目的：觀察色素上皮衍生因子（PEDF）對腎小球系膜細(xì)胞MCP-1、IL-6mRNA及蛋白表達(dá)的影響，并探討其可能的作用機制。 方法：以不同濃度葡萄糖（10、20、30mmol/L）及不同時間（12h、24h、48h）作用腎小球系膜細(xì)胞，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）方法檢測MCP-1、IL-6mRNA表達(dá)；加入不同濃度PEDF（10、40、160nmol/L）干預(yù)，RT-PCR和酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）方法分別檢測MCP-1、IL-6mRNA和蛋白表達(dá)，觀察PEDF對上述炎癥因子表達(dá)的影響；細(xì)胞免疫熒光方法檢測NF-κB p65蛋白表達(dá)。 結(jié)果：（1）5.6mmol/L糖可使系膜細(xì)胞中有基礎(chǔ)量的MCP-1、IL-6mRNA的表達(dá)，高糖作用后，二者的表達(dá)水平隨糖濃度升高而增高，20mmol/L濃度時達(dá)高峰（P<0.01）。當(dāng)糖濃度繼續(xù)增加至30mmol/L時，MCP-1mRNA表達(dá)不再隨糖濃度增加而增加， IL-6mRNA表達(dá)則出現(xiàn)下降（P<0.05）。在20mmol/L高糖作用12～48h范圍內(nèi)，二者表達(dá)水平隨作用時間延長而增加，呈明顯的時效關(guān)系。（2）PEDF...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖1-1不同濃度高糖對系膜細(xì)胞MCP-1mRNA表達(dá)的影響

10mmol/L組與20mmol/L組兩組間有明顯差異（P<0.01）,提示20mmol/L高糖可能為其最佳作用濃度。為排除高濃度糖產(chǎn)生的高滲條件對其表達(dá)的影響，設(shè)置含24.4mmol/L甘露醇（與30mmol/L等滲）的高滲對照組，發(fā)現(xiàn)其MCP-1表達(dá)與低....

圖1-2不同濃度高糖對系膜細(xì)胞IL-6mRNA表達(dá)的影響

濃度范圍內(nèi)培養(yǎng)的系膜細(xì)胞表達(dá)IL-6mRNA的量隨糖濃度的增高而呈遞增趨勢，不同濃度組間IL-6mRNA的表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），30mmol/L組與20mmol/L組相比表達(dá)減少，與低糖組相比表達(dá)增高（P<0.05），提示20mmol/L高糖可能....

圖2-1高糖與MCP-1mRNA表達(dá)的時效關(guān)系

圖2-1高糖與MCP-1mRNA表達(dá)的時效關(guān)系2.2高糖與腎小球系膜細(xì)胞IL-6mRNA表達(dá)的時效關(guān)系以20mmol/L高糖培養(yǎng)液作用于系膜細(xì)胞0h（空白對照組）、12h、24h、48h。結(jié)果顯示，在0～48h時間范圍內(nèi)，隨著時間的延長，IL-6的表....

圖2-2高糖與IL-6mRNA表達(dá)的時效關(guān)系

圖2-2高糖與IL-6mRNA表達(dá)的時效關(guān)系3.PEDF與高糖作用下系膜細(xì)胞MCP-1、IL-6mRNA表達(dá)的量效關(guān)系3.1PEDF與系膜細(xì)胞MCP-1mRNA表達(dá)的量效關(guān)系20mmol/L高糖作用系膜細(xì)胞48h，以不同濃度PEDF（10ng/m....

本文編號：4045530