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周期蛋白A2對功能性下頜前伸中髁突軟骨細(xì)胞周期的調(diào)控作用

發(fā)布時間:2017-05-19 11:14

  本文關(guān)鍵詞:周期蛋白A2對功能性下頜前伸中髁突軟骨細(xì)胞周期的調(diào)控作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:髁突是整個下頜骨的生長發(fā)育中心,其表面覆蓋的薄層纖維軟骨為其終生處于生長改建的基礎(chǔ)。當(dāng)髁突軟骨受到功能性下頜前伸矯治力的刺激時,其可將刺激轉(zhuǎn)化成生物學(xué)信號,從而引發(fā)一系列的信號傳導(dǎo)通路,最后匯集到對細(xì)胞有絲分裂的調(diào)節(jié),表現(xiàn)出髁突軟骨細(xì)胞的增殖。圍繞功能矯治對髁突軟骨改建中可能的信號通路學(xué)者們進(jìn)行了多方面的研究,但對信號通路進(jìn)入細(xì)胞核調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂的細(xì)胞學(xué)機(jī)制還不是十分明確。近年來研究發(fā)現(xiàn)周期蛋白A2(Cyclin A2)為細(xì)胞有絲分裂的最有力刺激因子,集中定位于細(xì)胞核中,與細(xì)胞周期依賴性激酶CDK1結(jié)合后可激活底物蛋白,將組蛋白H1磷酸化導(dǎo)致染色體凝集,核纖層蛋白磷酸化使核膜解體等。Cyclin A2在細(xì)胞周期的G1期后期出現(xiàn),S期高表達(dá),M期早中期后開始被降解,既可控制DNA復(fù)制啟動又可促進(jìn)細(xì)胞分裂。本實驗采用組織學(xué)染色和免疫組織化學(xué)染色的方法檢測大鼠下頜前伸過程中不同時間點內(nèi)髁突軟骨的組織形態(tài)學(xué)變化及髁突軟骨細(xì)胞中Cyclin A2的表達(dá)及其變化規(guī)律,研究軟骨細(xì)胞中Cyclin A2在功能矯治下頜前伸過程的作用及意義,從而為臨床上下頜后縮的骨骼矯形治療提供一定的實驗依據(jù)。方法:4周齡健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠70只,體重約90克,適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后隨機(jī)等量分為實驗組和對照組,組內(nèi)按照實驗周期(1、3、7、14、21、28、35天)分為7組,每組5只,共14組。實驗組將自制的下頜前伸斜面導(dǎo)板矯治器用3M玻璃離子粘接劑粘固于大鼠的上前牙,并通過橡皮圈經(jīng)大鼠鼻上頜復(fù)合體與自制矯治器的兩側(cè)口外弓固位臂連接,使得自制矯治器在大鼠口腔中獲得穩(wěn)定的固位?紤]到大鼠前后爪對矯治器的破壞和對面部組織的損傷,將大鼠四肢用醫(yī)用橡皮膏緊緊包裹,矯治器每天24小時戴用;對照組不做相應(yīng)的實驗處理。所有動物均自由飲水,軟食飼養(yǎng),同環(huán)境下飼養(yǎng)至實驗結(jié)束。實驗后按1、3、7、14、21、28、35天分別取材,常規(guī)固定、脫鈣、脫水、石蠟包埋;石蠟切片后進(jìn)行常規(guī)HE染色觀察髁突組織學(xué)變化;免疫組化方法(兩步法)檢測Cyclin A2蛋白的表達(dá);采用多功能真彩色細(xì)胞圖象分析管理系統(tǒng)進(jìn)行免疫組化染色評分,以IHS值表示染色強(qiáng)度。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行處理,統(tǒng)計資料用x__±s表示,統(tǒng)計分析時實驗組與對照組間采用兩樣本t檢驗,組內(nèi)比較采用單因素方差分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果:1大體觀察大鼠戴用斜面導(dǎo)板矯治器后下頜處于前伸狀態(tài),上下前牙大多數(shù)處于對刃狀態(tài),個別出現(xiàn)反he,摘除矯治器后下頜不能后退。而對照組未出現(xiàn)前牙對刃,前牙覆蓋約3毫米。2髁突軟骨形態(tài)學(xué)變化鏡下可見髁突軟骨分為纖維層,增殖層,過渡層(增殖層深層),軟骨層(肥大層)和軟骨鈣化層。隨著功能矯治力的作用,實驗組大鼠髁突中后部軟骨增殖層,過渡層的細(xì)胞層數(shù)增多,細(xì)胞數(shù)目增加,與同時間點對照組軟骨厚度相比增加;到21天時髁突軟骨各層厚度逐漸趨于穩(wěn)定;第35天時可見過渡層和增殖層的厚度減小,但仍厚于對照組,軟骨層深層細(xì)胞體積增大,胞質(zhì)增多,細(xì)胞核逐漸固縮與鈣化層延續(xù),軟骨內(nèi)成骨活躍。對照組隨著增齡性生長,髁突軟骨各層的厚度逐漸變薄,中后部最為明顯,前部變化不明顯。3 Cyclin A2的表達(dá)水平及分布空白對照組髁突軟骨各層未見棕黃色染色顆粒。對照組Cyclin A2低水平表達(dá)一直持續(xù)到實驗結(jié)束,且主要位于軟骨層;實驗組Cyclin A2主要表達(dá)于增殖層和過渡層,陽性定位于細(xì)胞核。第1天時實驗組Cyclin A2的IHS=12.00±3.61,對照組IHS=10.33±1.53,兩組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);第3天時實驗組中Cyclin A2表達(dá)明顯增強(qiáng),IHS=70.33±28.50,對照組IHS=7.67±3.06,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);第7天時,實驗組IHS為95.67±11.37,對照組為7.67±3.51,兩組相比統(tǒng)計學(xué)意義顯著(P0.01);第21實驗組與對照組Cyclin A2表達(dá)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);第28、35天時實驗組與對照組Cyclin A2表達(dá)差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1 Cyclin A2參與了生長發(fā)育期大鼠功能性下頜前伸過程中髁突軟骨細(xì)胞的有絲分裂,從而促進(jìn)髁突軟骨細(xì)胞的增殖。2 Cyclin A2的表達(dá)可能參與了功能矯治力-生物學(xué)信號的轉(zhuǎn)換。
【關(guān)鍵詞】:下頜功能前伸 骨改建 髁突軟骨 細(xì)胞周期 CyclinA2
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R782
【目錄】:
  • 中文摘要4-7
  • 英文摘要7-11
  • 英文縮寫11-12
  • 前言12
  • 材料與方法12-17
  • 結(jié)果17-20
  • 附圖20-30
  • 附表30-31
  • 討論31-34
  • 結(jié)論34-35
  • 參考文獻(xiàn)35-38
  • 綜述細(xì)胞周期蛋白A及其調(diào)控功能的研究進(jìn)展38-51
  • 參考文獻(xiàn)44-51
  • 致謝51-52
  • 個人簡歷52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孟曉紅;焦鳳娟;孟華;;Livin陽性乳腺癌中細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白的變化[J];臨床與實驗病理學(xué)雜志;2014年03期


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本文編號:378537

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