【摘要】： 目的:先天性腭裂目前主要通過腭裂手術進行修復,但術后患者上頜骨的繼發(fā)畸形會變得更加嚴重,影響患者的面容美觀。其主要原因是腭裂術后遺留在上頜骨硬腭的裸露骨面瘢痕攣縮所致。要改善這種繼發(fā)畸形的產生,必須要減少腭裂術后裸露骨面瘢痕形成。成纖維細胞在瘢痕的形成中是主要的效應細胞。本實驗將觀察重組人干擾素α-2b(rhIFNα-2b)對體外培養(yǎng)的腭裂術后裸露骨面瘢痕來源的成纖維細胞生物學作用的影響,探索rhIFNα-2b影響腭裂術后裸露骨面瘢痕作用的依據。 方法:首先在活體成年大耳白兔上建立腭裂術后裸露骨面瘢痕動物模型;將瘢痕組織切取后,利用體外細胞培養(yǎng)技術進行腭裂術后瘢痕成纖維細胞的原代及傳代培養(yǎng);將細胞因子rhIFNα-2b加入到培養(yǎng)的成纖維細胞中,分別通過MTT法、3H-TdR滲入法、流式細胞術等方法觀察、分析rhIFNα-2b對腭裂術后瘢痕成纖維細胞生物學行為的影響,數據采用方差分析及q檢驗處理。 結果:(1)MTT比色實驗測定結果顯示:加入rhIFNα-2b培養(yǎng)48h后,實驗組與對照組比較, 4000、6000、8000、10000U/ml濃度組OD值明顯低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05,P0.01)。提示rhIFNα-2b抑制腭裂術后瘢痕成纖維細胞生長增殖,并且這種抑制作用呈現出濃度依賴性。(2)3H-TdR摻入法結果顯示:加入rhIFNα-2b培養(yǎng)48h后,實驗組與對照組比較, 4000、6000、8000、10000U/ml濃度組cpm值明顯低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。提示rhIFNα-2b抑制腭裂術后瘢痕成纖維細胞DNA合成,并且這種抑制作用呈現出濃度依賴性。(3)流式細胞術結果顯示:加入rhIFNα-2b作用48h,實驗組與對照組比較,4000、6000、8000、10000U/ml濃度組處于G1期的百分比均明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05,P0.01)。隨著藥物濃度加大,DNA合成前期(G1)細胞百分數增多,呈現出濃度依賴性。提示rhIFNα-2b抑制腭裂術后瘢痕成纖維細胞生長增殖。 結論:rhIFNα-2b對腭裂術后瘢痕成纖維細胞的生長趨勢及增殖活性具有明顯抑制作用,提示rhIFNα-2b是腭裂術后瘢痕成纖維細胞負性調節(jié)因子,說明rhIFNα-2b在防治腭裂術后裸露骨面瘢痕的形成中有一定的應用價值。
【圖文】：

兔腭裂術后裸露骨面動物模型的建立

組織塊法培養(yǎng)腭裂術后裸露骨面瘢痕成纖維細胞
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R782

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本文編號：2601480