本文選題：羊水干細(xì)胞　切入點(diǎn)：細(xì)胞移植　出處：《蘇州大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：皮膚指身體表面包在肌肉外面的組織,是人體最大的器官,主要承擔(dān)著保護(hù)身體、排汗、感覺冷熱和壓力等功能。皮膚覆蓋全身,它使體內(nèi)各種組織和器官免受物理性、機(jī)械性、化學(xué)性和病原微生物性的侵襲。當(dāng)由于外界損傷或疾病等因素造成皮膚缺損時(shí),其危害可以是致命的。皮膚組織工程是利用生物學(xué)和工程學(xué)原理,構(gòu)建出用于修復(fù)、維持和改善損傷組織功能的替代物,形成人工再生的皮膚等同物,移植于需要修復(fù)、重建的皮膚病損處。隨著干細(xì)胞和組織工程研究不斷深入,干細(xì)胞作為種子細(xì)胞在組織工程中的價(jià)值得到逐步體現(xiàn)。尋找新型種子細(xì)胞在國(guó)內(nèi)外都是皮膚損傷修復(fù)研究領(lǐng)域的核心和熱點(diǎn)。羊水細(xì)胞由于其所處的特殊的解剖位置,長(zhǎng)期以來受到了人們的重視。對(duì)于羊水細(xì)胞的研究最早可追溯至20世紀(jì)初,隨著羊膜穿刺技術(shù)和細(xì)胞培養(yǎng)條件的日趨成熟,羊水細(xì)胞的培養(yǎng)成功率也得到了提高,羊水細(xì)胞的研究也得到了迅速的發(fā)展。羊水細(xì)胞在基因突變導(dǎo)致的染色體異常、遺傳病和先天性代謝異常等疾病的產(chǎn)前診斷中發(fā)揮著重要作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)羊水細(xì)胞中含有多種干細(xì)胞的標(biāo)記物,且在體外通過特殊的誘導(dǎo)微環(huán)境能夠分化成多種不同類型的細(xì)胞,這使羊水來源干細(xì)胞成為干細(xì)胞研究的一個(gè)新的熱點(diǎn)。因此羊水作為干細(xì)胞的一個(gè)新的來源,將為干細(xì)胞的研究揭開一個(gè)新的研究領(lǐng)域,為組織工程提供新的種子細(xì)胞來源。本研究皆在建立人羊水干細(xì)胞體外分離和培養(yǎng)方法,并分析其生物學(xué)特性,利用羊水干細(xì)胞的高增殖和多向分化潛能,開展羊水干細(xì)胞體外向表皮角質(zhì)細(xì)胞的分化研究,并在基因、蛋白、超微結(jié)構(gòu)等方面驗(yàn)證;在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步利用人羊水干細(xì)胞的低免疫原性的特征,構(gòu)建小鼠皮膚損傷模型,展開羊水干細(xì)胞對(duì)皮膚損傷修復(fù)的研究,觀察植入細(xì)胞的存活、遷移、分化及小鼠創(chuàng)面的修復(fù),探討其加快小鼠創(chuàng)面修復(fù)的關(guān)鍵分子機(jī)制。同時(shí),初步探討羊水干細(xì)胞在真皮層汗腺損傷修復(fù)中的作用,為皮膚組織工程提供理想的種子細(xì)胞,也為臨床治療大面積燒傷病人提出新方案,具有研究的創(chuàng)新性和潛在的應(yīng)用價(jià)值。第一部分人羊水干細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法和生物學(xué)特征鑒定及其向表皮角質(zhì)細(xì)胞分化的研究目的:建立體外分離、提取、培養(yǎng)和純化人羊水干細(xì)胞的方法,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定,在此基礎(chǔ)上,定向誘導(dǎo)羊水干細(xì)胞分化為表皮角質(zhì)細(xì)胞,并對(duì)其生物學(xué)特性及功能進(jìn)行鑒定。方法:選取孕19-22周健康婦女羊膜穿刺之羊水組織,在無菌條件下用cd117磁珠分選,分選出陽性細(xì)胞,1200rpm離心后加入羊水干細(xì)胞培養(yǎng)基,置于37℃、5%co2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),每天全量換液。倒置顯微鏡觀察體外培養(yǎng)的羊水干細(xì)胞的形態(tài),增殖情況。rt-pcr檢測(cè)不同傳代次數(shù)羊水干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞標(biāo)志基因的表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其表面標(biāo)志物;細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)計(jì)數(shù)分析羊水干細(xì)胞的傳代增殖能力。待細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合率為70%時(shí),進(jìn)行傳代培養(yǎng)。取第三代的羊水干細(xì)胞,以2×104個(gè)/皿的密度接種于6cm細(xì)胞培養(yǎng)皿中,收集培養(yǎng)過人角質(zhì)細(xì)胞的kgm2培養(yǎng)基,用0.22μm的濾器過濾,收集到的培養(yǎng)基為條件培養(yǎng)基cm(conditionedmedium)及添加誘導(dǎo)因子的角質(zhì)化細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基kbm2為誘導(dǎo)培養(yǎng)基,每天更換誘導(dǎo)培養(yǎng)基;待誘導(dǎo)后的細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合率為70%-80%時(shí),對(duì)細(xì)胞消化傳代,在倒置顯微鏡下觀察誘導(dǎo)分化細(xì)胞的形態(tài)變化,待細(xì)胞出現(xiàn)上皮樣克隆時(shí),在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中額外添加bmp4和維生素c,待誘導(dǎo)分化30天后得到羊水干細(xì)胞來源的的角質(zhì)細(xì)胞。rt-pcr檢測(cè)、免疫熒光染色分別在基因、蛋白水平檢測(cè)誘導(dǎo)后細(xì)胞的生物學(xué)特征;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)羊水干細(xì)胞的分化率;透射電鏡技術(shù)觀察細(xì)胞內(nèi)部超微結(jié)構(gòu);三維氣液組織培養(yǎng)方法及he染色檢測(cè)分化后的羊水干細(xì)胞形成復(fù)層上皮的能力,免疫組織化學(xué)分析誘導(dǎo)分化的羊水干細(xì)胞形成復(fù)層上皮中各個(gè)不同層次的標(biāo)志蛋白的表達(dá)。結(jié)果:(1)羊水干細(xì)胞表達(dá)表皮干細(xì)胞標(biāo)志(k19和β1-integrin)、胚胎干細(xì)胞的標(biāo)志(oct4、sox-2、c-myc、klf4、rex-1和nanog)和上皮細(xì)胞的標(biāo)志(k8和k18)及b7家族負(fù)性分子b7h1、b7h2、b7h3和b7h4及btla,但并不表達(dá)角質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志(k14)和正性共刺激分子cd40、cd80和cd86;t淋巴細(xì)胞體外增殖實(shí)驗(yàn)顯示,與羊水干細(xì)胞混合培養(yǎng)的t淋巴細(xì)胞增殖較前明顯減緩,而加入b7h1和b7h4阻斷性抗體后,t淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯增加,且阻斷b7h4后的作用更為顯著;(2)羊水干細(xì)胞誘導(dǎo)分化獲得的角質(zhì)細(xì)胞呈典型的上皮樣形態(tài),排列規(guī)則且緊密,邊界清晰,類似鋪路石狀,在基因和蛋白水平均表達(dá)正常角質(zhì)化細(xì)胞的標(biāo)志k5和k14,且分化率約為35%;(3)羊水干細(xì)胞分化而來的角質(zhì)細(xì)胞保留了羊水干細(xì)胞的高核質(zhì)比,且具有羊水干細(xì)胞不具有的特殊細(xì)胞器:張力原纖維;(4)三維氣液培養(yǎng)及he染色結(jié)果顯示羊水干細(xì)胞來源的角質(zhì)細(xì)胞能夠進(jìn)一步分化成熟,形成復(fù)層上皮,表達(dá)角質(zhì)細(xì)胞成熟的標(biāo)志k10,involucrin。結(jié)論:從羊膜穿刺健康樣本,經(jīng)過cd117磁珠分選后,成功獲得羊水干細(xì)胞,其干性介于胚胎干細(xì)胞與成體干細(xì)胞之間,具有向表皮角質(zhì)細(xì)胞的分化潛能,表達(dá)b7家族負(fù)性分子,具有免疫調(diào)節(jié)作用及高增殖能力。體外誘導(dǎo)羊水干細(xì)胞獲得的角質(zhì)細(xì)胞在基因和蛋白水平表達(dá)角質(zhì)化細(xì)胞標(biāo)志k5和k14,并具有角質(zhì)細(xì)胞典型的細(xì)胞器:張力原纖維,并且能進(jìn)一步分化成熟,形成復(fù)層上皮,表達(dá)角質(zhì)細(xì)胞成熟的標(biāo)志。因此,羊水干細(xì)胞可以做為皮膚損傷修復(fù)的有價(jià)值的種子細(xì)胞。第二部分人羊水干細(xì)胞參與小鼠皮膚損傷修復(fù)的研究及初步機(jī)制探討目的:建立小鼠背部皮膚損傷模型,利用羊水干細(xì)胞進(jìn)行移植修復(fù),觀察移植后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚損傷修復(fù)情況,羊水干細(xì)胞在小鼠體內(nèi)的存活,細(xì)胞的增殖及分化并分析其可能的修復(fù)機(jī)制,為進(jìn)一步深入研究羊水干細(xì)胞在皮膚損傷修復(fù)中的作用奠定基礎(chǔ),也為臨床治療提出新方案。方法:利用穩(wěn)定傳代的羊水干細(xì)胞,用慢病毒轉(zhuǎn)染了gfp報(bào)告基因,病毒滴度為6.5×106iu/ml,且流式檢測(cè)其轉(zhuǎn)化效率,確保后期實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。取鼠齡為4-6周的雄性balb/c小鼠,將其背部的毛發(fā)用電動(dòng)理發(fā)器剔除后在構(gòu)建直徑為1cm的圓形皮膚缺損創(chuàng)面,在創(chuàng)面邊緣注射入轉(zhuǎn)染gfp的羊水干細(xì)胞,羊水干細(xì)胞的數(shù)量為5x106,將轉(zhuǎn)染gfp的相同數(shù)量的成纖維細(xì)胞及假手術(shù)組作為對(duì)照,并將手術(shù)后的小鼠單獨(dú)飼養(yǎng),觀察至小鼠完全蘇醒并能自由活動(dòng),每隔一天觀察,并未出現(xiàn)異常及明顯的免疫排斥反應(yīng)。用uthscsaimagetool軟件計(jì)算小鼠創(chuàng)面大小,并作圖分析;分別取小鼠創(chuàng)面4天的肉芽組織及14天的修復(fù)組織進(jìn)行he染色,觀察炎癥細(xì)胞、血管的新生及創(chuàng)面的修復(fù)情況;流式細(xì)胞術(shù)及免疫熒光染色技術(shù)檢測(cè)植入小鼠創(chuàng)面細(xì)胞的存活情況及分化情況;real-timepcr分別檢測(cè)不同天數(shù)小鼠創(chuàng)面皮膚修復(fù)因子及炎癥相關(guān)因子的表達(dá)。利用小分子rna干擾技術(shù)下調(diào)b7h4分子在羊水干細(xì)胞中的表達(dá);制造皮膚損傷模型,在創(chuàng)面邊緣注射入下調(diào)b7h4的羊水干細(xì)胞,其數(shù)量為5x106,將轉(zhuǎn)染gfp的成纖維細(xì)胞及正常羊水干細(xì)胞組作為對(duì)照,分別取不同組別的小鼠創(chuàng)面進(jìn)行免疫化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)浸潤(rùn)的t淋巴細(xì)胞數(shù)量;real-timepcr分別檢測(cè)不同天數(shù)不同組別小鼠創(chuàng)面皮膚修復(fù)因子及炎癥相關(guān)因子的表達(dá),采用spss10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間兩兩對(duì)比進(jìn)行t檢驗(yàn),以p0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:(1)羊水干細(xì)胞組在移植細(xì)胞7天后,小鼠背部創(chuàng)面面積明顯小于成纖維細(xì)胞組和假手術(shù)組,術(shù)后14天,羊水干細(xì)胞組小鼠背部創(chuàng)面修復(fù)明顯加快,對(duì)照組創(chuàng)面愈合也較為明顯;術(shù)后21天,羊水干細(xì)胞組小鼠背部創(chuàng)面完全愈合,對(duì)照組創(chuàng)面較前縮小,但背部仍顯明顯創(chuàng)面;(2)羊水干細(xì)胞移植組新生表皮較成纖維細(xì)胞組和假手術(shù)組更厚,并且有比較多的新生血管和成纖維細(xì)胞,未見浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞,而成纖維細(xì)胞移植組和假手術(shù)組新生表皮較薄,有較多的炎癥細(xì)胞;術(shù)后14天,羊水干細(xì)胞移植組出現(xiàn)明顯的真皮乳頭結(jié)構(gòu)和毛囊等皮膚附屬器;(3)隨著修復(fù)的進(jìn)行,羊水干細(xì)胞在體內(nèi)的存在逐漸較少。熒光檢測(cè)結(jié)果顯示,羊水干細(xì)胞組和成纖維細(xì)胞組在術(shù)后7天仍有部分的gfp陽性細(xì)胞存在;術(shù)后21天,羊水干細(xì)胞組僅有個(gè)別gfp陽性細(xì)胞存在;(4)在修復(fù)早期,修復(fù)相關(guān)因子(bfgf,vegf,cxcl12,tgf-β1,kgf)在羊水干細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于成纖維細(xì)胞和假手術(shù)組,隨著修復(fù)的進(jìn)行,它們的表達(dá)逐漸下降,21天時(shí),表達(dá)量與正常小鼠皮膚的表達(dá)接近,而成纖維細(xì)胞組和假手術(shù)組的修復(fù)因子在7天時(shí)表達(dá)明顯低于羊水干細(xì)胞組,21天才到達(dá)最高;而早期的炎癥相關(guān)因子(il-1β,il-6,tnf-α,cox2及mac3)在成纖維細(xì)胞組和假手術(shù)組的表達(dá)明顯高于羊水干細(xì)胞組,隨著修復(fù)的進(jìn)行,各組的表達(dá)都逐漸下降,到達(dá)21天,羊水干細(xì)胞中的表達(dá)接近于正常小鼠皮膚的表達(dá),而成纖維細(xì)胞組和假手術(shù)組在21天時(shí)仍然高于羊水干細(xì)胞組;(5)經(jīng)小分子rna干擾后,羊水干細(xì)胞b7h4的表達(dá)明顯下降,與下調(diào)b7h4的羊水干細(xì)胞共培養(yǎng)的t淋巴細(xì)胞增殖數(shù)量明顯增加,由此顯示羊水干細(xì)胞表達(dá)的共刺激分子b7h4是下調(diào)t細(xì)胞體內(nèi)外增殖的關(guān)鍵因子;(6)而免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示,下調(diào)b7h4的羊水干細(xì)胞組有較多的浸潤(rùn)t淋巴細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)了浸潤(rùn)t淋巴細(xì)胞的比例發(fā)現(xiàn),成纖維細(xì)胞移植組、下調(diào)b7h4羊水干細(xì)胞移植組浸潤(rùn)的t淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯高于羊水干細(xì)胞組;(7)相應(yīng)生物因子檢測(cè)結(jié)果表明,在修復(fù)早期,修復(fù)相關(guān)因子在羊水干細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于成纖維細(xì)胞和下調(diào)b7h4羊水干細(xì)胞移植組,隨著修復(fù)的進(jìn)行,它們的表達(dá)逐漸下降,而成纖維細(xì)胞組和下調(diào)b7h4羊水干細(xì)胞移植組因子的表達(dá)在21天時(shí)才到達(dá)最高;同時(shí)還發(fā)現(xiàn),在早期,炎癥相關(guān)因子在成纖維細(xì)胞組和下調(diào)b7h4羊水干細(xì)胞組的表達(dá)明顯高于羊水干細(xì)胞組,隨著修復(fù)的進(jìn)行,各組的表達(dá)都逐漸下降,而成纖維細(xì)胞組和下調(diào)b7h4羊水干細(xì)胞組的表達(dá)在21天時(shí)仍然高于羊水干細(xì)胞組。結(jié)論:羊水干細(xì)胞能夠明顯加快小鼠創(chuàng)面的愈合,促進(jìn)血管形成,調(diào)節(jié)局部炎癥反應(yīng),提前形成皮膚附屬器;在修復(fù)早期,羊水干細(xì)胞能夠在體內(nèi)直接誘導(dǎo)分化成為表皮角質(zhì)細(xì)胞,表達(dá)角質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志;隨著修復(fù)的完成,羊水干細(xì)胞在小鼠體內(nèi)逐漸消失。修復(fù)后期,羊水干細(xì)胞可通過微環(huán)境,募集小鼠自身的干細(xì)胞參與修復(fù)。其通過微環(huán)境加快小鼠背部創(chuàng)面的愈合可能是通過b7h4的介導(dǎo)作用。下調(diào)b7h4在羊水干細(xì)胞的表達(dá),可介導(dǎo)創(chuàng)面修復(fù)減緩,損傷微環(huán)境中t淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)量增加以及炎癥反應(yīng)加劇。我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)負(fù)性b7家族分子-b7h4是介導(dǎo)羊水干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)的關(guān)鍵分子。羊水干細(xì)胞通過表達(dá)負(fù)性分子b7h4,建立有利于創(chuàng)面修復(fù)的炎癥反應(yīng)微環(huán)境,從而加快創(chuàng)面的愈合。第三部分人羊水干細(xì)胞向真皮汗腺細(xì)胞分化的研究目的:定向誘導(dǎo)羊水干細(xì)胞分化為真皮汗腺樣細(xì)胞,并對(duì)其生物學(xué)特性及功能進(jìn)行鑒定,在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探討羊水干細(xì)胞來源汗腺細(xì)胞對(duì)小鼠汗腺損傷修復(fù)。方法:用傳統(tǒng)方法將羊水干細(xì)胞培養(yǎng)后,real-timepcr檢測(cè)不同株羊水干細(xì)胞在汗腺相關(guān)基因的表達(dá),分析其向汗腺細(xì)胞分化的潛能。取第三代的羊水干細(xì)胞,以2×104個(gè)/皿的密度接種于6cm細(xì)胞培養(yǎng)皿中,收集培養(yǎng)過人汗腺細(xì)胞的條件培養(yǎng)基,用0.22μm的濾器過濾,收集到的培養(yǎng)基為cm及添加shh的汗腺細(xì)胞培養(yǎng)基sgm為誘導(dǎo)培養(yǎng)基,兩者比例為1:1,每天更換誘導(dǎo)培養(yǎng)基;待誘導(dǎo)后的細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合率為70%-80%時(shí),對(duì)細(xì)胞消化傳代,在倒置顯微鏡下觀察誘導(dǎo)分化細(xì)胞的形態(tài)變化,分別在7天,14天,21天,28天時(shí)對(duì)誘導(dǎo)的羊水干細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。real-timepcr、免疫熒光染色、分別在基因、蛋白水平檢測(cè)誘導(dǎo)后細(xì)胞的生物學(xué)特征;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)羊水干細(xì)胞的分化率;透射電鏡技術(shù)觀察細(xì)胞內(nèi)部超微結(jié)構(gòu);三維氣液組織培養(yǎng)方法及he染色檢測(cè)分化后的羊水干細(xì)胞形成汗腺樣結(jié)構(gòu)的能力,免疫熒光染色分析誘導(dǎo)分化的羊水干細(xì)胞形成的汗腺樣結(jié)構(gòu)在汗腺相關(guān)標(biāo)志的表達(dá)。在裸鼠肩部構(gòu)建汗腺損傷模型,將經(jīng)過生物學(xué)功能鑒定的羊水干細(xì)胞來源的汗腺細(xì)胞注射入損傷部位,注射入的細(xì)胞量為2x105。將pbs注射組,同體對(duì)側(cè)不做任何處理設(shè)為空白對(duì)照組。結(jié)果:(1)羊水干細(xì)胞在汗腺相關(guān)基因k18,cd24及k19有比較高的表達(dá),弱表達(dá)eda,edar,k8,但不表達(dá)cea;(2)羊水干細(xì)胞誘導(dǎo)分化獲得的汗腺細(xì)胞形成不同直徑的緊密排列的多層的扁平細(xì)胞,呈“鵝卵石”樣,在基因和蛋白水平均表達(dá)cea,且eda,edar及k8的表達(dá)也有顯著提高,流式檢測(cè)其分化率約為30%以上;(3)透射電鏡結(jié)果顯示,羊水干細(xì)胞分化而來的汗腺細(xì)胞具有羊水干細(xì)胞不具有的特殊細(xì)胞器:微絨毛,乙酰膽堿實(shí)驗(yàn)證明該汗腺的分泌功能;(4)三維氣液培養(yǎng)及he染色結(jié)果顯示羊水干細(xì)胞來源的汗腺細(xì)胞能夠進(jìn)一步分化成熟,形成汗腺樣結(jié)構(gòu),表達(dá)汗腺腺體的標(biāo)志:eda,edar,cea,k8,k18,na-k-atp及sma;(5)汗腺肩部損傷部位能夠形成汗腺腺體樣結(jié)構(gòu),表達(dá)k8,cea等標(biāo)志。結(jié)論:羊水干細(xì)胞具有向汗腺細(xì)胞的分化潛能。體外誘導(dǎo)羊水干細(xì)胞獲得的汗腺細(xì)胞在基因和蛋白水平表達(dá)汗腺細(xì)胞標(biāo)志eda,edar,k8,cea,其分化率約為30%,分化獲得的汗腺細(xì)胞具有汗腺的典型特征:微絨毛,并且能進(jìn)一步分化形成汗腺樣結(jié)構(gòu),表達(dá)汗腺腺體的標(biāo)志,能夠在體外修復(fù)損傷汗腺,形成汗腺腺體結(jié)構(gòu)。綜上所述,本研究建立的羊水干細(xì)胞體外培養(yǎng)和擴(kuò)增體系,并檢測(cè)了其生物學(xué)特征,在此基礎(chǔ)上,體外分化形成表皮角質(zhì)細(xì)胞不僅在細(xì)胞水平,更在分子、超微結(jié)構(gòu)上證實(shí)了分化而來的角質(zhì)細(xì)胞不僅具有正常角質(zhì)細(xì)胞的形態(tài),而且能進(jìn)一步成熟形成復(fù)層上皮,同時(shí)也通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)羊水干細(xì)胞表達(dá)的負(fù)性B7H4分子介導(dǎo)其免疫調(diào)節(jié)作用,使小鼠皮膚創(chuàng)面修復(fù)效果顯著。并在此基礎(chǔ)上,初步研究了羊水干細(xì)胞向真皮層汗腺細(xì)胞的分化,證明了羊水干細(xì)胞不僅能在體外誘導(dǎo)分化形成汗腺細(xì)胞,并且能在體內(nèi)形成汗腺樣結(jié)構(gòu),這為進(jìn)一步探討羊水干細(xì)胞移植治療大面積深度燒傷及其他免疫系統(tǒng)疾病的臨床運(yùn)用提供了新的理論基礎(chǔ),具有研究的創(chuàng)新性及良好的應(yīng)用價(jià)值。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R641

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1 Rhondal Rundle;欒雪梅;;干細(xì)胞研究的新熱點(diǎn)[J];中國(guó)處方藥;2008年08期

2 章靜波;;《人干細(xì)胞培養(yǎng)》(中譯本)出版[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2009年03期

3 張騰江;;干細(xì)胞美容——需要美好前景下的“淡定”前行[J];中國(guó)醫(yī)療美容;2013年02期

4 李凌松,湯健;切實(shí)加強(qiáng)干細(xì)胞的研究和管理[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2001年22期

5 熊文瑗;;干細(xì)胞讓你長(zhǎng)出新耳朵[J];大眾科技;2001年02期

6 韓忠朝;血液干細(xì)胞研究進(jìn)展[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2002年04期

7 李志琴;干細(xì)胞常用詞匯(續(xù)三)[J];解剖學(xué)報(bào);2003年03期

8 ;干細(xì)胞常用詞匯(續(xù)六)[J];解剖學(xué)報(bào);2003年06期

9 ;科學(xué)家用干細(xì)胞培養(yǎng)出了存活的組織器官[J];生命科學(xué)儀器;2003年05期

10 李重錫;;各國(guó)政府對(duì)干細(xì)胞研究的支持力度及其相關(guān)論文發(fā)表和專利申請(qǐng)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2007年15期

相關(guān)會(huì)議論文 前5條

1 李強(qiáng);郭學(xué)平;;透明質(zhì)酸應(yīng)用于干細(xì)胞培養(yǎng)的研究進(jìn)展[A];2011中國(guó)（威海）干細(xì)胞與組織工程治療前沿論壇論文集[C];2011年

2 張可華;袁寶珠;;治療性干細(xì)胞產(chǎn)品相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)因素[A];2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集[C];2012年

3 高寶成;陳堅(jiān);萬鋒;;U251在干細(xì)胞培養(yǎng)條件下的側(cè)群細(xì)胞表型及[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

4 孫玉華;任曉帥;鄧怡;徐安秀;趙熒暉;魏世成;;共價(jià)接枝生物分子構(gòu)建培養(yǎng)皿表面干細(xì)胞培養(yǎng)微環(huán)境及其對(duì)粘附功能的評(píng)價(jià)[A];第八屆全國(guó)口腔材料學(xué)術(shù)交流會(huì)暨中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)口腔材料專業(yè)委員會(huì)2013年會(huì)論文集[C];2013年

5 孫建軍;;脊髓彌漫性星形細(xì)胞瘤干細(xì)胞的培養(yǎng)和建模[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)分會(huì)第七屆全國(guó)中青年腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議——中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)分會(huì)“中華腫瘤 明日之星”大型評(píng)選活動(dòng)暨中青年委員全國(guó)遴選論文匯編[C];2011年

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1 記者 鄭穎t牎∥飧，

本文編號(hào)：1600657