【摘要】： 顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病(temporomandibular disorders, TMD)可累及咀嚼肌和顳下頜關(guān)節(jié)(temporomandibular joint, TMJ)及其周圍軟組織,以女性多見,臨床上主要表現(xiàn)為顳下頜關(guān)節(jié)彈響、口頜面部疼痛、下頜運(yùn)動(dòng)障礙等�？陬M面疼痛和TMD與軀體及神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的病理狀態(tài)或病癥密切相關(guān),這一組疾病屬于口頜面區(qū)域非牙源性疼痛,并且作為骨骼肌紊亂病的一個(gè)亞類。目前關(guān)于顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病咀嚼肌疼痛的原因以及其與咬合異常之間的關(guān)系尚存在巨大的爭議。 本研究以雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠為實(shí)驗(yàn)對象,首先建立了急、慢性咬合干擾動(dòng)物模型,然后以行為學(xué)研究方法檢測各組大鼠施加咬合干擾前后雙側(cè)顳肌和咬肌的機(jī)械壓痛敏感度(痛敏分值),最后采用免疫組織化學(xué)方法研究雙側(cè)咬肌內(nèi)肌球蛋白重鏈表達(dá)變化情況。 1實(shí)驗(yàn)方法 1.1大鼠咬合干擾模型的建立方法 1.1.1急性咬合干擾:截取一1.5 mm長的5號針管并且夾扁,制成寬約1.0mm,厚約0.5mm的咬合加高裝置,用結(jié)扎絲穿過大鼠左側(cè)上頜第二磨牙近遠(yuǎn)中鄰間隙,將該裝置“8”字形結(jié)扎固定于第二磨牙牙合面上,形成個(gè)別后牙的急性咬合干擾。每天檢查,以保證所加咬合干擾沒有脫落,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。 1.1.2慢性咬合干擾:在大鼠左側(cè)上頜第一、二磨牙之間插入一正畸用橡皮筋(3 M Unitek, 1/8#),并盡量置于齦側(cè)以避免與對頜牙發(fā)生咬合接觸,然后盡量剪短皮筋以避免影響鄰近軟組織的功能活動(dòng)。在皮筋彈性力作用下,以第二、第三磨牙為支抗,推第一磨牙向近中移動(dòng),約7天后第一磨牙向近中移動(dòng)達(dá)0.8mm左右,從而形成上、下頜第一磨牙尖窩不吻合的咬合狀態(tài)。每天檢查,以保證所加皮筋沒有脫落,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。 1.2分組情況 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物共30只,隨機(jī)分為以下5組:(1)急性咬合干擾組(具體方法見上述內(nèi)容);(2)慢性咬合干擾組(具體方法見上述內(nèi)容);(3)急性去干擾物組:操作同急性咬合干擾組,在形成急性咬合加高后第10天時(shí)卸除加高物;(4)慢性去干擾物組:操作同慢性咬合干擾組,在插入皮筋后第10天時(shí)拆除皮筋,使近中移動(dòng)的第一磨牙自然回位。實(shí)驗(yàn)中觀察,約3～5天后(第14天左右)前移的第一磨牙基本回復(fù)到原來位置;(5)空白對照組:不做任何操作,同環(huán)境下飼養(yǎng)直至取材。 1.3行為學(xué)測試方法 參照1999年Ren所報(bào)道方法,據(jù)von Frey尼龍毛粗細(xì)和動(dòng)物痛覺反應(yīng)次數(shù),確定顳肌和咬肌疼痛分值,對比實(shí)驗(yàn)前后疼痛分值的變化。 1.4免疫組織化學(xué)方法檢測 采用石蠟切片、免疫組化ABC方法,檢測咬肌肌纖維中肌球蛋白重鏈表達(dá)比例變化及分布規(guī)律。 2結(jié)果 2.1行為學(xué)結(jié)果 急、慢性咬合干擾均可增高顳肌和咬肌痛敏分值(P0.05),急性咬合干擾組更明顯,敏感程度由大到小為:干擾側(cè)顳肌、干擾側(cè)咬肌、干擾對側(cè)顳肌(P0.05),對干擾對側(cè)咬肌的影響不明顯。干擾側(cè)咬肌和顳肌分別在實(shí)施急性咬合干擾第2、第3天,在實(shí)施慢性咬合干擾第4、第5天痛敏分值便開始升高,之后痛敏分值持續(xù)增高,于1周左右達(dá)到高峰,最后逐漸回落。但是急性去干擾物組痛敏分值回落速度明顯快于持續(xù)急性咬合干擾組(P0.05),而慢性去干擾物組痛敏分值回落速度則明顯慢于持續(xù)慢性咬合干擾組(P0.05),干擾對側(cè)顳肌的痛敏分值變化與此類似,但幅度較小。慢性去干擾物組痛敏分值回落較慢的原因可能是前移后復(fù)位的磨牙形成了二次咬合干擾的結(jié)果,而單純前移磨牙的慢性咬合干擾組則由于局部磨耗等代償機(jī)制,使得干擾程度自然緩解之緣故。 2.2免疫組化結(jié)果 急、慢性咬合干擾組肌球蛋白重鏈表達(dá)與對照組差異顯著,主要表現(xiàn)為慢性咬合干擾15天組咬肌內(nèi)MHC-Ⅱ的表達(dá)較對照組明顯增加(P0.05),急性15天組和慢性15天組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,慢性15天比急性15天陽性細(xì)胞數(shù)表達(dá)更明顯(P0.05)。左右側(cè)之間無明顯差異(P0.05),急、慢性咬合干擾7天組與對照組差異不顯著(P0.05),咬合干擾作用時(shí)間(7天、15天)對咬肌內(nèi)肌球蛋白重鏈表達(dá)的影響不明顯(P0.05),咬肌深、淺層以及前、中、后部各部位之間肌球蛋白重鏈表達(dá)未見有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 3結(jié)論 3.1行為學(xué)方面 急、慢性咬合干擾均可致顳肌和咬肌痛覺敏感,急性咬合干擾較慢性咬合干擾影響更為明顯,且急性咬合干擾痛敏出現(xiàn)峰值的時(shí)間要早于慢性咬合干擾,去除咬合干擾有助于緩解咀嚼肌痛敏。 3.2組織學(xué)方面 急、慢性咬合持續(xù)干擾可致咬肌肌纖維表現(xiàn)型比例的轉(zhuǎn)換,含有肌球蛋白重鏈Ⅱ型(MHC-Ⅱ)肌纖維比例增多,Ⅰ型纖維所占比例減少,且慢性咬合干擾組更為明顯。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R782
【圖文】：

圖 1 骨骼肌纖維的基本結(jié)構(gòu)（基膜肌內(nèi)膜肌束膜肌外膜）肌肉組織是由有收縮功能的肌細(xì)胞構(gòu)成的組織，肌細(xì)胞呈細(xì)長纖】，因此肌細(xì)胞又稱肌纖維，咀嚼肌是骨骼肌，其肌纖維為長柱

圖 3 人類升頜�。D肌、嚼肌、翼內(nèi)�。┖徒殿M�。ㄏ骂M舌骨肌、二腹肌、頦舌骨�。┘±w維類型的分布圖。更多相關(guān)資料，見于Korfage et al. (2001)[83]。由于不同的分類方法，使得不同的研究中，人類咀嚼肌的纖維的組成有很大的不同，如上【圖 3】所示[83]為升頜�。D肌、嚼肌、翼內(nèi)肌）和降

第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文圖2-1 大鼠深淺層咬肌取材示意圖肌肉切口位與肌纖維走向垂直1.7 染色方法1.7.1 HE 染色【圖 2-2d（附錄）】蘇木精配方（haematoxylin）：A：蘇木精 1g 加無水酒精 10ml 完全溶解。B：硫酸鉻鉀 20g 蒸餾水加溫溶解。AB 液混合完全溶解后，繼續(xù)加溫，煮沸后退火，加入 0.5-1gHgO，冷卻過濾后隔天使用。伊紅配方（Eosin）：伊紅 0.5-1g，用 95%酒精 100ml 完全溶解后皆可使用。石蠟切片染色步驟：(1) 石蠟包埋組織以 5um 厚度進(jìn)行切片，裱于 APES 處理的載玻片上。石蠟切片置 37℃烤箱過夜，實(shí)驗(yàn)前 40min 放入 60℃烤箱。(2) 切片浸入二甲苯溶液脫蠟，兩次，每次 30min。依次浸入 100%酒精兩次，95%酒精兩次

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

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本文編號：2755127