本文關(guān)鍵詞：治療性低溫對窒息大鼠心肺復蘇后海馬神經(jīng)細胞活性氧及凋亡和自噬的影響

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【摘要】：目的：觀察治療性低溫（TH）對窒息致心臟驟停（CA）大鼠自主循環(huán)恢復（ROSC）后其海馬神經(jīng)細胞內(nèi)活性氧（ROS）產(chǎn)生量和神經(jīng)功能的關(guān)系；并觀察低溫對大鼠海馬凋亡相關(guān)基因caspase-3mRNA，自噬相關(guān)蛋白LC3B和線粒體自噬標志物Parkin表達的影響。 方法：65只健康成年雄性SD大鼠隨機分為2組：空白對照組（BC，n=5）和心肺復蘇組（CPR，n=60）。CPR組制作窒息法心肺復蘇模型，在ROSC后再隨機分為2組：常溫CPR組（NT）和低溫CPR組（HT）。NT組在ROSC后保持37℃恒溫，HT組在ROSC后立即行低溫32℃干預4小時。根據(jù)觀察時點的不同，再將兩組CPR組隨機分2個亞組：即ROSC后12小時和24小時組（NT-12，NT24，HT-12，HT-24）。到達觀察時點先對存活大鼠進行神經(jīng)功能缺損評分（NDS），，然后立即取雙側(cè)海馬組織，應用流式法檢測大鼠海馬單細胞懸液ROS水平。利用透射電鏡觀察海馬神經(jīng)細胞細胞核和線粒體的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)學變化。利用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術(shù)測定海馬神經(jīng)細胞caspase-3mRNA的表達水平；蛋白免疫印跡法（WB）測定海馬神經(jīng)細胞LC3B和Parkin蛋白水平。應用SPSS19.0軟件包，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩組間均數(shù)比較用成組t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析LSD-t檢驗。 結(jié)果：60只大鼠中有44只（73%）成功ROSC，存活到觀察時點的有33只大鼠（55%）。NT和HT組各時點的NDS明顯低于BC組（F=8.107, P0.05），HT-12和HT-24組的NDS與相同時點的NT組比較有顯著提高（t=9.692, P0.001; t=14.374,P0.001）。NT和HT組各時點的ROS產(chǎn)生量明顯高于BC組（F=16.824, P0.05），而HT-12和HT-24組的升高程度則明顯低于相同時點的NT組大鼠（t=9.836, P0.001;t=7.499, P0.001）。NT和HT組各時點的caspase-3mRNA表達量明顯高于BC組（F=24.527, P0.05），而HT-12和HT-24組的升高程度則明顯低于相同時點的NT組大鼠（t=6.935, P0.001; t=4.317, P0.001）。NT和HT組各時點的LC3B-II/I表達量明顯高于BC組（F=6.584, P0.05），而HT-12和HT-24組的升高程度則明顯低于相同時點的NT組大鼠（t=10.836, P0.001; t=2.653, P=0.02）。NT和HT組各時點的Parkin表達量明顯高于BC組（F=4.126, P0.05），而HT-12和HT-24組的升高程度則明顯低于相同時點的NT組大鼠（t=4.027, P=0.001; t=5.505, P0.001）。NT組海馬神經(jīng)細胞核和線粒體的形態(tài)學變化較BC組有明顯改變，HT組海馬神經(jīng)細胞核和線粒體與相同時點NT組比較損傷有所減輕。 結(jié)論：治療性低溫能減輕ROSC后大鼠腦神經(jīng)細胞損傷并提高其神經(jīng)功能，其機制之一可能是減少了CPR后大鼠神經(jīng)細胞活性氧蓄積量，并通過抑制caspase-3、LC3B和Parkin的表達使神經(jīng)細胞凋亡和包括線粒體自噬在內(nèi)的胞內(nèi)自噬減少。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R459.7

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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本文編號：1262140