目的:探究木犀草素、槲皮素、楊梅素、芹菜素、山柰酚及白楊素這6種黃酮對RAW264.7巨噬細胞極化的抑制活性及構(gòu)效關系。方法:選擇100 ng/mL脂多糖刺激RAW264.7巨噬細胞建立炎癥模型;利用噻唑藍法檢測細胞增殖活性;流式細胞術(shù)檢測細胞表面蛋白CD274和CD38表達;Western blot檢測炎性信號通路中相關蛋白的表達;定量聚合酶鏈式反應檢測M1型巨噬細胞標記基因水平。結(jié)果:6種黃酮在20 μmol/L下均不影響細胞正常生長;6種黃酮對巨噬細胞CD274和CD38表達均有抑制作用,其中木犀草素、芹菜素和白楊素的抑制作用強于槲皮素、楊梅素和山柰酚;木犀草素對核因子κB信號通路激活的抑制活性強于芹菜素和槲皮素,而楊梅素、山柰酚和白楊素沒有明顯抑制效果;木犀草素、芹菜素和白楊素抑制iNOS mRNA表達的活性強于其他3種化合物,木犀草素、槲皮素和芹菜素抑制IL-1β及MCP1 mRNA表達的活性強于其他3種化合物。結(jié)論:C環(huán)上3位的羥基取代不利于黃酮類化合物抑制巨噬細胞M1極化的活性,而B環(huán)上3’、4’位羥基取代有利于增強其活性。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 儀器與設備
    1.3 方法
        1.3.1 細胞培養(yǎng)
        1.3.2 MTT法檢測細胞活性
        1.3.3 流式細胞分析
        1.3.4 總蛋白質(zhì)提取及Western blot檢測
        1.3.5 總RNA提取及定量PCR分析
    1.4 數(shù)據(jù)處理及分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 6種黃酮對巨噬細胞活性的影響
    2.2 6種黃酮對LPS誘導的巨噬細胞表面標記蛋白的影響
    2.3 6種黃酮對LPS誘導的巨噬細胞中IκB磷酸化的影響
    2.4 6種黃酮對LPS誘導的M1型巨噬細胞標記基因表達水平的影響
3 討論



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