【摘要】：目的:觀察電針夾脊穴和督脈穴對急性脊髓損傷家兔后肢神經功能的影響,并探討其作用機制。方法:采用隨機數(shù)字表將60只新西蘭家兔隨機分為假手術組、模型組、電針組,每組20只。假手術組咬除T_(13)~L_1棘突及全部椎板,暴露0.5 cm寬硬膜,不損傷脊髓;模型組和電針組采用改良Allens法建立急性脊髓損傷家兔模型,并行脊髓MRI掃描鑒定模型。模型組和假手術組不給予治療,電針組給予電針刺激受損脊髓節(jié)段上下兩對夾脊穴及上下督脈穴(筋縮、命門)治療,每次30 min,每日1次,共7次。電針干預開始后1 d、3 d、7 d采用改良Tarlov評分法評價家兔后肢神經功能。干預結束后每組取10只家兔,以4%多聚甲醛行心臟灌注后剖取損傷脊髓約1 cm,制成切片后經HE染色于顯微鏡下觀察脊髓組織形態(tài),并采用免疫組織化學法觀察脊髓細胞增殖情況和巢蛋白(Nestin)表達水平。將每組剩余的10只家兔麻醉,分離坐骨神經并注入5μL的30%辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP),24 h后取脊髓橫斷面背側靠近損傷處脊髓,采用HRP逆行示蹤法標記紅核神經元細胞數(shù)。結果:①模型鑒定結果。MRI片上假手術組脊髓橫斷面信號正常,可見清晰的腦脊液通過。模型組和電針組脊髓橫斷面信號增強,腦脊液受壓;受傷節(jié)段的脊髓在矢狀位MRI片T2WI上呈明顯的高信號,T1WI上呈低信號;提示脊髓斷端周圍充血、水腫,證明造模成功。②后肢神經功能評分。電針干預后不同時間點Tarlov評分比較,差異有統(tǒng)計學意義,即存在時間效應(F=6.920,P=0.001);除假手術組外,干預后模型組和電針組Tarlov評分均逐漸升高。3組Tarlov評分總體上比較,組間差異有統(tǒng)計學意義,即存在分組效應(F=426.78,P=0.000)。干預開始后1 d,電針組Tarlov評分高于模型組[(0.30±0.47)分,(0.20±0.41)分,q=7.010,P=0.486],低于假手術組[(0.30±0.47)分,(4.70±0.47)分,q=30.843,P=0.000)];模型組低于假手術組(q=31.544,P=0.000)。干預開始后3 d,電針組Tarlov評分高于模型組[(1.55±0.60)分,(1.05±0.53)分,q=2.877,P=0.006],低于假手術組[(1.55±0.60)分,(4.80±0.41)分,q=20.775,P=0.000];模型組低于假手術組(q=23.651,P=0.000)。干預開始后7 d,電針組Tarlov評分高于模型組[(2.65±0.59)分,(1.40±0.50)分,q=8.004,P=0.000],低于假手術組[(2.65±0.59)分,(4.85±0.41)分,q=14.081,P=0.000];模型組低于假手術組(q=22.093,P=0.000)。時間因素和分組因素之間存在交互效應(F=70.786,P=0.000)。③脊髓組織形態(tài)。假手術組脊髓形態(tài)結構完整,神經元結構正常、分布均勻,細胞膜、細胞核及組織間隙均正常,尼氏體顯示清晰;模型組脊髓組織正常結構喪失,可見組織充血、水腫,神經元細胞數(shù)量減少,部分尼氏體消失,灰質中部分區(qū)域甚至有較大的空腔;電針組與模型組相比,脊髓形態(tài)結構基本完整,神經元細胞結構基本正常,空泡變性減少,組織充血、水腫消失。④脊髓細胞增殖情況。電針干預開始后7 d,200倍顯微鏡下觀察,每個視野下3組家兔脊髓增殖細胞數(shù)比較,組間差異有統(tǒng)計學意義[(43.67±8.19)個,(18.77±3.55)個,(6.30±2.32)個,F=382.413,P=0.000];電針組脊髓增殖細胞多于模型組(q=20.889,P=0.000)和假手術組(q=31.348,P=0.000),模型組多于假手術組(q=10.459,P=0.000)。⑤脊髓細胞Nestin表達水平。干預開始后7 d,200倍顯微鏡下觀察,每個視野下3組家兔脊髓細胞Nestin陽性表達細胞數(shù)比較,組間差異有統(tǒng)計學意義[(23.37±5.10)個,(10.77±3.26)個,(4.43±1.33)個,F=218.084,P=0.000];電針組Nestin陽性表達細胞數(shù)多于模型組(q=15.770,P=0.000)和假手術組(q=23.696,P=0.000),模型組多于假手術組(q=7.926,P=0.000)。⑥紅核神經元細胞數(shù)。干預開始后7 d,200倍顯微鏡下觀察,每個視野下3組紅核神經元細胞數(shù)比較,組間差異有統(tǒng)計學意義(513.40±46.79,417.90±43.03,578.40±43.91,F=32.760,P=0.000);電針組紅核神經元細胞數(shù)多于模型組(q=6.771,P=0.000)、少于假手術組(q=4.608,P=0.000),模型組少于假手術組(q=11.379,P=0.000)。結論:電針刺激夾脊穴和督脈穴能明顯改善急性脊髓損傷家兔的后肢神經功能,其作用機制可能是通過促進神經干細胞增殖分化和抑制紅核神經元細胞凋亡,從而使損傷節(jié)段神經組織修復及神經通路再通。
[Abstract]:......
【作者單位】： 浙江省杭州市蕭山區(qū)中醫(yī)院;浙江中醫(yī)藥大學;浙江省腫瘤醫(yī)院;
【基金】：浙江省杭州市科技發(fā)展計劃項目(20140733Q51) 浙江省杭州市蕭山區(qū)科技計劃項目(2013313)
【分類號】：R245

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本文編號：2435933