本文關(guān)鍵詞：慢性應(yīng)激大鼠抑郁癥模型獎賞系統(tǒng)多巴胺受體功能及中西抗抑郁藥作用的研究

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【摘要】：抑郁癥（major depressive disorder, MDD）是臨床上很常見的一種精神心理疾病，以持續(xù)性的情緒低落為主要特征，快感缺乏、動力低下是其主要核心癥狀，病程遷延，容易復(fù)發(fā)，自殺率高，嚴(yán)重地威脅著人們的生活質(zhì)量和生命健康。抑郁癥的發(fā)病機制非常復(fù)雜，到目前為止仍然不十分清楚，需要進一步深入的研究和探索。本實驗采用慢性不可預(yù)見性輕度應(yīng)激大鼠抑郁模型，來了解獎賞系統(tǒng)相關(guān)腦區(qū)在應(yīng)激前后及用藥不同階段的神經(jīng)生化改變，以期能為臨床治療提供新的認(rèn)識和方法。 第一部分抑郁癥獎賞系統(tǒng)多巴胺D2、D3受體功能障礙的研究 實驗一慢性不可預(yù)見性輕度應(yīng)激抑郁癥模型的建立 目的：大鼠抑郁模型是抑郁癥研究中最為關(guān)鍵的研究媒介，穩(wěn)定可靠的動物模型是研究工作成果是否可靠的重要基礎(chǔ)條件。本實驗采用慢性不可預(yù)見性輕度應(yīng)激（chronic unpredictable mild stress, CUMS）結(jié)合孤養(yǎng)的方法，以期獲得穩(wěn)定、可靠、重復(fù)性強的大鼠抑郁模型，為進一步的研究打下良好的基礎(chǔ)。 方法：選用成年雄性Sprague-Dawley大鼠，共16只，隨機分為正常組和模型組各8只，采用慢性不可預(yù)見性輕度應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)的方法，制作大鼠抑郁模型，進行21天應(yīng)激干預(yù)，分別于應(yīng)激干預(yù)前后進行強迫游泳實驗（The forced swimmingtest，F(xiàn)ST）和液體消耗實驗（Fluid consumption test）測量，并定期監(jiān)測大鼠體重變化，用以上三項指標(biāo)來評估大鼠快感缺乏和行為絕望的程度。模型制作結(jié)束后，應(yīng)用高效液相色譜質(zhì)譜連用方法（HPLC-MS）分析大鼠前額葉、海馬、伏隔核各腦區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物多巴胺（DA）、3,4-二羥基苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）、5-羥色胺（5-HT）、5-羥吲哚乙酸（5-HIAA）在應(yīng)激前后含量的變化，進一步評估大鼠抑郁模型的有效性。 結(jié)果： 1.行為學(xué)結(jié)果顯示，相對于正常組大鼠，模型組大鼠在接受應(yīng)激干預(yù)后液體消耗實驗的糖水偏愛指數(shù)下降顯著；強迫游泳實驗靜止不動時間明顯延長；體重增長值顯著下降。各項結(jié)果均差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義。 2. HPLC-MS檢測結(jié)果顯示，模型組在應(yīng)激后大鼠前額葉、海馬、伏隔核各腦區(qū)DA、DOPAC、HVA、5-HT、5-HIAA含量均比正常組有明顯減少，有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論：慢性不可預(yù)見性輕度應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)制做的大鼠抑郁模型，能夠很好的模擬人類抑郁癥的核心癥狀，模型大鼠快感缺乏，行為絕望，體重下降三項指標(biāo)均改變明顯，且腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)變化符合目前抑郁癥的神經(jīng)生化改變。模型癥狀穩(wěn)定，可重復(fù)性強，持續(xù)時間長，是非�？煽康膭游镆钟裟Ｐ停梢宰鳛榱己玫拿浇檫M性下一步的實驗。 實驗二5-羥色胺再攝取抑制劑對抑郁癥模型大鼠獎賞系統(tǒng)的影響 目的：抑郁癥核心癥狀快感缺乏是獎賞系統(tǒng)功能障礙的直接體現(xiàn)。通過大鼠抑郁模型進一步了解獎賞系統(tǒng)重要腦區(qū)多巴胺D2受體、多巴胺D3受體的在應(yīng)激干預(yù)前后含量變化，明確獎賞系統(tǒng)功能障礙的確切依據(jù)，并通過對比大鼠應(yīng)用5-羥色胺再攝取抑制劑西酞普蘭用藥前后不同階段神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物、D2DR、D3DR的變化，來探討5-羥色胺再攝取抑制劑對獎賞系統(tǒng)的可能影響。 方法：將依照實驗一部分制作的抑郁模型大鼠隨機分組，分別為鹽水對照早期組、鹽水對照晚期組、西酞普蘭早期組、西酞普蘭晚期組各6只。分別給予鹽水及西酞普蘭用藥干預(yù)，另外有隨機分組的對照組及模型組大鼠各6只，，分別正常飼養(yǎng)及僅按照前述模型制作方法制作成模型大鼠。分別于應(yīng)激干預(yù)前、后及用藥1天后及用藥14天后對各組大鼠進行行為學(xué)檢測，包括強迫游泳實驗、液體消耗實驗及體重監(jiān)測。然后通過HPLC-MS方法檢測大鼠單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物在應(yīng)激前后、用藥前后及用藥不同階段的變化，通過蛋白質(zhì)免疫印跡（Western-Blotting，WB）方法檢測D2DR、D3DR的含量改變，來進一步了解西酞普蘭用藥不同時期對獎賞系統(tǒng)的影響。 結(jié)果： 1.西酞普蘭晚期用藥組出現(xiàn)了明顯的行為學(xué)改善，糖水偏愛指數(shù)升高、強迫游泳不動時間縮短及體重增長值增加，有統(tǒng)計學(xué)意義，用藥早期無明顯改變。 2.西酞普蘭組早期組用藥1天后伏隔核DA、海馬DOPAC及海馬5-HT就有明顯增加，其余各組早期未見明顯有統(tǒng)計學(xué)意義的差別；晚期組用藥14天后西酞普蘭組各腦區(qū)DA、DOPAC、HVA、5-HT、5-HIAA均較鹽水對照組有明顯增加,有統(tǒng)計學(xué)意義。 3.模型組大鼠在應(yīng)激后與對照組大鼠比較，在前額葉、海馬、伏隔核各腦區(qū)D2DR及D3DR的表達(dá)均明顯下降，有統(tǒng)計學(xué)意義。在前額葉、海馬、伏隔核西酞普蘭早期組D2DR的表達(dá)較模型鹽水組有顯著增加，西酞普蘭晚期組D2DR的表達(dá)均比模型鹽水組有明顯增加，三個腦區(qū)內(nèi)西酞普蘭晚期組D2DR的表達(dá)仍較空白對照組明顯減少；在三個腦區(qū)內(nèi)西酞普蘭早期組及西酞普蘭晚期組D3DR表達(dá)均較模型鹽水組有明顯增加，用藥14天后西酞普蘭晚期組比西酞普蘭早期組D3DR表達(dá)又均有明顯減少；三個腦區(qū)內(nèi)D3DR表達(dá)西酞普蘭早期及晚期組均比空白對照組均有明顯減少，有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論： 1.大鼠抑郁模型存在獎賞系統(tǒng)功能障礙，主要表現(xiàn)在獎賞系統(tǒng)重要腦區(qū)多巴胺及其代謝產(chǎn)物及D2DR、D3DR的表達(dá)的下降。 2. D3DR的表達(dá)在用藥的早期出現(xiàn)一過性升高后，繼之又下降，到晚期組下降顯著，提示西酞普蘭對D3DR受體功能存在一定程度的抑制，表現(xiàn)在長期用藥后D3DR的表達(dá)減少，D2DR的表達(dá)雖然有所上升，但與正常組比較仍有較大差距，提示獎賞系統(tǒng)功能并未得到有效恢復(fù)。 第二部分柴胡加龍骨牡蠣湯抗抑郁作用的研究 目的：中醫(yī)中藥是中華民族的瑰寶，但因作用機制復(fù)雜不清而難以被廣泛認(rèn)可和接受，通過慢性應(yīng)激大鼠抑郁模型了解柴胡加龍骨牡蠣湯的抗抑郁作用，并通過與西酞普蘭對比探索其抗抑郁的作用機制。 方法：制作完成的大鼠抑郁模型，隨機分組為鹽水對照早期組、鹽水對照晚期組、西酞普蘭早期組、西酞普蘭晚期、中藥方劑早期組、中藥方劑晚期組各6只，分別于用藥1天后及用藥14天后進行強迫游泳實驗、液體消耗實驗及體重變化的行為學(xué)檢測。然后通過HPLC-MS方法檢測大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物的變化，通過蛋白質(zhì)免疫印跡（Western-Blotting，WB）方法檢測D2DR、D3DR的含量改變，通過與西酞普蘭比較，進一步了解柴胡加龍骨牡蠣湯的抗抑郁作用，以及對獎賞系統(tǒng)的影響。 結(jié)果： 1.行為學(xué)結(jié)果的對比發(fā)現(xiàn)，柴胡加龍骨牡蠣湯與西酞普蘭在改善抑郁癥狀的糖水偏愛指數(shù)及對體重的影響方面作用效果相當(dāng)，但柴胡加龍骨牡蠣湯比西酞普蘭能更為顯著的縮短強迫游泳的不動時間，差異顯著。 2.柴胡加龍骨牡蠣湯組單胺類神經(jīng)遞質(zhì)DA、DOPAC、HVA、5-HT、5-HIAA在用藥早期就開始出現(xiàn)，到用藥晚期各腦區(qū)均增加顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義，但較西酞普蘭組增加幅度相對較小，有統(tǒng)計學(xué)意義。 3.柴胡加龍骨牡蠣湯對D2DR、D3DR的影響趨勢與西酞普蘭相同，但幅度相對西酞普蘭較小，有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論： 1.從行為學(xué)檢測結(jié)果來看，柴胡加龍骨牡蠣湯對抑郁模型大鼠的抑郁癥狀行為學(xué)表現(xiàn)改善更加突出，其對強迫游泳不動時間的顯著縮短，提示柴胡加龍骨牡蠣湯對獎賞系統(tǒng)功能損害的行為絕望、動力低下的方面改善更為明顯，提示其對獎賞系統(tǒng)有一定保護作用。 2.通過與西酞普蘭的比較，提示柴胡加龍骨牡蠣湯有類似5-羥色胺再攝取抑制劑的抗抑郁效果，但對神經(jīng)遞質(zhì)及D2DR、D3DR的影響均較西酞普蘭弱，提示柴胡加龍骨牡蠣湯還有其他方面的抗抑郁機制在同時發(fā)揮作用，值得我們深入研究。
【關(guān)鍵詞】：抑郁癥 獎賞系統(tǒng) 多巴胺D2受體 多巴胺D3受體 柴胡加龍骨牡蠣湯
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.4
【目錄】：

• 摘要7-11
• Abstract11-16
• 第一部分 抑郁癥獎賞系統(tǒng)多巴胺 D2、D3 受體功能障礙的研究16-60
• 引言16-22
• 參考文獻19-22
• 實驗一 慢性不可預(yù)見性輕度應(yīng)激抑郁模型的建立22-37
• 前言22-23
• 材料和方法23-27
• 結(jié)果27-32
• 討論32-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻35-37
• 實驗二 5-羥色胺再攝取抑制劑對抑郁模型大鼠獎賞系統(tǒng)的影響37-60
• 前言37-38
• 材料和方法38-46
• 結(jié)果46-54
• 討論54-57
• 結(jié)論57-58
• 參考文獻58-60
• 第二部分 柴胡加龍骨牡蠣湯抗抑郁作用的研究60-87
• 前言60-61
• 材料和方法61-69
• 結(jié)果69-81
• 討論81-84
• 結(jié)論84-85
• 參考文獻85-87
• 綜述87-94
• 參考文獻91-94
• 致謝94-95

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 余化霖;葉雯睿;馬以騮;王廷華;馮忠堂;陳曄;;多巴胺D2受體拮抗劑、激動劑對SD大鼠條件化位置偏好的影響[J];動物學(xué)研究;2006年01期

2 鄧暖繁;;柴胡龍骨牡蠣湯治療惡性腫瘤化療后并發(fā)抑郁癥臨床觀察[J];光明中醫(yī);2012年01期

3 尚俊平;李巧蘭;石洲寶;;柴胡加龍骨牡蠣湯治療老年抑郁癥30例[J];甘肅中醫(yī);2010年02期

4 楊潔;瞿融;;基于抗抑郁作用的柴胡加龍骨牡蠣湯的研究進展[J];貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2012年06期

5 張中啟;抗抑郁藥與抑郁動物模型[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2001年04期

6 翁黃念慈,劉繼林;中藥復(fù)方治療抑郁狀態(tài)的述評[J];四川中醫(yī);2005年10期

7 夏軍,葉慧,周義成,張景峰,夏黎明,王承緣;慢性應(yīng)激大鼠抑郁模型的建立及其有效性的探討[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2005年04期

8 康大力;瞿融;朱維莉;馬世平;;柴胡加龍骨牡蠣湯對抑郁動物下丘腦-垂體-腎上腺軸的影響[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2005年11期

9 任鵬姣;馬世平;瞿融;謝娟;陶方哲;;柴胡加龍骨牡蠣湯組方配伍研究(Ⅲ)——對慢性應(yīng)激大鼠的抗抑郁作用[J];藥學(xué)與臨床研究;2008年02期

10 許晶,李曉秋;慢性應(yīng)激抑郁模型的建立及其評價[J];中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué);2003年01期

本文編號：903656