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D-甲硫氨酸通過(guò)降低c-di-GMP分散牙齦卟啉單胞菌生物膜的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-05-23 06:22
  目的:本研究旨在探討D-甲硫氨酸可能通過(guò)影響c-di-GMP的形成而分散牙齦卟啉單胞菌生物膜的作用機(jī)制,為牙周炎和種植體周?chē)椎闹委熖峁┬碌牟呗。方?D-甲硫氨酸以不同濃度(0、5、10、15、20、25、30、35、40、45m M)溶解于細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)菌培養(yǎng)基,通過(guò)CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)獲得對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞無(wú)細(xì)胞毒性的D-甲硫氨酸濃度范圍。通過(guò)生長(zhǎng)曲線、最小抑菌濃度實(shí)驗(yàn)(Minimum inhibitory concentration,MIC)、最小殺菌濃度實(shí)驗(yàn)(Minimum bactericidal concentration,MBC)評(píng)估D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌細(xì)菌活性的影響;通過(guò)結(jié)晶紫染色實(shí)驗(yàn)、胞外多糖實(shí)驗(yàn)和掃描電鏡(Scanning Electron Microscope,SEM)評(píng)估D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜形成的抑制作用和成熟生物膜的裂解作用。通過(guò)高效液相色譜儀檢測(cè)D-甲硫氨酸作用后,牙齦卟啉單胞菌生物膜內(nèi)c-di-GMP的含量,探討D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜的作用機(jī)制。結(jié)果:1.D-甲硫氨酸≤40m M時(shí),對(duì)L929細(xì)胞增殖無(wú)影響。2.D-甲硫...

【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
前言
中文摘要
ABSTRACT
文中常用縮寫(xiě)中英文對(duì)照
第1章 引言
    1.1 牙周炎與種植體周?chē)椎闹虏∫蛩?br>    1.2 牙齦卟啉單胞菌的致病性
    1.3 D-氨基酸對(duì)細(xì)菌和細(xì)菌生物膜的影響
    1.4 本課題的研究目的
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞和菌種來(lái)源
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 D-甲硫氨酸細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)菌培養(yǎng)基的配制
        2.2.2 D-甲硫氨酸對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞增殖的影響
        2.2.3 D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌細(xì)菌活性的影響
        2.2.4 結(jié)晶紫染色評(píng)估不同濃度D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜生物量的影響
        2.2.5 胞外多糖實(shí)驗(yàn)評(píng)估不同濃度D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜胞外多糖的影響
        2.2.6 掃描電子顯微鏡觀察牙齦卟啉單胞菌形態(tài)及生物膜結(jié)構(gòu)
        2.2.7 D-甲硫氨酸對(duì)成熟的牙齦卟啉單胞菌生物膜的作用
        2.2.8 D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜內(nèi)c-di-GMP的影響
        2.2.9 數(shù)據(jù)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 D-甲硫氨酸對(duì)L929細(xì)胞增殖的影響
    3.2 不同濃度D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜形成的抑制作用
        3.2.1 不同濃度D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌細(xì)菌活性的影響
        3.2.2 結(jié)晶紫染色法評(píng)估D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜生物量的影響
        3.2.3 胞外多糖實(shí)驗(yàn)評(píng)估不同濃度D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜胞外多糖的影響
        3.2.4 掃描電子顯微鏡觀察D-甲硫氨酸作用下牙齦卟啉單胞菌形態(tài)及生物膜的結(jié)構(gòu)
    3.3 D-甲硫氨酸對(duì)成熟牙齦卟啉單胞菌生物膜的裂解作用
        3.3.1 結(jié)晶紫染色法評(píng)估D-甲硫氨酸對(duì)成熟牙齦卟啉單胞菌生物膜生物量的影響
        3.3.2 胞外多糖實(shí)驗(yàn)評(píng)估 D-甲硫氨酸對(duì)成熟牙齦卟啉單胞菌生物膜
        3.3.3 掃描電子顯微鏡觀察D-甲硫氨酸作用下牙齦卟啉單胞菌生物膜的結(jié)構(gòu)及形態(tài)變化
    3.4 D-甲硫氨酸對(duì)牙齦卟啉單胞菌生物膜內(nèi)c-di-GMP的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號(hào):3981117

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