目的前列腺癌轉(zhuǎn)移是前列腺癌難治和患者死亡的主要原因之一,早期準(zhǔn)確預(yù)測和阻斷轉(zhuǎn)移信號通路是目前前列腺癌研究的難點和熱點,極具臨床意義和價值。腫瘤轉(zhuǎn)移促進因素與抑制因素的失衡是腫瘤轉(zhuǎn)移的主要原因,腫瘤細(xì)胞特有能量代謝模式(Warburg效應(yīng))的開啟及所帶來的一列效應(yīng)(細(xì)胞代謝、轉(zhuǎn)移促進基因的激活等)在打破這種平衡狀態(tài)中發(fā)揮重要作用,其中甘氨酸脫羧酶(GLDC)與Warburg效應(yīng)有著密切的相關(guān)性,但其具體機制有待闡明。因此,我們將探究GLDC與Warburg效應(yīng)的關(guān)系及其介導(dǎo)前列腺癌轉(zhuǎn)移的分子機制。方法1.TCGA數(shù)據(jù)庫分析GLDC在正常前列腺組織和前列腺癌組織中的表達水平。Western Blot實驗驗證GLDC在前列腺癌細(xì)胞和組織標(biāo)本中的表達水平。2.GLDC差異性表達后,細(xì)胞劃痕實驗、Transwell遷移及侵襲實驗,檢測前列腺癌細(xì)胞的平行遷移、垂直遷移及侵襲能力。3.GLDC差異性表達后,代謝組芯片分析前列腺癌細(xì)胞的代謝水平變化,葡萄糖攝取實驗、乳酸生成實驗及乳酸脫氫酶實驗檢測前列腺癌細(xì)胞葡萄糖攝取量、乳酸生成量及乳酸脫氫酶活性。4.將野生型GLDC過表達質(zhì)粒及點突變酶失活GLDC質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染22RV1細(xì)胞后,細(xì)胞劃痕實驗、Transwell遷移及侵襲實驗,檢測其平行遷移、垂直遷移及侵襲能力。葡萄糖攝取實驗、乳酸生成實驗及乳酸脫氫酶實驗,檢測其葡萄糖攝取量、乳酸生成量及乳酸脫氫酶活性。5.GLDC在前列腺癌中的臨床意義:單因素與多因素分析以及生存分析。結(jié)果1.GLDC在正常前列腺組織中的表達顯著低于前列腺癌組織。GLDC在局限性前列腺癌細(xì)胞(22RV1)、轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞(DU145、LnCaP)中的表達量依次增高。2.沉默或過表達GLDC可以顯著降低或提高前列腺癌細(xì)胞的平行遷移、垂直遷移及侵襲能力。3.代謝組芯片分析,發(fā)現(xiàn)GLDC差異性表達可顯著改變前列腺癌細(xì)胞的代謝水平。沉默或過表達GLDC可顯著降低或提高前列腺癌細(xì)胞葡萄糖攝取量、乳酸生成量及乳酸脫氫酶活性。4.22RV1細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染野生型GLDC過表達質(zhì)粒及點突變酶失活GLDC質(zhì)粒后,均成功過表達了GLDC。與GLDC點突變酶失活的22RV1細(xì)胞相比,野生型GLDC過表達的22RV1細(xì)胞的平行遷移、垂直遷移及侵襲能力均顯著提高;葡萄糖攝取量、乳酸生成量及乳酸脫氫酶活性亦均明顯增加。5.單因素與多因素分析結(jié)果顯示,GLDC高表達是前列腺癌患者臨床進展的獨立危險因素。無進展生存率分析結(jié)果表明,GLDC高表達前列腺癌患者的無進展生存率明顯下降。結(jié)論1.GLDC高表達于前列腺癌組織和轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞。2.GLDC可促進前列腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移。3.GLDC通過增強Warburg效應(yīng)介導(dǎo)前列腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移。4.GLDC酶活性是前列腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移功能所必需的。5.GLDC的高表達與前列腺癌的臨床進展預(yù)后有著密切聯(lián)系。
【學(xué)位單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R737.25
【部分圖文】：

逡逑組織中的表達顯著低于前列腺癌組織（圖１－１Ａ）。在同一個體中做配對分析后逡逑發(fā)現(xiàn)，ＧＬＤＣ在癌旁組織中的表達顯著低于前列腺癌組織（圖１－１Ｂ）。逡逑Ａ邐Ｂ逡逑ＴＣＧＡ－ＰＲＡＤ邐ＴＣＧＡ－ＰＲＡＤ逡逑？邐（Ｐ＝０．０００４）邐＿邐（Ｐ＝０．００２８）逡逑ｆ邋４－，邐邐二邐邋ｆ邋４－，邐邐＾邐逡逑ｉ３－邐？：邐ｊＭｔａｆ邐ｉ３－邐？：邐■■■：：■逡逑Ｉ邋２邋：：：：：：：疆�。插澹海海海海海海菏义�；：\」衿逡逑Ｑ邋－１」邐Ｎｏｒｍａｌ邐Ｔｕｍｏｒ邐３邋？＊＊」邐Ｎｏ曑１邐Ｊｕｍｏｒ逡逑（３邐（ｎ＝５２）邐（ｎ＝４９７）邐？邐（ｎ＝５２）邐（ｎ＝５２｝逡逑圖１－１邋ＴＣＧＡ數(shù)據(jù)庫分析顯示ＧＬＤＣ在正常前列腺組織中的表達顯著低于前列腺癌組逡逑織（Ａ），而在同一個體中做配對分析發(fā)現(xiàn)，ＧＬＤＣ在癌旁組織中的表達顯著低于前列腺癌逡逑組織（Ｂ）。逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋ＴＣＧＡ邋ｄａｔａｂａｓｅ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｓｈｏｗｅｄ邋ｔｈａｔ邋ｔｈｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋ＧＬＤＣ邋ｉｎ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｐｒｏｓｔａｔｅ逡逑ｔｉｓｓｕｅ邋ｗａｓ邋ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ邋ｌｏｗｅｒ邋ｔｈａｎ邋ｔｈａｔ邋ｉｎ邋ｐｒｏｓｔａｔｅ邋ｃａｎｃｅｒ邋ｔｉｓｓｕｅ邋（Ａ）

逡逑組織中的表達顯著低于前列腺癌組織（圖１－１Ａ）。在同一個體中做配對分析后逡逑發(fā)現(xiàn)，ＧＬＤＣ在癌旁組織中的表達顯著低于前列腺癌組織（圖１－１Ｂ）。逡逑Ａ邐Ｂ逡逑ＴＣＧＡ－ＰＲＡＤ邐ＴＣＧＡ－ＰＲＡＤ逡逑？邐（Ｐ＝０．０００４）邐＿邐（Ｐ＝０．００２８）逡逑ｆ邋４－，邐邐二邐邋ｆ邋４－，邐邐＾邐逡逑ｉ３－邐？：邐ｊＭｔａｆ邐ｉ３－邐？：邐■■■：：■逡逑Ｉ邋２邋：：：：：：：疆�。插澹海海海海海海菏义�；：\」衿逡逑Ｑ邋－１」邐Ｎｏｒｍａｌ邐Ｔｕｍｏｒ邐３邋？＊＊」邐Ｎｏ曑１邐Ｊｕｍｏｒ逡逑（３邐（ｎ＝５２）邐（ｎ＝４９７）邐？邐（ｎ＝５２）邐（ｎ＝５２｝逡逑圖１－１邋ＴＣＧＡ數(shù)據(jù)庫分析顯示ＧＬＤＣ在正常前列腺組織中的表達顯著低于前列腺癌組逡逑織（Ａ），而在同一個體中做配對分析發(fā)現(xiàn)，ＧＬＤＣ在癌旁組織中的表達顯著低于前列腺癌逡逑組織（Ｂ）。逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋ＴＣＧＡ邋ｄａｔａｂａｓｅ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｓｈｏｗｅｄ邋ｔｈａｔ邋ｔｈｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋ＧＬＤＣ邋ｉｎ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｐｒｏｓｔａｔｅ逡逑ｔｉｓｓｕｅ邋ｗａｓ邋ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ邋ｌｏｗｅｒ邋ｔｈａｎ邋ｔｈａｔ邋ｉｎ邋ｐｒｏｓｔａｔｅ邋ｃａｎｃｅｒ邋ｔｉｓｓｕｅ邋（Ａ）

碩士學(xué)位論文逡逑Ｃ）結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染ｓｉＲＮＡ４８ｈ后，ｓｉ－ＧＬＤＣ組的ＤＵ１４５細(xì)胞劃痕面積愈合百逡逑分比與Ｃｏｎｔｒｏ丨組及ｓｉ－ＮＣ組相比均明顯減少（＊＊＊Ｐ＜０．０１邋）。Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ遷移（圖逡逑２－ＩＤ，邋Ｆ）及侵襲實驗（圖２－１Ｅ，Ｇ）結(jié)果均顯示，轉(zhuǎn)染ｓｉＲＮＡ４８ｈ后，ｓｉ－ＧＬＤＣ逡逑組的ＤＵ１４５細(xì)胞從上室穿過小室膜至下室的細(xì)胞數(shù)較Ｃｏｎｔｒｏｌ組及ｓｉ－ＮＣ組明逡逑顯減少。逡逑Ａ邐Ｃｏｎｔｒｏｌ邐ｓｉ－ＮＣ邐ｓｉ－ＧＬＤＣ逡逑

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1 馬建宏;曹開源;徐霖;鐘慧玲;張素粉;羅虹嬌;庹玖玲;張?zhí)?劉建中;;前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的篩選[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2015年11期

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本文編號：2817741