本文選題：缺氧 + G-M阻滯　； 參考：《東南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年02期

【摘要】：目的:探討腎小管上皮細(xì)胞G2-M期阻滯在缺氧誘導(dǎo)的腎間質(zhì)纖維化中的作用。方法:體外實驗,人腎小管上皮細(xì)胞(HK2)分別置于常氧21%和缺氧1%的孵箱里,培養(yǎng)24,48 hrs。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測缺氧48 hrs后上皮細(xì)胞的周期分布;采用Western blot法檢測Collagen4A1(COL4A1)及α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的蛋白表達(dá)水平。單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)14 d小鼠模型,HE及Masson染色觀察腎組織病理改變及纖維化程度,免疫組化染色觀察α-SMA的表達(dá)及部位;Western blot檢測低氧標(biāo)記分子HIF-1α、細(xì)胞周期蛋白cyclinB1和cyclinD1的蛋白水平。結(jié)果:與常氧組比較,缺氧組腎小管上皮細(xì)胞G2/M期比例增高(P0.05),同時α-SMA和COL4A1的蛋白表達(dá)水平增高(P0.05);與假手術(shù)組比較,HE及Masson染色顯示模型組腎組織纖維化程度增高,α-SMA的表達(dá)增高且主要分布在間質(zhì)中;Western blot結(jié)果顯示:HIF-1α及G2/M期標(biāo)記物cyclinB1/cyclinD1比值增加。結(jié)論:腎小管上皮細(xì)胞G2-M期阻滯參與缺氧誘導(dǎo)的腎間質(zhì)纖維化。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of G 2-M arrest in renal interstitial fibrosis induced by hypoxia. Methods: in vitro, human renal tubular epithelial cells (HK2) were incubated in a incubator containing 21% normoxic and 1% hypoxia, respectively. Flow cytometry was used to detect the distribution of epithelial cell cycle after 48 hrs hypoxia, and Western blot assay was used to detect the protein expression of Collagen4A1COL4A1 and 偽 -smooth muscle actin (偽 -SMAs). The pathological changes of renal tissue and the degree of renal fibrosis were observed by HE and Masson staining. The expression of 偽 -SMA and the protein levels of HIF-1 偽, cyclin cyclinB1 and cyclinD1 were detected by immunohistochemical staining. Results: compared with normoxic group, Compared with sham-operated group, the ratio of G _ 2 / M phase of renal tubular epithelial cells in hypoxia group and the protein expression level of 偽 -SMA and COL4A1 in renal tubular epithelial cells were increased and the expression of 偽 -SMA and 偽 -SMA in model group was higher than that in sham operation group, and the expression of 偽 -SMA and 偽 -SMA in model group was higher than that in sham-operated group. The results of Western blot in the interstitial tissue showed that the ratio of cyclinB1/cyclinD1 in the G 2 / M phase marker and the ratio of 1% HIF-1 偽 and G 2 / M phase marker were increased. Conclusion: G 2-M phase block of renal tubular epithelial cells is involved in hypoxia-induced renal interstitial fibrosis.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院腎內(nèi)科國家腫瘤重點實驗室;軍事口腔醫(yī)學(xué)國家重點實驗室口腔疾病國家臨床醫(yī)學(xué)研究中心陜西省口腔生物工程技術(shù)研究中心第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院麻醉科;第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員一旅;海軍總醫(yī)院腫瘤診療中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(NO.81370789)
【分類號】：R692

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本文編號：1847140