本文關(guān)鍵詞：利用體內(nèi)噬菌體展示技術(shù)篩選膀胱癌特異性結(jié)合肽

  更多相關(guān)文章： 噬菌體展示技術(shù) 膀胱癌 特異性結(jié)合肽

【摘要】：目的:利用體內(nèi)噬菌體展示技術(shù)篩選與人膀胱移行細(xì)胞癌特異性結(jié)合的小分子多肽。方法:將人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞BIU87接種于裸鼠體內(nèi),制備膀胱癌荷瘤小鼠模型,尾靜脈注射噬菌體展示環(huán)七肽庫,然后篩選與膀胱移行細(xì)胞癌特異性結(jié)合的含外源多肽的噬菌體,經(jīng)過3輪體內(nèi)篩選后,免疫組織化學(xué)法及ELISA法鑒定單克隆噬菌體對BIU87的親和力。提取陽性單克隆噬菌體單鏈DNA進(jìn)行測序,并推導(dǎo)出外源多肽氨基酸序列,化學(xué)合成多肽、制備分子探針后采用激光掃描共聚焦顯微鏡術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)鑒定多肽對膀胱癌細(xì)胞和組織的特異性。結(jié)果:3輪體內(nèi)篩選后,噬菌體富集率達(dá)到4.334×102倍。免疫組化結(jié)果顯示,腫瘤組織中噬菌體肽的含量隨著每一輪篩選呈增長趨勢,且結(jié)合逐漸增強(qiáng),同時(shí)由于噬菌體經(jīng)肝、腎代謝,可見肝臟結(jié)合大量非特異性的噬菌體。ELISA結(jié)果顯示,隨機(jī)挑選的30個(gè)單克隆噬菌體斑中,有24個(gè)陽性噬菌體,其中10個(gè)噬菌體對BIU87有較強(qiáng)的親和力,對其測序并推導(dǎo)出3種多肽序列,重復(fù)率最高的序列CSSPIGRHC(8/10)命名為NYZL1�；瘜W(xué)合成FITC-C6-NYZL1,通過激光掃描共聚焦顯微鏡術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)均證明多肽NYZL1可以特異性結(jié)合膀胱癌細(xì)胞。結(jié)論:利用體內(nèi)噬菌體展示技術(shù)篩選出了與人膀胱移行細(xì)胞癌特異性結(jié)合的小分子多肽NYZL1,為膀胱癌早期診斷和靶向治療提供一定的理論依據(jù)。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81172444)
【分類號】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌(Bladder carcinoma)是最常見的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤之一,其中75%~85%為淺表性膀胱腫瘤,又稱為非肌肉浸潤性腫瘤(Non muscle invasivebladder tumor,NMIBC)。雖然采取膀胱癌手術(shù)及術(shù)后綜合療法顯著提高了患者5年生存率,但因膀胱癌早期血尿�？勺孕袦p輕或停止,易給患者造成

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 俞莉章,黃雅麗,楊晨,宋蓮芬,徐令巽,顧方六;人體膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞系BIU-87的建立及其生物學(xué)特性[J];北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1989年01期

2 李俊;楊曉峰;劉仍新;;小分子肽CSNRDARRC與膀胱移行細(xì)胞癌組織特異性結(jié)合的研究[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2012年03期

3 趙揚(yáng);楊曉峰;郝小強(qiáng);;多肽CSNRDARRC與膀胱癌細(xì)胞結(jié)合親和性及其位點(diǎn)的研究[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2011年02期

4 劉仍新;楊曉峰;李俊;;FITC-CSNRDARRC分子探針靶向標(biāo)記與膀胱移行細(xì)胞癌分級相關(guān)性的研究[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2012年29期

5 Mian Kong;Junye Wang;Baojiang Li;;噬菌體展示技術(shù)在乳腺癌靶向治療中的應(yīng)用(英文)[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2013年05期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 俞莉章,黃雅麗,宋蓮芬,顧方六,張子娟,王戈華;新建人膀胱癌細(xì)胞系BIU-87的染色體分析[J];北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1990年02期

2 張濤;;分子靶向藥物治療非小細(xì)胞肺癌的臨床研究芻議[J];北方藥學(xué);2013年05期

3 Reinhild Holmer;Freya A Goumas;Georg H Waetzig;Stefan Rose-John;Holger Kalthoff;;Interleukin-6: a villain in the drama of pancreatic cancer development and progression[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年04期

4 李俊;楊曉峰;劉仍新;;小分子肽CSNRDARRC與膀胱移行細(xì)胞癌組織特異性結(jié)合的研究[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2012年03期

5 王娜;王迪;唐玉婷;黃亮;周劍峰;;EGFP標(biāo)記的A20細(xì)胞構(gòu)建小鼠B細(xì)胞播散型淋巴瘤模型[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年25期

6 劉仍新;楊曉峰;李俊;;FITC-CSNRDARRC分子探針靶向標(biāo)記與膀胱移行細(xì)胞癌分級相關(guān)性的研究[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2012年29期

7 王瑋;楊曉峰;凡振偉;張帆;徐磊;;中國人膀胱癌BIU-87細(xì)胞導(dǎo)向肽的體外篩選與特異性鑒定[J];中國腫瘤生物治療雜志;2013年05期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李永生;漢防己甲素對膀胱腫瘤細(xì)胞BIU-87及BIU-87/ADM作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2003年

2 劉奔;Bcl-2基因?qū)Π螂装┘?xì)胞抗氧化能力增強(qiáng)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

3 劉玉明;MIF基因在膀胱癌組織中的表達(dá)及其反義表達(dá)載體對膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的研究[D];中南大學(xué);2007年

4 汪盛;轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1在膀胱癌中的表達(dá)及對膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[D];中南大學(xué);2007年

5 陳岐輝;靶向Hiwi基因的RNAi對膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[D];吉林大學(xué);2009年

6 熱娣;特異性靶向晚期糖基化終產(chǎn)物受體（RAGE）的siRNA降低人類乳腺癌增殖研究[D];中南大學(xué);2013年

7 施挺;膀胱癌5637細(xì)胞系的體外培養(yǎng)及荷瘤裸鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

8 陳紅錦;黃芩苷干預(yù)錯(cuò)配修復(fù)基因功能缺失的裸鼠結(jié)腸原位移植瘤的作用及分子機(jī)制研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

9 劉俊廷;光學(xué)斷層分子成像定量分析及其應(yīng)用[D];西安電子科技大學(xué);2014年

10 樊志超;應(yīng)用活體流式細(xì)胞儀和活體成像技術(shù)對肝癌進(jìn)展與轉(zhuǎn)移的監(jiān)測及療效評估研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 盧績;EZH2基因在膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞株和癌組織中的表達(dá)及意義[D];吉林大學(xué);2007年

2 陸俊杰;輸尿管皮膚造口術(shù)在全膀胱切除術(shù)后尿流改道的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2008年

3 李俊;小分子肽CSNRDARRC與膀胱移行細(xì)胞癌組織特異性結(jié)合的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

4 劉仍新;FITC-CSNRDARRC分子探針靶向標(biāo)記與膀胱移行細(xì)胞癌分級相關(guān)性的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

5 白向茹;水溶液中甘氨酰二肽與咪唑離子液體相互作用的電導(dǎo)、體積及光譜性質(zhì)研究[D];鄭州大學(xué);2013年

6 王瑋;中國人膀胱癌BIU-87細(xì)胞系導(dǎo)向肽的體外篩選與特異性鑒定[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

7 曹陽;ACAP4磷酸化抑制劑LCD313對肝癌轉(zhuǎn)移抑制作用的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 高亦博;肺部惡性腫瘤原代裸鼠移植瘤模型的建立[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

9 劉明;熒光原位雜交檢測尿脫落細(xì)胞中3號、7號、17號染色體及9p16基因突變值與膀胱移行細(xì)胞癌病理分級相關(guān)性研究[D];吉林大學(xué);2014年

10 孔冕;乳腺癌干細(xì)胞富集及其特異性多肽的篩選[D];青島大學(xué);2014年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 Li-Sha Chen;An-Xin Wang;Bing Dong;Ke-Feng Pu;Li-Hua Yuan;Yi-Min Zhu;;A new prospect in cancer therapy: targeting cancer stem cells to eradicate cancer[J];癌癥;2012年12期

2 苗本春,耿美玉,李靜;911-FITC熒光探針與免疫細(xì)胞的結(jié)合實(shí)驗(yàn)[J];中國海洋藥物;2003年05期

3 ;A novel peptide, selected from phage display library of random peptides, can efficiently target into human breast cancer cell[J];Chinese Science Bulletin;2008年06期

4 趙揚(yáng);楊曉峰;郝小強(qiáng);;多肽CSNRDARRC與膀胱癌細(xì)胞結(jié)合親和性及其位點(diǎn)的研究[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2011年02期

5 韋華;郝曉柯;蘇明權(quán);;多肽K237與前列腺癌細(xì)胞系LNcap的親和性[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2007年01期

6 趙薇;孟麟;高玉婧;姜北海;;噬菌體隨機(jī)肽庫中乳腺癌腫瘤標(biāo)志物的篩選[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年10期

7 張暉,詹金彪,許林海,嚴(yán)士q,王克夷;噬菌體肽庫展示的應(yīng)用及其最新進(jìn)展[J];中國藥理學(xué)通報(bào);2003年04期

8 羅波;;Caveolin-1在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)及意義[J];中外醫(yī)學(xué)研究;2011年11期

9 ;乳腺癌干細(xì)胞多藥耐藥基因的表達(dá)及意義(英文)[J];Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2008年09期

10 王凈;王慧;王超;袁媛;崔巖;葉菁;李青;;人源性抗乳腺癌單鏈抗體庫的篩選與初步鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年08期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃后寶;董昌斌;路建磊;姜書傳;;表淺性膀胱癌預(yù)后與癌腫數(shù)目、病理分級的關(guān)系[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2006年04期

2 李朝爭;李妤蓉;趙金媛;;表淺性膀胱癌的治療[J];社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

3 于春華;李金慶;高岱清;;膀胱癌化學(xué)藥物敏感性試驗(yàn)[J];河北醫(yī)學(xué);2007年02期

4 郝楠馨;諸靜其;曹開明;常時(shí)新;汪波;劉穎;;膀胱癌的多層螺旋CT征象與病理表現(xiàn)的關(guān)系[J];中國醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志;2009年02期

5 夏昕暉;何莉;戴福宏;鐘甘平;;調(diào)控組蛋白乙酰化水平抑制膀胱癌細(xì)胞周期的研究[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2009年04期

6 陳建超;;中西醫(yī)結(jié)合治療預(yù)防膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)觀察[J];中國醫(yī)藥指南;2010年18期

7 趙德祥;;螺旋CT在膀胱癌診斷中的應(yīng)用[J];醫(yī)學(xué)信息(上旬刊);2010年08期

8 張輝;尚超;宋永勝;;肝癌衍生生長因子與膀胱癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性及其對細(xì)胞侵襲能力影響[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2010年05期

9 木海琦;楊森;王怡君;陳映鶴;;百里醌抑制膀胱癌細(xì)胞生長的實(shí)驗(yàn)研究[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2011年11期

10 李濤;楊立;王志平;;鼠膀胱癌原位模型建立的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2013年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張永春;谷江;孫發(fā);石家齊;;傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在膀胱癌治療中的意義[A];2010年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2010年

2 潘春武;沈周俊;唐小瑩;王e，

本文編號：1136680