煙草種子油的毒理學(xué)評(píng)價(jià)及降脂功能研究
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【摘要】:目的對(duì)煙草種子油的急性毒性、遺傳毒性及30 d喂養(yǎng)試驗(yàn)毒性進(jìn)行評(píng)價(jià),并探討煙草種子油對(duì)高脂模型大鼠的降脂作用。方法1、運(yùn)用霍恩氏法,對(duì)小鼠進(jìn)行急性經(jīng)口毒性試驗(yàn),計(jì)算煙草種子油對(duì)小鼠的半數(shù)致死劑量(LD50)。2、采用Ames試驗(yàn),觀察不同煙草種子油劑量組對(duì)鼠傷寒沙門氏菌回變菌落數(shù)的影響。3、進(jìn)行骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn),比較不同煙草種子油劑量組對(duì)小鼠微核率的影響。4、采用骨髓嗜多染紅細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)觀察并比較不同劑量煙草種子油小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變率的影響。5、健康SD大鼠80只,雌雄各半,按體重隨機(jī)分為4組,即空白對(duì)照組,煙草種子油低、中、高劑量組(5、10、20g/(kg?bw?d)),每組雌雄各10只,將煙草種子油摻入飼料中,按體重的10%折算,將受試物劑量按每100g體重?cái)z入的量折算為飼料量,每天觀察進(jìn)食及活動(dòng)情況,每周稱體重并記錄食物攝入量。30天后,禁食12h,大鼠稱重后給予戊巴比妥鈉60mg/kg麻醉,腹主動(dòng)脈取血,測(cè)定血常規(guī)及血液生化指標(biāo);留取完整肝臟、腎、脾、睪丸、卵巢稱重,計(jì)算臟體比,HE染色觀察以上組織的病理學(xué)改變,觀察有無(wú)病變。6、60只SPF級(jí)SD大鼠按體重隨機(jī)分為5組,A組為基礎(chǔ)對(duì)照組,2ml/(kg?bw?d)蒸餾水灌胃;B組為高脂對(duì)照組,2ml/(kg?bw?d)蒸餾水灌胃;。C、D、E為煙草種子油低、中、高劑量組,灌胃給予煙草種子油2、4、6ml/(kg?bw?d),除A組給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)外,其余各組均飼喂高脂飼料,共持續(xù)6周。于末次灌胃并禁食12 h后,按體重給予戊巴比妥鈉60mg/kg麻醉,測(cè)量體長(zhǎng)并稱重,計(jì)算Lee’s指數(shù),腹主動(dòng)脈取血,檢測(cè)大鼠血清生化指標(biāo)的濃度并計(jì)算動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)(AI),分離肝組織及腎周、生殖器周圍、腸系膜周圍脂肪,計(jì)算體脂比,留取肝臟組織,HE染色觀察肝臟組織的病理學(xué)改變。結(jié)果1、小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn):14d內(nèi)未見(jiàn)有中毒和死亡現(xiàn)象,LD5021,500mg/kg。2、受試樣品各劑量組回變菌落數(shù)均未超過(guò)自發(fā)回變菌落數(shù)2倍,亦無(wú)劑量-效應(yīng)關(guān)系,對(duì)鼠傷寒沙門氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株試驗(yàn)菌株,在加與不加S-9時(shí),均未呈現(xiàn)遺傳毒性。3、環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組微核率明顯高于陰性對(duì)照組(P0.05),煙草種子油各劑量組的微核率均低于環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組(P0.05)。4、雌、雄小鼠煙草種子油各劑量組的染色體畸變率相比陽(yáng)性對(duì)照組顯著降低(P0.05),陽(yáng)性對(duì)照組染色體畸變率相比陰性對(duì)照組顯著升高(P0.05)。5、30 d喂養(yǎng)結(jié)束后,未見(jiàn)試驗(yàn)動(dòng)物有中毒及死亡狀況,體重、食物利用率、臟體比與對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);各組血常規(guī)及血液生化指標(biāo)ALT、AST、BUN、Cr、GLU、ALB、TP、TC、TG均在正常范圍內(nèi),與各自對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);HE染色病理觀察顯示,除高劑量組部分肝組織可見(jiàn)少量脂肪空泡,其余各組大鼠主要臟器未見(jiàn)病理學(xué)改變。6、煙草種子油各劑量組脂體比均較高脂模型組有所下降;各組之間Lee’s指數(shù)均無(wú)顯著性差異;高脂模型組AI值最高,其余各組AI均顯著降低,且隨著煙草種子油劑量的升高AI值降低程度越大;與高脂模型組相比,煙草種子油低、中、高劑量組TC、LDL-C含量較高脂模型組明顯下降(P0.05),TG含量較高脂模型組有所下降,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),煙草種子油高劑量組HDL-C較空白對(duì)照組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其余各組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,HE染色觀察結(jié)果顯示煙草種子油干預(yù)后,脂變細(xì)胞數(shù)量、脂肪空泡、炎性浸潤(rùn)及核溶解較高脂對(duì)照組明顯減輕。結(jié)論1、根據(jù)對(duì)煙草種子油的急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)遺傳毒性實(shí)驗(yàn)及30 d喂養(yǎng)試驗(yàn)的結(jié)果,證實(shí)煙草種子油在本實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)無(wú)明顯毒作用。2、通過(guò)對(duì)高脂模型大鼠血生化指標(biāo)的檢測(cè)及病理學(xué)觀察,證實(shí)煙草種子油具有一定的降脂活性。3、通過(guò)對(duì)煙草種子油的毒理學(xué)評(píng)價(jià)及降脂實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明煙草種子油有望成為一種保健功能油類產(chǎn)品,但對(duì)人體的功效還有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)及研究。
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R994.4
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,本文編號(hào):1273773
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