目的:脊髓是人體運動控制的初級中樞,存在復雜的膽堿能神經(jīng)系統(tǒng),能直接或間接地參與脊髓的運動控制。煙堿型乙酰膽堿受體（nicotinic acetylcholine receptor,nAChR）在脊髓腹角有廣泛分布,對于脊髓運動控制具有重要的調(diào)制功能。探討依托咪酯（etomidate,ET）對脊髓腹角神經(jīng)元電生理特性及nAChR的影響,這不僅有助于深化理解ET發(fā)揮麻醉作用的脊髓機制,也將為指導臨床用藥提供新的理論依據(jù)。方法:選用7?12 d新生Sprague Dawley（SD）大鼠,麻醉后,將其含有腰骶膨大的脊髓游離并切片,用木瓜蛋白酶（Papain,0.18 g/30 ml人工腦脊液）對脊髓切片進行恒溫消化20-25 min后孵育40-50 min,在體視顯微鏡下選出切片的腹角,用經(jīng)火拋光的不同口徑的巴斯德吸管對神經(jīng)細胞進行急性機械分離,對貼壁的狀態(tài)良好的神經(jīng)細胞結(jié)合藥理學方法實施穿孔膜片鉗記錄實驗。在電流鉗模式下,先記錄脊髓腹角神經(jīng)元自發(fā)動作電位（Action Potential,AP）,然后結(jié)合預處理給藥方式,分別記錄不同濃度的依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元自發(fā)AP的影響。在電壓鉗模... 

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

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摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
    1 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗設備、儀器與軟件
        1.3 實驗溶液與藥品
    2 實驗方法
        2.1 實驗技術(shù)路線
        2.2 脊髓切片制備
            2.2.1 實驗前準備
            2.2.2 游離脊髓
            2.2.3 脊髓切片
        2.3 急性機械分離脊髓腹角神經(jīng)元
            2.3.1 酶消化脊髓切片
            2.3.2 機械吹打脊髓腹角切片
        2.4 快速給藥系統(tǒng)結(jié)合重力給藥
        2.5 穿孔膜片鉗記錄
            2.5.1 實驗前準備
            2.5.2 實驗操作
            2.5.3 實驗模式
        2.6 數(shù)據(jù)采集與分析
結(jié)果
    1 脊髓腹角神經(jīng)元的形態(tài)學觀察
    2 依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元電生理特性的影響
    3 依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的作用
    4 依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有濃度依賴性
    5 依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有電壓依賴性
    6 依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有使用依賴性
討論
    1 脊髓切片及實驗結(jié)果評估
    2 依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元AP的影響及可能機制
    3 依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元放電頻率的抑制
    4 依托咪酯對脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制
        4.1 依托咪酯濃度依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
        4.2 依托咪酯電壓依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
        4.3 依托咪酯使用依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝



本文編號：3661898