正常骨骼處于一個(gè)吸收與重建的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)中，其中力刺激是維持平衡的基礎(chǔ)。不斷有研究證實(shí)，牽張應(yīng)力是有效促進(jìn)成骨活性和功能的力學(xué)刺激。體內(nèi)外力刺激通過(guò)多種途徑被成骨細(xì)胞所感知，通過(guò)一系列的級(jí)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)反應(yīng)，成骨細(xì)胞將力學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為生物學(xué)信號(hào)，進(jìn)一步調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)水平，同時(shí)合成各種活性物質(zhì)及酶類，最終使得機(jī)體表現(xiàn)出各種復(fù)雜的生理及病理活動(dòng)。多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中，細(xì)胞骨架作為首先感受力學(xué)刺激的結(jié)構(gòu)，發(fā)揮著重要作用。成骨細(xì)胞對(duì)外源性機(jī)械力信號(hào)的反應(yīng)主要是由F-actin來(lái)響應(yīng)的，F(xiàn)-actin通過(guò)與跨膜分子相互作用而成為跨膜力信號(hào)傳遞的主要環(huán)節(jié)。而成骨細(xì)胞細(xì)胞骨架的改建依賴于一些對(duì)力學(xué)敏感的關(guān)鍵蛋白的調(diào)控作用。ADF/Cofilin家族蛋白是actin結(jié)合蛋白中獨(dú)一無(wú)二的解聚微絲的蛋白群，其對(duì)肌動(dòng)蛋白發(fā)揮著重要調(diào)控作用：當(dāng)肌動(dòng)蛋白絲激活時(shí)，ADF/Cofilin家族蛋白能夠切斷肌動(dòng)蛋白絲，增加肌動(dòng)蛋白單體在肌絲末端的解聚合。這提示我們Cofilin在細(xì)胞骨架力學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)中發(fā)揮著重要作用。而以往的研究主要集中在內(nèi)皮、神經(jīng)、肌肉細(xì)胞中，對(duì)于成骨細(xì)胞的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)Flexcell應(yīng)力加載... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各組細(xì)胞Cofilin免疫熒光染色情況

d e f圖 1 各組細(xì)胞 Cofilin免疫熒光染色情況（藍(lán)色熒光區(qū)域表示細(xì)胞核，紅色熒光區(qū)域?yàn)?Cofilin 表達(dá)位置）a：0h 加載組 MG-63 細(xì)胞內(nèi) Cofilin 染色觀察（800x）b：1h 加載組 MG-63 細(xì)胞內(nèi) Cofilin 染色觀察（800x）c：4h 加載組 MG-63 細(xì)胞內(nèi) Cofilin 染色觀察（800x）d：8h 加載組 MG-63 細(xì)胞內(nèi) Cofilin 染色觀察（800x）e：12h 加載組 MG-63 細(xì)胞內(nèi) Cofilin 染色觀察（800x）f：24h 加載組 MG-63 細(xì)胞內(nèi) Cofilin 染色觀察（800x）3.2 各組細(xì)胞中 Cofilin mRNA 表達(dá)情況：見(jiàn)圖 2 和圖 3。半定量 RT-PCR 結(jié)果顯示，隨牽張應(yīng)力作用時(shí)間的延mRNA 水平無(wú)明顯變化，ANOVA 方差分析顯示，各組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間 Cofilin mRNA 水平也沒(méi)有顯著性差異（p>0.05），水平，Cofilin含量并無(wú)明顯變化。

不同牽張應(yīng)力加載時(shí)長(zhǎng)下 MG-63細(xì)胞內(nèi) Cofilin mRNA 表達(dá)的情況（*表示 p> MG-63 細(xì)胞中 Cofilin 含量變化： 4 和圖 5。WesternBlot 結(jié)果顯示，力學(xué)刺激后，Cofilin表達(dá)明顯上h組）相比，cofilin表達(dá)在加載 1h后已增加（p<0.01），4h時(shí)增加最明顯12、24h有所下降，但仍明顯高于對(duì)照組（p<0.01）。ANOVA 方差分異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。兩兩比較顯示，各組間差異均有統(tǒng)計(jì)5）。 Western Blot檢測(cè)各組細(xì)胞 Cofilin含量（1:0h 加載組，2:1h 加載組，3:4h 加載4:8h 加載組，5:12h 加載組，6:24h 加載組 GAPDH：磷酸甘油醛脫氫酶）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同牽張力對(duì)成骨細(xì)胞增殖與合成功能的影響[J]. 韓磊,李煌,趙計(jì)林,唐國(guó)華.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2012(06)
[2]機(jī)械牽張應(yīng)力刺激成骨細(xì)胞的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J]. 李菲菲,丁寅,馮雪,王歡,陳富林,李立文.  醫(yī)用生物力學(xué). 2010(06)
[3]微絲在堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子調(diào)節(jié)傷口愈合中的作用[J]. 顧海峰,何清濂,林子豪,劉麒,張杏梅.  中華創(chuàng)傷雜志. 2000(06)



本文編號(hào)：2954337