目的系統(tǒng)檢測(cè)人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞HTR-8/SVneo中Toll樣受體(TLR)mRNA的表達(dá)情況,定量分析TLRs配體刺激前后吲哚胺2,3雙加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)mRNA的表達(dá)差異。方法 RT-PCR檢測(cè)HTR-8/SVneo細(xì)胞中TLR 1-10mRNA的表達(dá)情況;實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)TLR3、TLR4、TLR7/8、TLR9配體刺激前后IDO mRNA表達(dá)水平。結(jié)果 HTR-8/SVneo細(xì)胞中有IDO及TLR 1-10 mRNA表達(dá);在48 h內(nèi)IDO mRNA表達(dá)隨著時(shí)間延長(zhǎng),呈升高趨勢(shì);IDO mRNA的表達(dá)與培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)狀況相關(guān);TLRs配體刺激后,除TLR-3轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)下調(diào)外,TLR-4、7、8、9 mRNA表達(dá)均上調(diào);poly(I∶C)刺激后IDO mRNA表達(dá)低于正常組,IFN-γ刺激后表達(dá)高于正常組(P<0.05)。結(jié)論 TLRs mRNA的表達(dá)提示該細(xì)胞具有抗感染作用;HTR-8/Svneo細(xì)胞中IDO mRNA的表達(dá)與母胎界面營(yíng)養(yǎng)狀況相關(guān);TLRs配體刺激劑對(duì)TLRs及IDO mRNA表達(dá)的影響不僅驗(yàn)...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 細(xì)胞來(lái)源與培養(yǎng)
    1.2 細(xì)胞總RNA提取
    1.3 RT-PCR引物及反應(yīng)體系條件
    1.4 IDO基因RNA標(biāo)準(zhǔn)品制備
    1.5 TLRs配體及IFN-γ刺激實(shí)驗(yàn)
    1.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 HTR-8/SVneo細(xì)胞中TLRs m RNA的表達(dá)
    2.2 HTR-8/SVneo細(xì)胞中IDO m RNA的表達(dá)
    2.3 HTR-8/SVneo細(xì)胞經(jīng)TLRs配體刺激后對(duì)應(yīng)TLRs m RNA表達(dá)
    2.4 HTR-8/SVneo細(xì)胞經(jīng)TLRs配體刺激后IDO m RNA表達(dá)差異
3 討論



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