噻拉嗪對(duì)大鼠腦神經(jīng)系統(tǒng)PKA、ERK1/2/CREB/BDNF信號(hào)通路影響的研究
發(fā)布時(shí)間:2022-10-04 18:23
本試驗(yàn)以雄性Wistar大鼠為研究對(duì)象,給予噻拉嗪麻醉,通過(guò)測(cè)定大鼠不同腦區(qū)不同麻醉時(shí)期的PKA、ERK1/2/CREB/BDNF信號(hào)通路中的相關(guān)蛋白及基因表達(dá)的變化,探討噻拉嗪麻醉的作用機(jī)理。試驗(yàn)選取35只雄性Wistar大鼠,分成對(duì)照組(C)和麻醉組(X),麻醉組又被隨機(jī)分為6組(n=5):誘導(dǎo)組(X1)、翻正反射消失0 min組(X2)、翻正反射消失30 min組(X3)、翻正反射消失60 min組(X4)、翻正反射恢復(fù)0 min組(X5)和翻正反射恢復(fù)30 min組(X6)。對(duì)照組大鼠在注射生理鹽水8 min后,麻醉組在注射噻拉嗪(70 mg/kg)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)之后,立即斷頭處死大鼠并取腦組織,利用RT-PCR方法檢測(cè)GluR1、GluR2、ERK1/2、PKC、PKA、CREB、c-jun、c-fos、fos-B和BDNF的mRNA表達(dá);Western blot方法檢測(cè)GluR1、GluR2、ERK1/2/p-ERK1/2、PKA/p-PKA、PKC/p-PKC、CREB/p-CREB和BDNF的蛋白表達(dá)。利用ATP酶試劑盒測(cè)定ATP酶的活性,通過(guò)ELISA試劑盒測(cè)定cAMP的...
【文章頁(yè)數(shù)】:79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 前言
1.1 噻拉嗪的概述
1.1.1 噻拉嗪的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用
1.1.2 噻拉嗪的麻醉作用
1.1.3 噻拉嗪復(fù)合麻醉劑的應(yīng)用
1.2 動(dòng)物全身麻醉
1.2.1 全身麻醉概念
1.2.2 全身麻醉的研究進(jìn)展
1.2.3 全身麻醉對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用
1.2.4 全麻藥與相關(guān)信號(hào)通路的關(guān)系
1.3 CREB信號(hào)通路與麻醉
1.3.1 GluR1、GluR2與麻醉的關(guān)系
1.3.2 ATP酶與麻醉的關(guān)系
1.3.3 cAMP與麻醉的關(guān)系
1.3.4 ERK1/2與麻醉的關(guān)系
1.3.5 PKC與麻醉的關(guān)系
1.3.6 PKA與麻醉的關(guān)系
1.3.7 CREB與麻醉的關(guān)系
1.3.8 c-fos、c-jun和fos-B與麻醉的關(guān)系
1.3.9 BDNF與麻醉的關(guān)系
1.4 試驗(yàn)?zāi)康募耙饬x
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 試驗(yàn)儀器設(shè)備
2.1.3 試驗(yàn)試劑和藥品
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 試驗(yàn)技術(shù)路線圖
2.2.2 噻拉嗪麻醉劑量的確定
2.2.3 試驗(yàn)動(dòng)物分組
2.2.4 腦組織采集
2.2.5 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)
2.2.6 細(xì)胞中噻拉嗪給藥劑量的測(cè)定
2.2.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2.2.8 ATP酶活性檢測(cè)
2.2.9 cAMP含量的測(cè)定
2.2.10 實(shí)時(shí)定量PCR
2.2.11 蛋白免疫印跡技術(shù)
2.2.12 數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計(jì)
3 結(jié)果
3.1 噻拉嗪麻醉大鼠最佳劑量的篩選
3.2 細(xì)胞中噻拉嗪給藥劑量的篩選
3.3 噻拉嗪麻醉對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)ATP酶活性的影響
3.3.1 對(duì)大鼠不同腦區(qū)Na~+-K~+-ATP酶活性的影響
3.3.2 對(duì)大鼠不同腦區(qū)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影響
3.4 噻拉嗪麻醉對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)cAMP含量的影響
3.5 噻拉嗪對(duì)大鼠同腦區(qū)基因表不達(dá)的影響
3.5.1 對(duì)大腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.5.2 對(duì)小腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.5.3 對(duì)海馬內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.5.4 對(duì)丘腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.5.5 對(duì)腦干內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.6 對(duì)PC12細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.7 噻拉嗪麻醉對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)蛋白表達(dá)的影響
3.7.1 對(duì)大腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.7.2 對(duì)小腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.7.3 對(duì)海馬內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.7.4 對(duì)丘腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.7.5 對(duì)腦干內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.8 對(duì)PC12細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
4 討論
4.1 噻拉嗪麻醉對(duì)ATP酶活性的影響
4.1.1 對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)Na~+-K~+-ATP酶活性的影響
4.1.2 對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影響
4.2 噻拉嗪麻醉對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)cAMP含量的影響
4.3 噻拉嗪麻醉對(duì)相關(guān)信號(hào)通路的影響
4.3.1 對(duì)GluR1和GluR2的影響
4.3.2 對(duì)ERK1/2的影響
4.3.3 對(duì)PKA的影響
4.3.4 對(duì)PKC的影響
4.3.5 對(duì)CREB的影響
4.3.6 對(duì)c-jun、c-fos和fos-B的影響
4.3.7 對(duì)BDNF的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]七氟醚對(duì)老齡大鼠海馬CaMKⅡ/CREB信號(hào)通路的影響[J]. 王瑩,王曉冬,王彩霞,邱頤. 中華麻醉學(xué)雜志. 2017 (02)
[2]p-ERK1/2在17β雌二醇抑制丙泊酚致新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 吳曉倩,李建立,容俊芳. 中華麻醉學(xué)雜志. 2017 (02)
[3]有氧運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)APP/PS1小鼠海馬CaMKⅡα、AMPAR活性,增加突觸可塑性[J]. 於來(lái)康,顧博雅,李巖,趙麗. 北京體育大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)
[4]氯胺酮與咪達(dá)唑侖對(duì)巴馬豬腦組織cAMP信號(hào)通路的影響[J]. 陳蕊,師銘咸,郭岑,曹馨方,張宇,周彤,李欣然,于東旭,魏成威,高利. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2016(10)
[5]Anesthesia-induced neurotoxicity in an animal model of the developing brain:mechanism and therapies[J]. Maiko Satomoto,Koshi Makita. Neural Regeneration Research. 2016(09)
[6]鹿復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠小腦和海馬突觸體Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影響[J]. 李虹瑾,付連軍,王秋竹,沙萬(wàn)里,李雨航,鄭洪娟,尹柏雙. 畜牧與獸醫(yī). 2016(06)
[7]鹿特異性復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的影響[J]. 馮雪,付連軍,林博,常乃元,李京乘,李聞軒,尹柏雙. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(04)
[8]間隔聯(lián)合應(yīng)用BAM8-22增強(qiáng)慢性嗎啡抑制c-Fos表達(dá)的作用[J]. 江劍平,付艷,胡粉娟. 福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(04)
[9]溫膽湯含藥血清對(duì)谷氨酸條件下原代星形膠質(zhì)細(xì)胞P38MAPK及PKC的影響[J]. 劉丹丹,魏妍妍,熊懷亮,戎文娟,朱金華,萬(wàn)紅嬌. 中藥藥理與臨床. 2015(01)
[10]噻拉嗪對(duì)山羊不同腦區(qū)ATP酶活性的影響[J]. 高利,張宇,魏成威,劉子睿,吳越,于東序,劉沫,姜仁禮,李欣然,王冠穎. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2014(11)
博士論文
[1]SIRT1-p53、cAMP/CREB信號(hào)通路參與老年大鼠吸入麻醉致學(xué)習(xí)與記憶損害的機(jī)制研究[D]. 熊萬(wàn)霞.復(fù)旦大學(xué) 2014
[2]采用遺傳藥理學(xué)方法激活中腦多巴胺神經(jīng)元導(dǎo)致DAT-Cre小鼠高活動(dòng)性的研究[D]. 王淑杰.吉林大學(xué) 2013
碩士論文
[1]小鼠腦缺血后血腦屏障通透性的改變對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞的影響[D]. 成曉峰.蘭州大學(xué) 2017
[2]丁香酚對(duì)鯉魚中樞神經(jīng)NO-cGMP等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)影響的研究[D]. 孫文淵.貴州大學(xué) 2015
[3]氯氮平與利培酮對(duì)精神分裂癥患者社會(huì)認(rèn)知的影響[D]. 趙彩榮.安徽醫(yī)科大學(xué) 2013
[4]右美托咪定在高血壓腦出血術(shù)后鎮(zhèn)靜的應(yīng)用[D]. 閻龍.吉林大學(xué) 2013
[5]山羊用隆朋合劑研制及其藥代動(dòng)力學(xué)的研究[D]. 韓光.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]山羊復(fù)合麻醉劑對(duì)山羊中樞NO信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[D]. 賈冰.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號(hào):3685537
【文章頁(yè)數(shù)】:79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 前言
1.1 噻拉嗪的概述
1.1.1 噻拉嗪的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用
1.1.2 噻拉嗪的麻醉作用
1.1.3 噻拉嗪復(fù)合麻醉劑的應(yīng)用
1.2 動(dòng)物全身麻醉
1.2.1 全身麻醉概念
1.2.2 全身麻醉的研究進(jìn)展
1.2.3 全身麻醉對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用
1.2.4 全麻藥與相關(guān)信號(hào)通路的關(guān)系
1.3 CREB信號(hào)通路與麻醉
1.3.1 GluR1、GluR2與麻醉的關(guān)系
1.3.2 ATP酶與麻醉的關(guān)系
1.3.3 cAMP與麻醉的關(guān)系
1.3.4 ERK1/2與麻醉的關(guān)系
1.3.5 PKC與麻醉的關(guān)系
1.3.6 PKA與麻醉的關(guān)系
1.3.7 CREB與麻醉的關(guān)系
1.3.8 c-fos、c-jun和fos-B與麻醉的關(guān)系
1.3.9 BDNF與麻醉的關(guān)系
1.4 試驗(yàn)?zāi)康募耙饬x
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 試驗(yàn)儀器設(shè)備
2.1.3 試驗(yàn)試劑和藥品
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 試驗(yàn)技術(shù)路線圖
2.2.2 噻拉嗪麻醉劑量的確定
2.2.3 試驗(yàn)動(dòng)物分組
2.2.4 腦組織采集
2.2.5 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)
2.2.6 細(xì)胞中噻拉嗪給藥劑量的測(cè)定
2.2.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2.2.8 ATP酶活性檢測(cè)
2.2.9 cAMP含量的測(cè)定
2.2.10 實(shí)時(shí)定量PCR
2.2.11 蛋白免疫印跡技術(shù)
2.2.12 數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計(jì)
3 結(jié)果
3.1 噻拉嗪麻醉大鼠最佳劑量的篩選
3.2 細(xì)胞中噻拉嗪給藥劑量的篩選
3.3 噻拉嗪麻醉對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)ATP酶活性的影響
3.3.1 對(duì)大鼠不同腦區(qū)Na~+-K~+-ATP酶活性的影響
3.3.2 對(duì)大鼠不同腦區(qū)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影響
3.4 噻拉嗪麻醉對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)cAMP含量的影響
3.5 噻拉嗪對(duì)大鼠同腦區(qū)基因表不達(dá)的影響
3.5.1 對(duì)大腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.5.2 對(duì)小腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.5.3 對(duì)海馬內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.5.4 對(duì)丘腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.5.5 對(duì)腦干內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.6 對(duì)PC12細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
3.7 噻拉嗪麻醉對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)蛋白表達(dá)的影響
3.7.1 對(duì)大腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.7.2 對(duì)小腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.7.3 對(duì)海馬內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.7.4 對(duì)丘腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.7.5 對(duì)腦干內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
3.8 對(duì)PC12細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
4 討論
4.1 噻拉嗪麻醉對(duì)ATP酶活性的影響
4.1.1 對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)Na~+-K~+-ATP酶活性的影響
4.1.2 對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影響
4.2 噻拉嗪麻醉對(duì)大鼠不同腦區(qū)內(nèi)cAMP含量的影響
4.3 噻拉嗪麻醉對(duì)相關(guān)信號(hào)通路的影響
4.3.1 對(duì)GluR1和GluR2的影響
4.3.2 對(duì)ERK1/2的影響
4.3.3 對(duì)PKA的影響
4.3.4 對(duì)PKC的影響
4.3.5 對(duì)CREB的影響
4.3.6 對(duì)c-jun、c-fos和fos-B的影響
4.3.7 對(duì)BDNF的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]七氟醚對(duì)老齡大鼠海馬CaMKⅡ/CREB信號(hào)通路的影響[J]. 王瑩,王曉冬,王彩霞,邱頤. 中華麻醉學(xué)雜志. 2017 (02)
[2]p-ERK1/2在17β雌二醇抑制丙泊酚致新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 吳曉倩,李建立,容俊芳. 中華麻醉學(xué)雜志. 2017 (02)
[3]有氧運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)APP/PS1小鼠海馬CaMKⅡα、AMPAR活性,增加突觸可塑性[J]. 於來(lái)康,顧博雅,李巖,趙麗. 北京體育大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)
[4]氯胺酮與咪達(dá)唑侖對(duì)巴馬豬腦組織cAMP信號(hào)通路的影響[J]. 陳蕊,師銘咸,郭岑,曹馨方,張宇,周彤,李欣然,于東旭,魏成威,高利. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2016(10)
[5]Anesthesia-induced neurotoxicity in an animal model of the developing brain:mechanism and therapies[J]. Maiko Satomoto,Koshi Makita. Neural Regeneration Research. 2016(09)
[6]鹿復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠小腦和海馬突觸體Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影響[J]. 李虹瑾,付連軍,王秋竹,沙萬(wàn)里,李雨航,鄭洪娟,尹柏雙. 畜牧與獸醫(yī). 2016(06)
[7]鹿特異性復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的影響[J]. 馮雪,付連軍,林博,常乃元,李京乘,李聞軒,尹柏雙. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(04)
[8]間隔聯(lián)合應(yīng)用BAM8-22增強(qiáng)慢性嗎啡抑制c-Fos表達(dá)的作用[J]. 江劍平,付艷,胡粉娟. 福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(04)
[9]溫膽湯含藥血清對(duì)谷氨酸條件下原代星形膠質(zhì)細(xì)胞P38MAPK及PKC的影響[J]. 劉丹丹,魏妍妍,熊懷亮,戎文娟,朱金華,萬(wàn)紅嬌. 中藥藥理與臨床. 2015(01)
[10]噻拉嗪對(duì)山羊不同腦區(qū)ATP酶活性的影響[J]. 高利,張宇,魏成威,劉子睿,吳越,于東序,劉沫,姜仁禮,李欣然,王冠穎. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2014(11)
博士論文
[1]SIRT1-p53、cAMP/CREB信號(hào)通路參與老年大鼠吸入麻醉致學(xué)習(xí)與記憶損害的機(jī)制研究[D]. 熊萬(wàn)霞.復(fù)旦大學(xué) 2014
[2]采用遺傳藥理學(xué)方法激活中腦多巴胺神經(jīng)元導(dǎo)致DAT-Cre小鼠高活動(dòng)性的研究[D]. 王淑杰.吉林大學(xué) 2013
碩士論文
[1]小鼠腦缺血后血腦屏障通透性的改變對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞的影響[D]. 成曉峰.蘭州大學(xué) 2017
[2]丁香酚對(duì)鯉魚中樞神經(jīng)NO-cGMP等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)影響的研究[D]. 孫文淵.貴州大學(xué) 2015
[3]氯氮平與利培酮對(duì)精神分裂癥患者社會(huì)認(rèn)知的影響[D]. 趙彩榮.安徽醫(yī)科大學(xué) 2013
[4]右美托咪定在高血壓腦出血術(shù)后鎮(zhèn)靜的應(yīng)用[D]. 閻龍.吉林大學(xué) 2013
[5]山羊用隆朋合劑研制及其藥代動(dòng)力學(xué)的研究[D]. 韓光.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]山羊復(fù)合麻醉劑對(duì)山羊中樞NO信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[D]. 賈冰.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號(hào):3685537
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