牙齒受外力作用的大小對其本身及支持組織的健康至關重要，在臨床修復和正畸加力過程中，恢復適當?shù)囊Ш狭瓦x擇大小適宜的矯治力尤顯重要。當牙齒受力時，外力通過牙周膜傳遞和分散至頜骨，從而引發(fā)牙周組織對外力作用的生理應答。牙周膜成纖維細胞是構成牙周膜的主體細胞，在牙周組織的改建過程中發(fā)揮極其重要的作用，研究應力對HPDLF功能和結構的影響及應力在HPDLF的信號轉導途徑具有重要意義。 目的：本研究采用Forcel四點彎曲加力裝置，構建人牙周膜成纖維細胞體外培養(yǎng)—力學刺激模型，對人牙周膜成纖維細胞施加不同動態(tài)張、壓應力刺激，觀察機械力刺激對Ⅰ型膠原、纖連蛋白和整合素β1mRNA及蛋白表達的影響以及細胞骨架的變化。探討人牙周膜成纖維細胞在機械力作用下的生物學行為變化，為進一步闡明牙周膜在咬合力、矯治力作用下的適應性改建機理和機械力信號在細胞內的轉導機制提供理論依據(jù)。 方法：(1)采用刮取牙根中1／3牙周膜組織的取材方法，采用Ⅰ型膠原酶消化+組織塊貼附法進行hPDLF原代培養(yǎng)，通過傳代對細胞分離純
【學位單位】：四川大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2006
【中圖分類】：R78
【部分圖文】：

3加力采用華西口腔醫(yī)院正畸科與成都電子科技大學聯(lián)合開發(fā)的Focrel四點彎曲加力裝置(圖2.1.1)，對接種了細胞的加力板加力，頻率.0SHz，位移.05們n們n，加力板變形量1000ps恤ni(細胞變形量0.1%)，，位移In匡們n，加力板變形量2000pSartni(細胞變形量.02%)，位移2們n們n，加力板變形量4000“S如ni(細胞變形量.04%)

四川大學華西口腔醫(yī)學院博士學位論文驗分別采用55℃30see作為退火期。45次循環(huán)的擴增反應結束后，統(tǒng)將采集到的每一循環(huán)反應時的各反應管的熒光強度增長指(D助)進行分析，繪制每一反應管的擴增動力學曲線。根據(jù)動力線確定每個樣品管中熒光強度增加到某一特定闡值(threshofd)擴增循環(huán)數(shù)(Ct值，圖2.L2)，根據(jù)ct值與標準模板初始拷貝的值作圖，得到該樣品的標準曲線(圖2，L3)。

圖2.1.4對照及加力組總RNA提取物電泳圖規(guī)pRc結果圖2.1.5所示為I型膠原3%瓊脂糖凝膠電泳結果，p清晰亮度不同條帶，說明引物設計合成無誤，I型模板可用于定量反應。瓊脂糖電泳圖中我們可以看出目的基因在圖中的亮，表明其含量在對照組和加力組中有差異，但是由于PCR反應平臺期的問題，使常規(guī)PCR反應用以定量達量差異的方法準確性受到質疑。pCR結果

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本文編號：2830477