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地中海海綿合成多級孔生物玻璃對成骨細(xì)胞增殖分化的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-04-07 23:00

  本文關(guān)鍵詞:地中海海綿合成多級孔生物玻璃對成骨細(xì)胞增殖分化的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:新型多級孔生物活性玻璃(Mesoporous bioactive glass with a hierarchical pore structure,MBG)具有生物活性玻璃材料的成骨生物活性,同時(shí)具有介孔和大孔。介孔孔徑在2-50nm,可以裝載多種小分子藥物,且對藥物有控釋作用而被用于靶向藥物輸送;大孔孔徑大于50nm,可以相互連通成網(wǎng)絡(luò),構(gòu)成可使細(xì)胞長入的通道和空間,有利于引導(dǎo)骨細(xì)胞在孔壁上生長,同時(shí)有利于營養(yǎng)物質(zhì)傳輸?shù)皆偕M織的中央,為新生骨組織提供營養(yǎng)。因MBG有以上的優(yōu)點(diǎn)而成為近年的研究熱點(diǎn),在骨組織重建等研究中有廣闊的應(yīng)用前景。以地中海海綿為模板合成的新型多級孔生物活性玻璃是由吉林大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院自主研制的,具有多級孔生物玻璃的優(yōu)點(diǎn),目前已證實(shí),同以人工材料為模板的多級孔生物活性玻璃相比,該新型材料具有來源豐富,價(jià)格低廉,環(huán)境友好的優(yōu)點(diǎn),因而具有較好的應(yīng)用前景。目前該新型材料的生物學(xué)活性有待深入研究。目的:本研究以人源性成骨細(xì)胞MG63為實(shí)驗(yàn)?zāi)康募?xì)胞,通過MTT法、PNPP法、實(shí)時(shí)定量PCR法檢測MBG對成骨細(xì)胞增殖、分化的影響,旨在探討地中海海綿合成多級孔生物玻璃對人源性成骨樣細(xì)胞MG63增殖、分化的影響。方法:凍存MG63細(xì)胞系復(fù)蘇后培養(yǎng),分別使用MBG和普通生物玻璃72h浸提液、空白培養(yǎng)基與細(xì)胞共培養(yǎng),在1、3、5d,使用MTT法對細(xì)胞增殖進(jìn)行測定;MG63分別與多級孔生物玻璃和普通生物玻璃72h浸提液、空白培養(yǎng)基共培養(yǎng),在1、3、5d,使用PNPP法檢測細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性;MG63與多級孔生物玻璃和普通生物玻璃72h浸提液、空白培養(yǎng)基共培養(yǎng),實(shí)時(shí)定量PCR法檢測24h各組成骨相關(guān)基因Runx2、Sp7的m RNA表達(dá)水平。采用配對t檢驗(yàn)的方法,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:與普通生物玻璃組和空白對照組相比,MBG組在1、3、5d均可促進(jìn)MG63增殖(P0.01),且各時(shí)間點(diǎn)都可以增強(qiáng)MG63細(xì)胞內(nèi)ALP活性(P0.01);各組共培養(yǎng)24h后,MBG組較其他組可明顯上調(diào)成骨細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Sp7m RNA的表達(dá)(P0.01),但對Runx2 m RNA的表達(dá)無顯著影響。結(jié)論:地中海海綿合成多級孔生物玻璃(MBG)對細(xì)胞無毒性,有顯著的促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖的作用;MBG能上調(diào)成骨細(xì)胞中ALP表達(dá),證明該新型生物活性玻璃具有促成骨細(xì)胞成骨分化的作用;MBG上調(diào)成骨細(xì)胞中Sp7表達(dá),證明該新型生物活性玻璃有促成骨的作用;本研究結(jié)果顯示出MBG具有促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖與分化的作用,提示MBG具有促成骨作用,其成骨作用優(yōu)于普通生物玻璃材料。
【關(guān)鍵詞】:生物活性玻璃 成骨細(xì)胞 堿性磷酸酶 細(xì)胞增殖 細(xì)胞分化
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R783.1
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 第1章 引言11-16
  • 1.1 生物活性玻璃研究進(jìn)展12-13
  • 1.2 介孔生物活性玻璃研究進(jìn)展13-14
  • 1.3 多級孔生物玻璃研究進(jìn)展14
  • 1.4 本文研究背景及內(nèi)容14-16
  • 第2章 地中海海綿合成多級孔生物玻璃生物學(xué)性能的研究16-20
  • 2.1 主要儀器與試劑16-17
  • 2.2 細(xì)胞與材料17-18
  • 2.2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)17
  • 2.2.2 浸提液的制備17-18
  • 2.3 生物學(xué)活性測試18-20
  • 2.3.1 MG63細(xì)胞增殖檢測18
  • 2.3.2 MG63細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性檢測18
  • 2.3.3 MG63細(xì)胞內(nèi)成骨相關(guān)基因Sp7 mRNA檢測18-20
  • 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-22
  • 3.1 MBG促進(jìn)MG63細(xì)胞增殖20
  • 3.2 MBG促進(jìn)MG63細(xì)胞內(nèi)ALP活性20-21
  • 3.3 MBG上調(diào)MG63細(xì)胞內(nèi)成骨相關(guān)基因Sp7 mRNA的表達(dá)21-22
  • 第4章 討論22-26
  • 第5章 結(jié)論26-27
  • 參考文獻(xiàn)27-34
  • 作者簡介及在讀期間所取得的研究成果34-35
  • 致謝35

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:291488

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