本文關(guān)鍵詞：siRNA干擾MACC1表達(dá)對(duì)前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3生長(zhǎng)與侵襲影響研究

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【摘要】：目的結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1(metastasis-associated in colon cancer 1,MACC1)在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用,在前列腺癌中的研究較少,本研究探討siRNA轉(zhuǎn)染下調(diào)MACC1表達(dá)對(duì)前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3增殖和侵襲的影響。方法采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription PCR,RT-PCR)法檢測(cè)10例前列腺癌和其癌旁組織及4種前列腺癌細(xì)胞株(LNCap、PC-3、DU145、C4-2)MACC1mRNA的表達(dá);將前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3分為實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組轉(zhuǎn)染MACC1特異性小干擾RNA(small RNA interference,siRNA)(MACC1siRNA),陰性對(duì)照組轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照siRNA,空白對(duì)照組不做處理。RT-PCR法及蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)siRNA轉(zhuǎn)染前后MACC1mRNA及蛋白水平的變化,四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后PC-3細(xì)胞增殖變化,Transwell小室法檢測(cè)PC-3細(xì)胞侵襲能力的變化,蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)Met/MAPK信號(hào)通路蛋白改變。結(jié)果 10例前列腺癌組織中MACC1mRNA相對(duì)表達(dá)量為0.82±0.27,高于癌旁組織的0.09±0.05,t=23.20,P0.001;前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3、DU145和C4-2 MACC1mRNA的表達(dá)分別為0.86±0.19、0.65±0.23和0.77±0.23,高于LNCap細(xì)胞的0.17±0.07。實(shí)驗(yàn)組PC-3細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA后,MACC1mRNA表達(dá)為0.16±0.03,低于陰性對(duì)照組的0.79±0.04,t=7.91,P0.001;也低于空白對(duì)照組的0.81±0.34,t=8.61,P0.001。實(shí)驗(yàn)組MACC1蛋白表達(dá)量為0.10±0.01,顯著低于陰性對(duì)照組的0.39±0.045,t=11.21,P0.001;也低于空白對(duì)照組的0.41±0.10,t=11.73,P0.001;MACC1siRNA組PC-3細(xì)胞增殖能力在72h分別為0.58±0.65,低于陰性對(duì)照組的1.18±0.10和空白對(duì)照組的1.23±0.05,P0.001;MACC1siRNA組PC-3細(xì)胞侵襲的細(xì)胞數(shù)目為126.0±9.8,低于陰性對(duì)照組233.3±12.0及空白對(duì)照組242.3±11.5,P0.05。轉(zhuǎn)染后Met、p-MEK1/2和p-ERK1/2的MACC1siRNA蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為0.47±0.03、0.34±0.03和0.94±0.03,較對(duì)照組的0.26±0.04、0.10±0.11和0.10±0.12明顯降低,P0.05;MEK1/2和ERK1/2蛋白相對(duì)表達(dá)量無(wú)明顯下降,P0.05。結(jié)論 MACC1可能通過(guò)上調(diào)Met和MAPK信號(hào)通路促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的惡性行為。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院·國(guó)家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心·天津市腫瘤防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;天津醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院·天津泌尿外科研究所;天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院病理科;天津醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院腫瘤科;
【關(guān)鍵詞】： 前列腺癌 siRNA干擾 結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因 細(xì)胞增殖 細(xì)胞侵襲
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81572543;81301949) 天津市衛(wèi)生行業(yè)重大公關(guān)項(xiàng)目(14KG141) 國(guó)家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心個(gè)體化醫(yī)學(xué)平臺(tái)建設(shè)項(xiàng)目(13ZCZCSY20300)
【分類(lèi)號(hào)】：R737.25
【正文快照】： 中華腫瘤防治雜志,2015,22(23):1803-1808Inhibition effects of MACC1siRNA on proliferation and invasion ofhuman prostate carcinoma PC-3cellsWEI Shi-qin1,LI Chang-ying2,LI Bao-guo1,LI Jian-min2,MENG Bin3,WANG Li-li1,WANG Hai-tao41.Tianjin Medical University ，

本文編號(hào)：627064