發(fā)布時間：2024-03-21 00:56

　　[目的]：探討牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis, P. g)上清液對體外培養(yǎng)的兔血管平滑肌細胞(Vascular Smooth Muscle Cells, VSMCs)增殖和遷移的影響以及對VSMCs合成分泌IL-1β、IL-6的影響,為研究牙周病與動脈粥樣硬化的關(guān)系提供實驗依據(jù)。 [方法]：采用組織貼塊法進行VSMCs的原代培養(yǎng),用α-Actin肌動蛋白免疫組化染色及透射電鏡進行細胞鑒定,在培養(yǎng)細胞內(nèi)加入原倍以及稀釋1/2,1/4,1/8,1/16,1/32濃度的P.g上清液,MTT法檢測不同濃度的P.g上清液對VSMCs增殖的影響。根據(jù)MTT結(jié)果選擇濃度為4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VMSCs,在分別培養(yǎng)12h,24h,48h后,使用ELISA檢測培養(yǎng)液上清中的IL-1β、IL-6水平。用4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VSMCs,在培養(yǎng)12h,24h,48h后,進行RT-PCR,觀察IL-1β、IL-6的表達情況。用4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VSMCs,用爬片法檢測7d內(nèi)P.g上清對VSMCs遷移的影響。對結(jié)...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.P.g在BHI液中增菌24h后培養(yǎng)液變渾濁

圖3.P.g在BHI液中增菌24h后培養(yǎng)液變渾濁。.原代培養(yǎng)的兔VSMCS的形態(tài)觀察及細胞鑒定胞形態(tài)觀察:原代取材sd一7d后在倒置顯微鏡下觀察，可見組織塊周圍有細胞游形態(tài)為長梭形或多角形，細胞核位于細胞中央，可見2一3個核仁(見圖續(xù)培養(yǎng)可見細胞復(fù)層分布，并向組織塊周圍擴散(見圖....

圖10.細胞爬片HE染色，細胞呈長梭形或多角

圖10.細胞爬片HE染色，細胞呈長梭形或多角圖11.細胞爬片HE染色，細胞胞漿內(nèi)見大量絲狀物質(zhì)形，胞核圓，單核或雙核(X100)(X200)免疫組化染色細胞來源鑒定結(jié)果見圖12、圖13:第3代細胞，抗肌動蛋白a一Actin染色，大部份細胞胞核為藍色，長梭形胞漿染為棕色，為陽性反應(yīng)....

圖11.細胞爬片HE染色，細胞胞漿內(nèi)見大量絲狀物質(zhì)形，胞核圓，單核或雙核(X100)(X200)

圖10.細胞爬片HE染色，細胞呈長梭形或多角圖11.細胞爬片HE染色，細胞胞漿內(nèi)見大量絲狀物質(zhì)形，胞核圓，單核或雙核(X100)(X200)免疫組化染色細胞來源鑒定結(jié)果見圖12、圖13:第3代細胞，抗肌動蛋白a一Actin染色，大部份細胞胞核為藍色，長梭形胞漿染為棕色，為陽性反應(yīng)....

圖12，抗肌動蛋白a一Actin染色陽性，胞漿為棕色

細胞胞漿內(nèi)見大量絲狀物質(zhì)形，胞核圓，單核或雙核(X100)(X200)免疫組化染色細胞來源鑒定結(jié)果見圖12、圖13:第3代細胞，抗肌動蛋白a一Actin染色，大部份細胞胞核為藍色，長梭形胞漿染為棕色，為陽性反應(yīng)。提示所培養(yǎng)的細胞為平滑肌細胞，結(jié)合原代取材部位，可以證實所培養(yǎng)的細....

本文編號：3933574