背景:右美托咪啶(Dexmedetomidine,Dex)是一種高選擇性、高特異性的α2腎上腺素受體激動(dòng)劑,具有鎮(zhèn)靜、催眠、麻醉和鎮(zhèn)痛作用,其α2:α1受體親和力之比為1620:1。在大量臨床與基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)中均發(fā)現(xiàn)右美托咪啶能夠顯著抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡以及對(duì)發(fā)育中腦組織具有神經(jīng)保護(hù)作用,但其在細(xì)胞分子水平的作用機(jī)制尚不十分清楚。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum,ER)應(yīng)激作為真核細(xì)胞的一種保護(hù)性應(yīng)激反應(yīng),也是ER內(nèi)穩(wěn)態(tài)亞細(xì)胞損傷的病理過(guò)程。諸如營(yíng)養(yǎng)不足、鈣濃度變化氧化應(yīng)激、以及缺血再灌注損傷等生理病理情況均能誘導(dǎo)ER內(nèi)蛋白質(zhì)的錯(cuò)誤折疊,誘發(fā)ER應(yīng)激。作為啟動(dòng)細(xì)胞凋亡的重要途徑之一,研究已表明ER應(yīng)激參與了心、腦、腎等重要器官缺血再灌注損傷的病理生理過(guò)程。本實(shí)驗(yàn)旨在細(xì)胞水平觀察不同濃度右美托咪啶對(duì)糖氧剝奪/再灌注誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用,并探討ER應(yīng)激在其神經(jīng)保護(hù)作用中的潛在機(jī)制。目的:探索并研究Dex對(duì)OGD/R誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。應(yīng)用10μM全反式維甲酸(ATRA)3天和80n M十四烷酰佛波醇乙酯酸(TPA)3天序貫誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞向神經(jīng)元分化。根據(jù)預(yù)實(shí)...

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1. 引言
2. 材料與方法
    2.1 細(xì)胞株
    2.2 抗體
    2.3 主要試劑與耗材
    2.4 主要設(shè)備與儀器
    2.5 主要試劑及溶液配方
    2.6 細(xì)胞培養(yǎng)與藥物誘導(dǎo)分化
        2.6.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.6.2 ATRA與TPA序貫誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞分化
    2.7 誘導(dǎo)后細(xì)胞免疫熒光
    2.8 糖氧剝奪再灌注OGD/R模型的構(gòu)建
    2.9 右美托咪啶處理后細(xì)胞存活率MTT檢測(cè)
    2.10 右美托咪啶處理后細(xì)胞流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)
    2.11 免疫印跡法檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白的表達(dá)
        2.11.1 蛋白質(zhì)樣品的制備與低溫儲(chǔ)存
        2.11.2 SDS-PAGE凝膠制備
        2.11.3 上樣和電泳分離
        2.11.4 轉(zhuǎn)膜
        2.11.5 IB檢測(cè)
    2.12 統(tǒng)計(jì)方法
3. 結(jié)果
    3.1 ATRA 與 TPA 序貫誘導(dǎo) SH-SY5Y 向神經(jīng)元分化
    3.2 ATRA與TPA序貫誘導(dǎo)SH-SY5Y向神經(jīng)元分化后Neun染色
    3.3 OGD12h/R12h SH-SY5Y細(xì)胞存活率接近 50%
    3.4 10μM DEX抑制OGD/R誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡
    3.5 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)
4. 討論
5. 結(jié)論
6. 引用文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3810187