發(fā)布時(shí)間：2017-06-25 16:12

  本文關(guān)鍵詞：Neuralized siRNA表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構(gòu)建Neuralized siRNA干擾載體并觀察其對(duì)細(xì)胞中Neuralized表達(dá)水平的影響。方法化學(xué)合成靶向Neuralized的短發(fā)夾寡核苷酸序列,與線性化pGPU6/Neo質(zhì)粒退火連接。酶切后測(cè)序鑒定正確,轉(zhuǎn)染入HEK293細(xì)胞。利用Western blot和間接免疫熒光技術(shù)分析Neuralized siRNA載體對(duì)細(xì)胞中Neuralized表達(dá)及其定位的影響。結(jié)果 Neuralized siRNA干擾載體經(jīng)酶切及測(cè)序分析表明,目的核苷酸序列成功插入預(yù)計(jì)位點(diǎn)且序列正確;Neuralized siRNA干擾載體轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞后,Western blot檢測(cè)顯示,Neuralized siRNA干擾載體明顯降低細(xì)胞中Neuralized蛋白表達(dá);間接免疫熒光顯示,轉(zhuǎn)染4種Neuralized siRNA均能使定位于細(xì)胞膜上的Nneuralized蛋白的熒光強(qiáng)度變暗。結(jié)論 Neuralized siRNA干擾載體成功構(gòu)建,且能明顯抑制細(xì)胞中Neuralized的表達(dá)。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室生物化學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： Neuralized SiRNA干擾
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31060136)
【分類號(hào)】：R346
【正文快照】： Jagged1/Notch信號(hào)通路在動(dòng)物進(jìn)化過程中高度保守,其可以通過多種機(jī)制調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖及凋亡過程,調(diào)控多種組織器官的正常生長發(fā)育。因此,Notch信號(hào)通路活性的改變及其受體和配體的表達(dá)失調(diào)可導(dǎo)致多種疾病包括腫瘤的發(fā)生,尤其在調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中發(fā)揮著重要的作用[1-4]

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李祥蘇;吳叔明;;Jagged1/Notch在消化道腫瘤及其血管形成中的作用[J];國際消化病雜志;2011年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉鋒;呂世剛;祝新根;;Notch信號(hào)通路與腫瘤血管新生[J];中國微侵襲神經(jīng)外科雜志;2011年10期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄭仕杰;于洋;單偉;鄭德宇;秦書儉;包翠芬;;siRNA沉默HLA-A2表達(dá)的hMSCs對(duì)人異體T淋巴細(xì)胞分泌IFN-γ和IL-2功能的影響[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2011年02期

2 李海霞;韓晶晶;張?jiān)?張振中;;靶向hTERT的特異性siRNA抑制SMMC-7721肝癌細(xì)胞增殖機(jī)制研究[J];中國藥理學(xué)通報(bào);2011年05期

3 鐘晨;黃瑾;;泛素連接酶對(duì)Notch信號(hào)途徑的調(diào)節(jié)作用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年20期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

  本文關(guān)鍵詞：Neuralized siRNA表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：482745