發(fā)布時間：2017-09-07 23:14

  本文關(guān)鍵詞：Ⅲ型登革病毒D9964株在人胚肺二倍體細胞KMB17上適應株選育純化及其增殖動力學研究

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【摘要】：選育出Ⅲ型登革病毒中國株在人胚肺二倍體細胞KMB17上的適應株并對其生物學特性和增殖動力學進行研究,為研究登革病毒減毒活疫苗奠定基礎。Ⅲ型登革病毒中國株D9964經(jīng)RT-PCR鑒定型別正確后,進行毒種擴增和滴度測定;以4.0MOI接種KMB17細胞,反復傳代直至病毒能在細胞中適應和增殖;連續(xù)傳10代,選育出KMB17細胞適應株,經(jīng)三輪噬斑純化篩選適應株,微量滴定法檢測10代病毒培養(yǎng)液的感染性滴度;免疫熒光法檢測純化病毒株的抗原性;將病毒純化株接種KMB17細胞,取第3～7d細胞提取RNA,以Real-time PCR檢測病毒適應株在細胞中的增殖動態(tài)。結(jié)果顯示,經(jīng)適應性培養(yǎng)后Ⅲ型登革病毒中國株D9964能在KMB17細胞中穩(wěn)定增殖,經(jīng)噬斑純化獲得了高純度的細胞適應株,病毒保持了原始毒株良好的抗原性;增殖動力學研究顯示第5～6d為病毒在細胞內(nèi)的增殖高峰期。
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院/北京協(xié)和醫(yī)學院
【關(guān)鍵詞】： 登革病毒 人胚肺二倍體細胞 適應性 增殖動力學
【基金】：云南省科技廳社會發(fā)展科技計劃項目(2011CA016) 云南省自然科學基金項目(2012FB188,2009ZC187M) 中國醫(yī)學科學院病原生物學研究所中央級公益性科研院所科研業(yè)務費項目(2009IPB102) 中國醫(yī)學科學院醫(yī)學生物學研究所引進人才項目(IMB2009RC01)
【分類號】：R373.9
【正文快照】： 登革病毒(Dngue virus,DEN)屬于黃病毒科黃病毒屬中的一個血清型亞群,主要通過埃及伊蚊和白紋伊蚊等媒介昆蟲傳播,引起登革熱(Dengue fe-ver,DF)以及發(fā)病率和死亡率很高的登革出血熱(Dengue hemorrhagic fever,DHF)和登革休克綜合征(Dengue shock syndrome,DSS)[1]。病毒在蚊

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本文編號：810463