電離輻射和紫杉醇誘導(dǎo)的多核細(xì)胞形成中SPATA5L1、Cyclin B2表達(dá)的變化
發(fā)布時間:2021-07-11 23:06
背景及目的:電離輻射與紫杉醇協(xié)同作用,可以誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的人口腔上皮癌KB細(xì)胞產(chǎn)生G2/M期阻滯,形成多核細(xì)胞,并最終造成死亡。先前通過基因芯片篩選研究發(fā)現(xiàn)在經(jīng)過電離輻射和/或紫杉醇作用后,有10條與細(xì)胞分裂有關(guān)的基因存在差異表達(dá)。本研究旨在通過Real-time PCR和Western Blot定量分析其中兩條基因SPATA5L1、Cyclin B2的表達(dá)變化來揭示G2/M期阻滯及多核細(xì)胞形成的分子機(jī)制。方法:不同劑量60Coγ射線照射聯(lián)合不同濃度紫杉醇作用于KB細(xì)胞,用以下實驗觀察受照細(xì)胞的變化:(1)倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化,細(xì)胞克隆形成實驗檢測細(xì)胞增殖抑制效應(yīng);(2)利用Real-time PCR技術(shù)檢測SPATA5L1基因表達(dá)隨照射劑量和藥物濃度變化的情況;(3)Western Blot實驗檢測電離輻射聯(lián)合紫杉醇對KB細(xì)胞內(nèi)SPATA5L1、Cyclin B2蛋白含量的影響。結(jié)果:(1)電離輻射和紫杉醇協(xié)同作用能顯著抑制KB細(xì)胞的生長增殖,且這種協(xié)同效應(yīng)是照射劑量和藥物濃度依賴性的;(2)KB細(xì)胞經(jīng)電離輻射、紫杉醇或兩者聯(lián)合作用后,形成大量多核細(xì)胞,并最終死亡;(3)Re...
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
各組細(xì)胞形態(tài)改變(箭頭所指為多核細(xì)胞)
10圖1.2 不同濃度紫杉醇及不同劑量射線作用后KB細(xì)胞存活曲線四、討論細(xì)胞克隆形成實驗是評價單細(xì)胞存活和增殖的一個良好指標(biāo),也是放射生物學(xué)中常用和可靠的實驗方法[15],通常設(shè)定單個細(xì)胞繁殖到 50 個細(xì)胞以上形成的細(xì)胞團(tuán)稱為一個克隆,表示其具有無限增值能力,可以稱之為存活細(xì)胞。實驗發(fā)現(xiàn),KB 細(xì)胞受到不同劑量的 γ 射線照射聯(lián)合不同濃度紫杉醇作用后,細(xì)胞克隆形成顯著減少,細(xì)胞的生長受到了明顯的抑制,并且與照射劑量和藥物濃度相關(guān),兩者存在協(xié)同作用,表明紫杉醇具有明顯的放射增敏作用。細(xì)胞受到照射、藥物作用或兩者聯(lián)合作用后,形態(tài)上有較明顯的變化,出現(xiàn)多核細(xì)胞
圖 2.1 RT-PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果異表達(dá)基因的驗證ime PCR 熔解曲線分析顯示 GAPDH、SPATA5L1 均為單峰,表異性擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)果可信,見圖 2.2。Dissociation Curve24680246
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]電離輻射誘導(dǎo)人口腔上皮癌KB細(xì)胞基因表達(dá)譜變化的研究[J]. 翁婉雯,許玉杰,王宗站,丁文秀,劉敏. 中國輻射衛(wèi)生. 2009(03)
[2]紫杉醇放射增敏作用的分子機(jī)制[J]. 翁婉雯,許玉杰,萬建美,王宗站,丁文秀,劉敏,洪承皎. 癌癥. 2009(08)
[3]紫杉醇脂質(zhì)納米粒子對KB、SKOV3細(xì)胞的抑制作用[J]. 王宗站,許玉杰,汪梅花,劉敏,李智慧,翁婉雯,張劉珍. 腫瘤. 2008(11)
[4]PLLA納米纖維擔(dān)載紫杉醇對大鼠膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞株毒性研究[J]. 郭海濤,李毅平,李蘊潛,徐效義,王新. 吉林醫(yī)學(xué). 2007(01)
[5]紫杉醇的藥理與臨床研究進(jìn)展[J]. 駱澤宇. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2006(24)
[6]白介素-6與1,25(OH)2維生素D3聯(lián)合作用下大鼠骨髓破骨細(xì)胞的體外誘導(dǎo)培養(yǎng)[J]. 李永明,林珠,唐林,張曉東. 口腔醫(yī)學(xué). 2005(05)
[7]中心體異常在咖啡因增強順鉑殺傷人肝癌細(xì)胞系中的作用[J]. 齊建國,桑建利,林海燕,陳曉波,王永潮. 中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2004(05)
[8]紫杉醇對尤文肉瘤細(xì)胞系誘導(dǎo)凋亡及生長抑制的研究[J]. 康立新,郭衛(wèi),郭義. 中國骨腫瘤骨病. 2003(05)
[9]紫杉醇誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞系凋亡的體外研究[J]. 曾春,郭衛(wèi),馮傳漢. 中華骨科雜志. 2002(11)
[10]白細(xì)胞介素-1與根尖周炎骨吸收[J]. 于金華. 口腔醫(yī)學(xué). 2002(01)
本文編號:3278756
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
各組細(xì)胞形態(tài)改變(箭頭所指為多核細(xì)胞)
10圖1.2 不同濃度紫杉醇及不同劑量射線作用后KB細(xì)胞存活曲線四、討論細(xì)胞克隆形成實驗是評價單細(xì)胞存活和增殖的一個良好指標(biāo),也是放射生物學(xué)中常用和可靠的實驗方法[15],通常設(shè)定單個細(xì)胞繁殖到 50 個細(xì)胞以上形成的細(xì)胞團(tuán)稱為一個克隆,表示其具有無限增值能力,可以稱之為存活細(xì)胞。實驗發(fā)現(xiàn),KB 細(xì)胞受到不同劑量的 γ 射線照射聯(lián)合不同濃度紫杉醇作用后,細(xì)胞克隆形成顯著減少,細(xì)胞的生長受到了明顯的抑制,并且與照射劑量和藥物濃度相關(guān),兩者存在協(xié)同作用,表明紫杉醇具有明顯的放射增敏作用。細(xì)胞受到照射、藥物作用或兩者聯(lián)合作用后,形態(tài)上有較明顯的變化,出現(xiàn)多核細(xì)胞
圖 2.1 RT-PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果異表達(dá)基因的驗證ime PCR 熔解曲線分析顯示 GAPDH、SPATA5L1 均為單峰,表異性擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)果可信,見圖 2.2。Dissociation Curve24680246
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]電離輻射誘導(dǎo)人口腔上皮癌KB細(xì)胞基因表達(dá)譜變化的研究[J]. 翁婉雯,許玉杰,王宗站,丁文秀,劉敏. 中國輻射衛(wèi)生. 2009(03)
[2]紫杉醇放射增敏作用的分子機(jī)制[J]. 翁婉雯,許玉杰,萬建美,王宗站,丁文秀,劉敏,洪承皎. 癌癥. 2009(08)
[3]紫杉醇脂質(zhì)納米粒子對KB、SKOV3細(xì)胞的抑制作用[J]. 王宗站,許玉杰,汪梅花,劉敏,李智慧,翁婉雯,張劉珍. 腫瘤. 2008(11)
[4]PLLA納米纖維擔(dān)載紫杉醇對大鼠膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞株毒性研究[J]. 郭海濤,李毅平,李蘊潛,徐效義,王新. 吉林醫(yī)學(xué). 2007(01)
[5]紫杉醇的藥理與臨床研究進(jìn)展[J]. 駱澤宇. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2006(24)
[6]白介素-6與1,25(OH)2維生素D3聯(lián)合作用下大鼠骨髓破骨細(xì)胞的體外誘導(dǎo)培養(yǎng)[J]. 李永明,林珠,唐林,張曉東. 口腔醫(yī)學(xué). 2005(05)
[7]中心體異常在咖啡因增強順鉑殺傷人肝癌細(xì)胞系中的作用[J]. 齊建國,桑建利,林海燕,陳曉波,王永潮. 中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2004(05)
[8]紫杉醇對尤文肉瘤細(xì)胞系誘導(dǎo)凋亡及生長抑制的研究[J]. 康立新,郭衛(wèi),郭義. 中國骨腫瘤骨病. 2003(05)
[9]紫杉醇誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞系凋亡的體外研究[J]. 曾春,郭衛(wèi),馮傳漢. 中華骨科雜志. 2002(11)
[10]白細(xì)胞介素-1與根尖周炎骨吸收[J]. 于金華. 口腔醫(yī)學(xué). 2002(01)
本文編號:3278756
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