活性維生素D3調(diào)控炎癥信號通路對糖尿病腎病大鼠腎臟保護作用及機制的研究
發(fā)布時間:2021-08-25 16:52
[目的]1.探討活性維生素D3調(diào)控NF-kB炎癥信號通路對2型糖尿病腎病大鼠腎臟保護作用及機制;2.尋找維生素D在治療糖尿病腎病中的最佳濃度。[方法]將SD大鼠60只隨機分成正常對照組(10只)、DKD模型組(50只),且DKD模型組據(jù)處理方式分為:花生油組、厄貝沙坦組、維生素D低劑量組、維生素D中劑量組、維生素D高劑量組,每組各10只。正常組以普通飼料喂養(yǎng),模型組分別以上述處理方式進行灌胃。6周后處死大鼠并稱取體重,分離血清檢測空腹血糖(FPG),甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)、胰島素(INS)、C肽(CP),收集24小時尿液計算尿量、測24h尿蛋白定量(uPro);留取腎臟組織,HE染色觀察腎組織病理學(xué)變化;實時熒光定量PCR檢測腎臟組織中NF-kB及其下游單核細胞趨化因子(MCP-1)的mRNA的表達;Western booting檢測炎癥因子NF-kB及MCP-1蛋白的表達。組間兩兩比較采用獨立樣本t檢驗,等級資料秩和檢驗。[結(jié)果](1)在血糖、24h 尿蛋白、TG、LDL-c 水平,維生素 D 低劑量組(18.20±5.95、32.24±...
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:89 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
空腹胰島素水平標(biāo)準(zhǔn)曲線
(6)BCA法測定蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線:(圖4)??StancardCurvG??|? ̄^??\?Z??I??0.35??z,??°-15〇?2?4?6?8?1丨3??Concentration????5iTnfl1?(?^tanfi?rrl5@Prnrpinf\iiant_Rr.A???M^anDn?w??Stanriarr?)??fun/p?Fit?Rp^ult*:?A??Curve?Fit:?Linear?-?A-r?Bx??ParaiTieter?Estimated?\^lue?Std.?Error?Confidena?Inter/al??STU01?A?0.169?0.005?[ai55,0.182]??fp-?=?0.99S??E.?0.050?9.29S-4?[£1048,0.053】??圖4?BCA法測定蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線??2.6.2?Western?blot檢測腎臟樣本中蛋白表達量??1.?Western?blot?凝膠電泳??(1)
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]厄貝沙坦通過核轉(zhuǎn)錄因子κB信號通路減輕高糖誘導(dǎo)的H9C2細胞炎癥反應(yīng)及凋亡的研究[J]. 雷梅先,王云開,王琦,曹原. 中國糖尿病雜志. 2017(07)
[2]2型糖尿病合并慢性腎臟病患者的腎臟病理與臨床表現(xiàn)特點[J]. 司美君,葉增純,趙文波,張笑浩,李吟,劉迅,彭暉,婁探奇. 中華腎臟病雜志. 2016 (06)
[3]維生素D與糖尿病腎病[J]. 劉燕,戴武. 安徽醫(yī)學(xué). 2015(12)
[4]活性維生素D3灌胃治療大鼠糖尿病腎病的效果及其作用機制[J]. 徐園園,魏迎鳳,盧學(xué)超,解其華,翟林云. 山東醫(yī)藥. 2016(03)
[5]JNK信號通路與糖尿病腎病的研究進展[J]. 閆婧,于為民,任小軍. 國際泌尿系統(tǒng)雜志. 2015 (05)
[6]維生素D受體基因多態(tài)性在慢性腎臟病中的研究進展[J]. 李靜靜,司曉蕓. 醫(yī)學(xué)綜述. 2015(11)
[7]維生素D與2型糖尿病關(guān)系的研究進展[J]. 孫衍,王彥,夏新霞,賀婭莎. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2015(15)
[8]維生素D與慢性腎臟病的研究進展[J]. 權(quán)志慧,夏成云. 國際泌尿系統(tǒng)雜志. 2015 (03)
[9]糖尿病腎病大鼠模型建立的比較[J]. 邢冬杰,宿世震,陳桂玉,王金鳳,曲英杰. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2014(09)
[10]維生素D與糖尿病腎病相關(guān)性研究進展[J]. 王亞娟,任建民,肖曉燕,韓峰. 中國實用內(nèi)科雜志. 2014(07)
本文編號:3362497
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:89 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
空腹胰島素水平標(biāo)準(zhǔn)曲線
(6)BCA法測定蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線:(圖4)??StancardCurvG??|? ̄^??\?Z??I??0.35??z,??°-15〇?2?4?6?8?1丨3??Concentration????5iTnfl1?(?^tanfi?rrl5@Prnrpinf\iiant_Rr.A???M^anDn?w??Stanriarr?)??fun/p?Fit?Rp^ult*:?A??Curve?Fit:?Linear?-?A-r?Bx??ParaiTieter?Estimated?\^lue?Std.?Error?Confidena?Inter/al??STU01?A?0.169?0.005?[ai55,0.182]??fp-?=?0.99S??E.?0.050?9.29S-4?[£1048,0.053】??圖4?BCA法測定蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線??2.6.2?Western?blot檢測腎臟樣本中蛋白表達量??1.?Western?blot?凝膠電泳??(1)
2.?RNA完整性檢測??1%瓊脂糖凝膠電泳,TAE電泳緩沖液中,150v,電泳25min,檢測RNA的??完整性。(見圖5)??正1?花1?厄1?VDl?VZl?VGl|?正2?花2?厄2?VD2?VZZ?VG2)正3?花3?厄3?VD3?VZ3?VG3?丨卜:4?花4?厄4?VD4?VZ4?VG4??28S?I?叫??18S|?,?'?I??5s?I?^?:r‘,'I??圖5各樣本RNA完整性檢測??2.7.3逆轉(zhuǎn)錄步驟??1.按照下表的基因組DNA的去除體系配制混合液,徹底混勻。簡短離心,并??置于42°C,孵育3?min。然后置于冰上放置。(表9)??27??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]厄貝沙坦通過核轉(zhuǎn)錄因子κB信號通路減輕高糖誘導(dǎo)的H9C2細胞炎癥反應(yīng)及凋亡的研究[J]. 雷梅先,王云開,王琦,曹原. 中國糖尿病雜志. 2017(07)
[2]2型糖尿病合并慢性腎臟病患者的腎臟病理與臨床表現(xiàn)特點[J]. 司美君,葉增純,趙文波,張笑浩,李吟,劉迅,彭暉,婁探奇. 中華腎臟病雜志. 2016 (06)
[3]維生素D與糖尿病腎病[J]. 劉燕,戴武. 安徽醫(yī)學(xué). 2015(12)
[4]活性維生素D3灌胃治療大鼠糖尿病腎病的效果及其作用機制[J]. 徐園園,魏迎鳳,盧學(xué)超,解其華,翟林云. 山東醫(yī)藥. 2016(03)
[5]JNK信號通路與糖尿病腎病的研究進展[J]. 閆婧,于為民,任小軍. 國際泌尿系統(tǒng)雜志. 2015 (05)
[6]維生素D受體基因多態(tài)性在慢性腎臟病中的研究進展[J]. 李靜靜,司曉蕓. 醫(yī)學(xué)綜述. 2015(11)
[7]維生素D與2型糖尿病關(guān)系的研究進展[J]. 孫衍,王彥,夏新霞,賀婭莎. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2015(15)
[8]維生素D與慢性腎臟病的研究進展[J]. 權(quán)志慧,夏成云. 國際泌尿系統(tǒng)雜志. 2015 (03)
[9]糖尿病腎病大鼠模型建立的比較[J]. 邢冬杰,宿世震,陳桂玉,王金鳳,曲英杰. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2014(09)
[10]維生素D與糖尿病腎病相關(guān)性研究進展[J]. 王亞娟,任建民,肖曉燕,韓峰. 中國實用內(nèi)科雜志. 2014(07)
本文編號:3362497
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