SGI-1776鈍化Pim-1對涎腺腺樣囊性癌細胞的抑制作用
發(fā)布時間:2017-07-31 15:32
本文關(guān)鍵詞:SGI-1776鈍化Pim-1對涎腺腺樣囊性癌細胞的抑制作用
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【摘要】:目的檢測SGI-1776對涎腺腺樣囊性癌細胞SACC-83、SACC-LM的增殖、遷移、侵襲、凋亡的影響。方法體外培養(yǎng)涎腺腺樣囊性癌細胞SACC-83、SACC-LM;CCK-8法、克隆形成法及BrDU染色法檢測SGI-1776對SACC-LM細胞的增殖抑制作用;鬼筆環(huán)肽染色法測SGI-1776對細胞骨架的影響;PI/Annexin-V雙染法、Caspase-3酶活化試驗及JC-1染色法檢測SGI-1776對SACC細胞凋亡的影響;劃痕試驗及Transwell法檢測SGI-1776對SACC細胞遷移、侵襲的抑制作用;Western blot試驗檢測SGI-1776對SACC細胞增殖、遷移、侵襲抑制作用的可能分子機制。結(jié)果SGI-1776在體外對SACC細胞增殖、遷移、侵襲呈現(xiàn)出濃度、時間依賴性的抑制作用;鬼筆環(huán)肽染色法提示SGI-1776作用于SACC細胞后,細胞骨架未發(fā)生明顯變化;PI/Annexin-V雙染色法及JC-1染色法顯示SGI-1776作用于SACC細胞后,凋亡率明顯升高;Caspase-3酶活化試驗提示Caspase-3參與執(zhí)行細胞凋亡;Western blot試驗提示Bcl-2可能參與Pim-1鈍化后誘導(dǎo)的細胞凋亡。結(jié)論SGI-1776通過抑制Pim-1而發(fā)揮其抑制涎腺腺樣囊性癌SACC-83、SAC-LM細胞增殖、遷移和侵襲,并促進細胞凋亡的作用,提示Pim-1可能是腺樣囊性癌新的治療靶點。
【關(guān)鍵詞】:腺樣囊性癌 涎腺 Pim-1 SGI-1776
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R739.87
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-7
- 引言7-9
- 一 實驗材料9-13
- 1. 實驗菌株9
- 2. 實驗試劑9-11
- 3. 實驗儀器11-13
- 二 實驗方法13-22
- 1. 藥物配制13
- 2. 細胞培養(yǎng)13
- 3. CCK-8 試驗13-14
- 4. 蛋白提取及定量14
- 5. 蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(Western Blot)14-16
- 6. 細胞骨架制備與觀察16-17
- 7.BrdU摻入法測細胞周期17
- 8.克隆形成試驗17-18
- 9.PI/Annexin-V雙染色法測細胞凋亡率18-19
- 10.Caspase-3 酶活化檢測19
- 11.Jc-1 法測線粒體膜電位19-20
- 12.劃痕試驗20
- 13. Transwell侵襲試驗20-22
- 三 實驗結(jié)果22-30
- 1.SGI-1776對腫瘤細胞增殖的影響22-23
- 2.蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(Western Blot)(Pim-1)23
- 3.細胞骨架的制備與觀察23-24
- 4.BrdU摻入法測細胞周期24
- 5. 克隆形成試驗24-25
- 6. PI/Annexin-V雙染色法測細胞凋亡率25-26
- 7.Caspase-3 酶活化檢測26-27
- 8.JC-1 染色法測線粒體膜電位27-28
- 9.劃痕試驗及Transwell侵襲試驗28-29
- 10. 蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(Western Blot)(凋亡相關(guān)蛋白)29-30
- 四 討論30-32
- 五 結(jié)論32-33
- 參考文獻33-35
- 綜述35-42
- 參考文獻40-42
- 附錄42-44
- 致謝44-45
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本文編號:599863
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