生長(zhǎng)抑素減輕小鼠胰島移植過程中胰腺外分泌細(xì)胞對(duì)移植胰島損傷的研究
本文關(guān)鍵詞:生長(zhǎng)抑素減輕小鼠胰島移植過程中胰腺外分泌細(xì)胞對(duì)移植胰島損傷的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:第一部分小鼠胰島分離、純化及功能檢測(cè)目的:分離純化小鼠胰島。方法:采用膽總管逆行灌注膠原酶的方法來分離純化小鼠胰島,同時(shí)使用雙硫腙、臺(tái)盼藍(lán)以及葡萄糖刺激實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)胰島的功能。結(jié)果:每只小鼠可獲150左右個(gè)胰島,活性及純度都大于90%。葡萄糖刺激實(shí)驗(yàn)表明胰島功能正常。結(jié)論:采用課題組已經(jīng)成熟的實(shí)驗(yàn)方法,可以獲得高純度、功能良好的胰島。第二部分糖尿病小鼠左腎被膜下胰島細(xì)胞與胰腺外分泌細(xì)胞共同移植動(dòng)物模型的建立目的:建立糖尿病小鼠左腎被膜下同種異體胰島細(xì)胞與胰腺外分泌細(xì)胞共同移植動(dòng)物模型及探討胰腺外分泌細(xì)胞對(duì)胰島移植物的損傷作用。方法:鏈脲佐菌素腹腔注射誘導(dǎo)BALB/C小鼠成為糖尿病小鼠。單純移植組(n=1O)每只小鼠于左腎被膜上極移植胰島細(xì)胞250個(gè),共同移植組(n=1O)每只小鼠于左腎被膜上下極同時(shí)移植胰島細(xì)胞250個(gè)和等體積的胰腺外分泌細(xì)胞,持續(xù)觀測(cè)血糖及生命體征變化,1個(gè)月后切除左腎并繼續(xù)檢測(cè)血糖。結(jié)果:(1)胰島移植后,單純移植組及共同移植組血糖均逐步降至正常,共同移植組較單純移植組血糖恢復(fù)正常時(shí)間延遲,移植術(shù)后第2、3、4、5d,單純移植組受鼠血糖低于共同移植組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)切除兩組受鼠左腎3d后,兩組受鼠血糖均21mmol/L。結(jié)論:(1)成功建立糖尿病小鼠左腎被膜下同種異體胰島細(xì)胞與胰腺外分泌細(xì)胞共同移植動(dòng)物模型。(2)胰腺外分泌細(xì)胞與胰島細(xì)胞同時(shí)移植會(huì)延遲植入胰島功能恢復(fù)正常的時(shí)間。第三部分:生長(zhǎng)抑素減輕小鼠胰島移植過程中胰腺外分泌細(xì)胞對(duì)移植胰島損傷的研究目的:探討生長(zhǎng)抑素如何減輕胰腺外分泌細(xì)胞對(duì)移植胰島的損傷及其機(jī)制。方法:(1)體外實(shí)驗(yàn):選取20只雄性BALB/C小鼠,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(n=10)和對(duì)照組(n=10),麻醉前30分鐘實(shí)驗(yàn)組按10ug/g腹腔注射生長(zhǎng)抑素,對(duì)照組注射等量的生理鹽水,然后分別收集兩組小鼠的胰腺外分泌細(xì)胞及胰島細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)兩種細(xì)胞凋亡情況。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn):鏈脲佐菌素腹腔注射誘導(dǎo)BALB/C小鼠成為糖尿病小鼠。實(shí)驗(yàn)組(n=20)和對(duì)照組(n=20)分別于小鼠左腎被膜上下級(jí)同時(shí)移植250個(gè)胰島和等體積的胰腺外分泌細(xì)胞,術(shù)后實(shí)驗(yàn)組按10ug/g, tid,腹腔注射生長(zhǎng)抑素28天,對(duì)照組注射等量生理鹽水28天,同時(shí)兩組小鼠分別按5ug/g, qd,腹腔注射EDU28天,移植術(shù)后8天實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組小鼠分別進(jìn)行IPGTT實(shí)驗(yàn),移植術(shù)后10天及28天兩組各隨機(jī)選取10只小鼠分別切除左腎,免疫組織化學(xué)法檢測(cè)左腎包膜下抗淀粉酶抗體的表達(dá),免疫熒光染色法檢測(cè)移植胰島β細(xì)胞增殖情況,并繼續(xù)檢測(cè)血糖。結(jié)果:(1)流式檢測(cè)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠胰腺外分泌細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組(P0.05),胰島細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組沒有明顯差別(P0.05),(2)胰島移植后,兩組小鼠血糖均降至正常,對(duì)照組較實(shí)驗(yàn)組血糖恢復(fù)正常時(shí)間延遲(P0.05),對(duì)照組的血糖平均水平明顯高于實(shí)驗(yàn)組;IPGTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示移植物血糖調(diào)節(jié)功能正常;術(shù)后10天實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組移植物周圍均可見抗淀粉酶抗體陽(yáng)性顆粒,但實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性顆粒數(shù)較對(duì)照組減少(P0.05),免疫熒光檢測(cè)顯示實(shí)驗(yàn)組移植胰島Insulin+/EDU+β細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組明顯增多(P0.05)。術(shù)后28天,實(shí)驗(yàn)組抗淀粉酶抗體陽(yáng)性顆粒數(shù)較對(duì)照組明顯減少(P0.05),但各組數(shù)量與移植術(shù)后10天相比均無明顯差別(P0.05),實(shí)驗(yàn)組增值的β細(xì)胞數(shù)仍明顯高于對(duì)照組(P0.05),但與移植術(shù)后10天相比,各組增殖率均降低(P0.05)。結(jié)論:(1)生長(zhǎng)抑素可以誘導(dǎo)小鼠胰島移植過程中損傷的胰腺外分泌細(xì)胞凋亡,而對(duì)胰島細(xì)胞凋亡沒有影響。(2)移植術(shù)后早期(10天之內(nèi)),生長(zhǎng)抑素可以明顯抑制胰腺外分泌細(xì)胞胰淀粉酶的分泌,促進(jìn)胰島p細(xì)胞增殖,10天至28天,生長(zhǎng)抑素仍可抑制胰腺外分泌細(xì)胞胰淀粉酶的分泌,但對(duì)胰島β細(xì)胞增殖沒有影響,(3)在胰島移植過程中使用生長(zhǎng)抑素可以減輕小鼠胰腺外分泌細(xì)胞對(duì)移植胰島的損傷。
【關(guān)鍵詞】:小鼠 分離 純化 胰島 胰島細(xì)胞 胰腺外分泌細(xì)胞 糖尿病 共同移植 生長(zhǎng)抑素 胰腺外分泌細(xì)胞 胰島移植 凋亡
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R657.5
【目錄】:
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-7
- 中文摘要7-11
- 英文摘要11-15
- 前言15-17
- 第一部分:小鼠胰島分離、純化及功能檢測(cè)17-27
- 材料與方法17-23
- 結(jié)果23-25
- 討論25-26
- 結(jié)論26-27
- 第二部分:糖尿病小鼠左腎被膜下胰島細(xì)胞與胰腺外分泌細(xì)胞共同移植動(dòng)物模型的建立27-40
- 材料與方法27-32
- 結(jié)果32-35
- 討論35-39
- 結(jié)論39-40
- 第三部分:生長(zhǎng)抑素減輕小鼠胰島移植過程中胰腺外分泌細(xì)胞對(duì)移植胰島損傷的研究40-52
- 材料與方法40-45
- 結(jié)果45-49
- 討論49-51
- 結(jié)論51-52
- 參考文獻(xiàn)52-54
- 英文縮略詞一覽表54-55
- 綜述55-64
- 參考文獻(xiàn)60-64
- 致謝64-65
- 在校期間發(fā)表的有關(guān)論文65-66
- 附件66-69
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條
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本文編號(hào):328955
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