發(fā)布時間：2024-03-16 06:49

　　實驗目的:Prolactin family 3,subfamily c,member 1(Prl3c1)是泌乳素(PRL)家族成員之一。與大多數(shù)PRL家族成員不同,Prl3c1是一種新型催乳素樣基因,主要在雌性胚胎植入位點的蛻膜細胞表達,對妊娠維持起重要作用。本課題組前期發(fā)現(xiàn)Prl3c1表達于雄性睪丸間質(zhì)細胞中并且18天C57BL/6雄性小鼠組的Prl3c1 mRNA和蛋白表達低,成年組表達增加達高峰,老年組表達降低。鑒于Prl3c1表達水平與體內(nèi)睪酮水平隨年齡變化趨勢一致,推測其體內(nèi)功能可能與間質(zhì)細胞功能有關。因此本研究擬建立睪丸間質(zhì)細胞Prl3c1過表達轉(zhuǎn)基因小鼠并對其生物學功能進行初步研究。實驗方法:1.設計引物擴增insulin like 3(Insl3)、Prl3c1、Insl3PA片段,通過融合PCR,形成Insl3-Flag-Prl3c1-Insl3PA片段,構(gòu)建pPrl3c1轉(zhuǎn)基因載體,測序驗證。2.用受精卵原核顯微注射法建立Prl3c1轉(zhuǎn)基因小鼠模型。3.用免疫熒光和western blot方法鑒定Prl3c1轉(zhuǎn)基因表達情況。4.用HE染色的方法觀察Prl3c1轉(zhuǎn)基因...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.3融合產(chǎn)物電泳及回收鑒定圖

21圖1.3融合產(chǎn)物電泳及回收鑒定圖e1.3ElectrophoresisoffusionPCRproducts.M:200bpMark是Insl3-Flag-Prl3c1-mInsPA的電泳圖譜，右圖是產(chǎn)物純化回段的獲取結(jié)果EGFP表達框，切膠純化回收....

圖1.6載體酶切分析及回收鑒定電泳圖譜

圖1.6載體酶切分析及回收鑒定電泳圖譜Figure1.6RestrictionendonucleasedigestionpatternofrecombinantpEASY-blunt-Prl3c1and18T-EGFP.M:1KbladderMarker....

圖1.8轉(zhuǎn)基因小鼠PCR鑒定（A）與測序驗證（B）

圖1.8轉(zhuǎn)基因小鼠PCR鑒定（A）與測序驗證（B）.8TransgenticmicewereidentifiedbyPCRandverifiedbyDNAsequen的五十年里，工業(yè)化國家的人口總生育率明顯下降[9]，WHO報題將成為第三大疾病，僅....

圖3.dSTAR與CYP11A1在小炙辛丸中表達F蟀m}.dQVeaterahlatanalysesofSTARandCYP11A1piatemlevelsmmicethisWT.Pr13c1過表達小炙.WT.野生型對魷小炙.

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文3.5Prl3c1過表達抑制HCG誘導的STAR表達上調(diào)為了研究Prl3c1過表達參與睪酮產(chǎn)生的可能機制，我們利用westernblot方法分析了上述各組小鼠睪丸STAR與CYP11A1蛋白表達情況。結(jié)果顯示野生組與轉(zhuǎn)基....

本文編號：3929273