者單位】： 北京大學第一醫(yī)院檢驗科;
【分類號】：R587.2;R692.9

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本文編號：2400020