本文關鍵詞：Sonic hedgehog信號通路在脂多糖所致小鼠急性肺損傷中的表達變化及意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討Sonic hedgehog (SHH)信號通路中的相關分子SHH、PTC、GLI1在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)所致的小鼠急性肺損傷(acute lung jinjury, ALI)中的表達變化及意義,為臨床上急性肺損傷的治療提供新的思路。方法：選擇5-7周齡、體質量20-25g的雄性BALB/c小鼠作為實驗動物,并隨機分為對照組(腹腔注射等量生理鹽水)、LPS處理組(5mg/kg LPS腹腔注射)、環(huán)巴胺處理組(5mg/kg LPS腹腔注射后30min腹腔注射環(huán)巴胺50mg/kg)。分別于給藥后6h、12h、24h,戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后留取標本,肉眼觀察肺組織大體改變,4%多聚甲醛固定后切片并HE染色觀察肺組織病理學改變,并做出病理損傷評分；取一肺葉60℃48h烘干后,測定肺組織濕干質量比值(wet mass/dry mass, W/D);熒光實時定量PCR檢測不同處理組肺組織腫瘤壞死因子-α (turner necrosis factor-alpha, TNF-α)、SHH、PTC及下游轉錄因子GLI1的mRNA表達；Western blot檢測各處理組肺組織核因子-κB (nuclear factor-κB, NF-κB)、SHH和GLIl的蛋白表達情況。結果：對照組肺組織光鏡下可見肺泡腔清晰、無明顯炎性細胞浸潤,病理損傷評分很低；LPS處理組肺組織肺泡充血水腫、肺泡隔明顯增厚,肺間質廣泛炎性細胞浸潤,肺組織病理損傷評分明顯高于對照組(P0.01)；環(huán)巴胺處理組肺泡腔大范圍消失、肺組織大片實變、彌漫炎性細胞浸潤,各時間點肺組織病理損傷評分均較LPS處理組高(P0.05)。對照組在各時間點的W/D均較低,LPS處理組各時間點的W/D均較對照組高(6h、12h時P0.01,24h時P0.05),而環(huán)巴胺處理組的W/D在各時間點均高于LPS處理組(P0.05)。對照組TNF-α mRNA的表達在各時間點均較低,LPS處理組TNF-α mRNA的表達在各時間點均明顯高于對照組(P0.01),環(huán)巴胺處理組在12h、24h時TNF-αmRNA的表達較LPS處理組高(P0.05)。對照組NF-κB蛋白的表達很低,LPS處理組NF-κB的蛋白表達明顯高于對照組(6h、12h,P0.01；24h,P0.05),而環(huán)巴胺處理組NF-κB的蛋白表達較LPS處理組更高(P0.01)。對照組SHH.PTC.GLI1的mRNA表達水平均較低。LPS處理組在6h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達水平與對照組無明顯差異(P0.05),而在12h、24h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達均明顯高于對照組(P0.01),且與時間呈正相關(P0.01)。環(huán)巴胺處理組在6h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達與LPS處理組相比無明顯差異(P0.05),12h時SHH、PTC、GLI1的InRNA表達均較LPS處理組降低(P0.05),24h時其表達較LPS處理組明顯下降(SHH P0.01,PTC P0.05, GLI1P0.01)。對照組各時間點的SHH、GLI1蛋白表達均較低。與對照組相比,LPS處理組在6h、12h、24 h的SHH、GLI1蛋白表達水平均明顯升高(SHH 6h P0.05,12h.24h P0.01；GLIl各時間點P0.01),且與時間呈正相關(P0.01)。環(huán)巴胺處理組SHH. GLI1的蛋白表達水平均較LPS處理組降低(SHH P0.01, GLI1 P0.05)。結論：1.對照組SHH、PTC、GLI1的mRNA表達及SHH、GLI1的蛋白表達量均很低,SHH信號通路處于抑制狀態(tài),而LPS處理后12h、24h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達量及6h、12h、24h時SHH、GLI1的蛋白表達量均明顯高于對照組,提示在LPS所致的急性肺損傷中存在SHH信號通路的激活,表達量明顯增加。2.給予SHH信號通路的抑制劑環(huán)巴胺干預后,12h、24h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達量及SHH、GLI1的蛋白表達量均較單獨LPS處理組下降,提示SHH信號通路的表達受到抑制,而此時,環(huán)巴胺處理組的肺組織病理損傷評分、W/D、TNF-α mRNA和NF-κB蛋白的表達卻較單獨LPS處理SHH信號通路激活時更高,即SHH信號通路受抑制時的肺組織損傷程度較SHH信號通路激活時重,說明SHH信號通路受抑制可加重肺組織的損傷程度,提示SHH信號通路的激活可減輕肺組織損傷、參與肺組織損傷后修復過程。
【關鍵詞】：Sonic hedgehog信號通路 急性肺損傷 脂多糖 環(huán)巴胺
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R563
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號說明11-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-23
• 結果23-31
• 討論31-34
• 結論34-35
• 創(chuàng)新點35-36
• 參考文獻36-41
• 文獻綜述41-55
• 參考文獻47-55
• 致謝55-56
• 發(fā)表學術論文目錄56-57
• 附件57

【參考文獻】

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1 涂自智,肖衛(wèi)民,劉梅冬,尢家

本文編號：422699