目的:探討RORα在脂多糖所致小鼠巨噬細胞炎癥反應(yīng)過程中的表達變化與作用。方法:取小鼠骨髓來源的巨噬細胞（BMDMs）,加入100 ng/ml脂多糖（LPS）處理不同時間點后,利用熒光定量PCR（qRT-PCR）法檢測細胞中炎癥因子白介素1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）,以及RORα的轉(zhuǎn)錄水平變化,進一步利用Western blot檢測RORα蛋白水平變化;分別采用RORα激動劑SR1078和拮抗劑SR3335預(yù)處理細胞24 h后,LPS處理2 h,利用ELISA法檢測細胞上清中炎癥因子IL-1β,TNF-α和IL-6的含量。結(jié)果:100 ng/ml LPS在不同時間點均可顯著促進BMDMs炎癥因子IL-1β和TNF-α的轉(zhuǎn)錄水平表達（P＜0.05）,而在LPS處理1～12 h顯著抑制了RORα的轉(zhuǎn)錄水平（P＜0.05）,同時蛋白表達水平也明顯降低（P＜0.05）。與LPS處理組相比,SR1078預(yù)處理,可顯著抑制炎癥因子的釋放,而SR3335進一步激活了細胞炎癥因子的釋放（P＜0.05）。結(jié)論:RORα對脂多糖所致小鼠巨噬細胞炎癥反應(yīng)具有調(diào)節(jié)作用。 

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材 料
        1.1 動物:
        1.2 細胞培養(yǎng)與分組:
        1.3 主要試劑:
    2 實驗方法
        2.1 qRT-PCR法檢測細胞中蛋白轉(zhuǎn)錄水平:
        2.2 免疫印跡法(Western blot)檢測細胞中RORα蛋白水平:
        2.3 ELISA法檢測細胞培養(yǎng)液上清中炎癥因子IL-1β,TNF-α和白介素6(Interleukin-6,IL-6)的含量:
    3 統(tǒng)計學(xué)方法
結(jié) 果
    1 BMDMs在LPS處理不同時間點蛋白轉(zhuǎn)錄水平的表達
    2 BMDMs在LPS處理不同時間點RORα蛋白水平的表達
    3 RORα對LPS所致巨噬細胞炎癥因子釋放的影響
討 論


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]膿毒癥診斷的生物學(xué)標志物[J]. 王東強,田永超,李志軍.  陜西醫(yī)學(xué)雜志. 2011(03)
[4]白藜蘆醇對脂多糖引起小膠質(zhì)細胞激活的影響[J]. 周雷鳴,張玲,房明崗,賈濟.  陜西醫(yī)學(xué)雜志. 2014(11)

碩士論文
[1]蛋白4.1R在LPS誘導(dǎo)的膿毒癥中的作用及其調(diào)控機制研究[D]. 王成博.鄭州大學(xué) 2018



本文編號：3703809