目的:探討TNF-α和LTβ受體聯(lián)合活化對小鼠皮膚成纖維細胞表達ICAM-1和VCAM-1的影響。方法:胰酶、膠原酶兩步消化法分離新生BALB/c小鼠皮膚成纖維細胞并在培養(yǎng)板中培養(yǎng)至穩(wěn)定貼壁生長。細胞分為對照組、TNF-α處理組、LTβ受體激動劑（α-LTβR）處理組和TNF-α+α-LTβR聯(lián)合處理組。處理不同時間點后,流式細胞術(shù)檢測黏附分子ICAM-1和VCAM-1蛋白表達水平;熒光定量PCR方法檢測ICAM-1和VCAM-1 mRNA表達水平。結(jié)果:TNF-α處理能夠顯著誘導ICAM-1和VCAM-1蛋白水平表達上調(diào),雙陽性細胞比例在處理24 h后達到高峰,隨時間推移回落。單獨α-LTβR處理僅引起二者表達輕微上調(diào)。聯(lián)合處理組早期效應與TNF-α組一致,但在處理72 h后雙陽性細胞比例高于TNF-α組（P<0.05）。三種處理方式均能在早期誘導ICAM-1和VCAM-1 mRNA表達上調(diào),表達趨勢具有時間依賴性。結(jié)論:TNF-α和α-LTβR聯(lián)合刺激能夠顯著誘導小鼠皮膚成纖維細胞ICAM-1和VCAM-1表達上調(diào),獲得LTo表型。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠原代皮膚成纖維細胞的分離培養(yǎng)及處理
        1.2.2 成纖維細胞的姬姆薩染色形態(tài)學鑒定
        1.2.3 流式細胞術(shù)檢測ICAM-1、VCAM-1蛋白表達水平
        1.2.4 Real-time PCR檢測ICAM-1、VCAM-1 mRNA表達水平
    1.3 統(tǒng)計學處理
2 結(jié)果
    2.1 小鼠原代皮膚成纖維細胞的形態(tài)學鑒定
    2.2 TNF-α/α-LTβR誘導成纖維細胞ICAM-1、VCAM-1蛋白表達上調(diào)
    2.3 TNF-α/α-LTβR誘導成纖維細胞ICAM-1mRNA表達上調(diào)
    2.4 TNF-α/α-LTβR誘導成纖維細胞VCAM-1
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