【摘要】：中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是研究麻醉機(jī)理的重要途徑。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,在體實(shí)驗(yàn)中麻醉藥物作用于動(dòng)物機(jī)體,會(huì)不同程度地影響神經(jīng)遞質(zhì)的含量和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的相關(guān)指標(biāo)進(jìn)而發(fā)揮麻醉作用,但對(duì)離體神經(jīng)元細(xì)胞的麻醉藥物試驗(yàn)至今尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠大腦神經(jīng)元細(xì)胞給藥,研究噻拉嗪對(duì)離體神經(jīng)元細(xì)胞的藥物刺激作用。通過(guò)檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)的分泌和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)指標(biāo),來(lái)探究噻拉嗪麻醉劑對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的麻醉機(jī)制,為噻拉嗪的臨床麻醉應(yīng)用提供相應(yīng)的理論依據(jù)。此外,本試驗(yàn)建立了適宜的神經(jīng)元細(xì)胞體外原代培養(yǎng)方案,神經(jīng)元細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,且密度高,能夠達(dá)到離體細(xì)胞藥物刺激實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn),具有較為理想的試驗(yàn)平行性；使用LC-MS/MS檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)方法可靠、準(zhǔn)確性好、靈敏度高、重現(xiàn)性好,可以將該方法應(yīng)用于噻拉嗪麻醉劑的作用機(jī)制研究。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：在對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)探究的實(shí)驗(yàn)中,噻拉嗪能引起離體神經(jīng)元細(xì)胞分泌的抑制性氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)Gly含量顯著提高,GABA含量先降低再顯著升高,二者整體均呈升高趨勢(shì)；能夠引起神經(jīng)元細(xì)胞分泌的興奮性氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)Asp和Glu的含量顯著降低,后期逐漸恢復(fù)至空白組水平；對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞分泌的5-羥色胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)5-HT和5-HIAA含量有明顯的升高作用；對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞分泌的兒茶酚胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)DA和NE的含量具有顯著的抑制作用。在對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中發(fā)現(xiàn),噻拉嗪對(duì)Na+-K+-ATP酶與Ca2+-Mg2+-ATP酶活性具有明顯的抑制作用；對(duì)cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中cAMP含量的影響呈先上升再下降的趨勢(shì)；在對(duì)NO-cGMP信號(hào)通路的影響研究中,發(fā)現(xiàn)在不同濃度的噻拉嗪作用下,NO的含量減少、NOS的活性降低、cGMP含量呈下降的趨勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論：噻拉嗪對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制可能是通過(guò)促進(jìn)神經(jīng)元分泌抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA、Gly和5-HT來(lái)實(shí)現(xiàn)的,其鎮(zhèn)靜作用可能是與抑制神經(jīng)元分泌NE和Glu有關(guān)；Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶可能是噻拉嗪產(chǎn)生麻醉作用的靶位之一,cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與了噻拉嗪的麻醉作用機(jī)制之中,噻拉嗪對(duì)NO-cGMP信號(hào)通路的抑制,可能主要是通過(guò)抑制NOS的活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：S859.791

【參考文獻(xiàn)】

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1 馮爽;蛋白酪氨酸激酶Src家族對(duì)耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元電壓門(mén)控性鈉通道的調(diào)節(jié)[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：2652837