目的通過線拴法制備SD雄性大鼠中動(dòng)脈栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）的腦缺血再灌注模型,體外培養(yǎng)缺氧缺糖及復(fù)氧（oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）BV-2細(xì)胞/原代星形膠質(zhì)細(xì)胞模型,觀察葉酸缺乏（folic acid deficiency,FD）對(duì)大鼠腦缺血再灌注模型和體外氧糖剝奪/復(fù)氧細(xì)胞模型中小膠質(zhì)細(xì)胞/星形膠質(zhì)細(xì)胞活化及其炎癥因子表達(dá)的影響,通過相關(guān)抑制劑及葉酸缺乏共同干預(yù)探討腦缺血再灌注后小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的機(jī)制,為防治與葉酸缺乏相關(guān)的腦缺血性疾病提供新的治療方法及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法第一部分:30只體重在120-150 g的雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（SHAM）、大腦中動(dòng)脈缺血再灌注組（MCAO）、葉酸缺乏+大腦中動(dòng)脈缺血再灌注組（MCAO+FD）,每組10只。正常飼料/葉酸缺乏飼料喂養(yǎng)28天后進(jìn)行MCAO手術(shù);造模后腦組織制成石蠟切片,蘇木精-伊紅染色法（hematoxylin-eosin,HE,n=4）和Fluoro-jade B法（FJ-B,n=4）檢... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

HE染色檢測(cè)葉酸缺乏對(duì)大腦梗死后海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞病理改變影響

染色檢測(cè)葉酸缺乏對(duì)大腦梗死后海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞變性的影響。A：左、G 區(qū)、CA1 區(qū)和 CA3 區(qū) FJ-B 單標(biāo)記及其放大圖（FJ-B 為綠色，DAPG 區(qū)、CA1 區(qū)和 CA3 區(qū) FJ-B 陽性細(xì)胞數(shù)/DAPI 細(xì)胞數(shù)均值及標(biāo)準(zhǔn)差柱較，b：與 MCAO 組比較，*表示 MCAO+FD 組 DG 區(qū)、CA1 區(qū)和 C.05（n=4，scale bar=50 μm）缺乏對(duì) I/R 大鼠患側(cè)海馬小膠質(zhì)細(xì)胞激活的影響織切片經(jīng)免疫熒光單標(biāo)記法檢測(cè)結(jié)果如圖 3 所示。SHAM 組在 CA3 區(qū)的 Iba-1 陽性細(xì)胞數(shù)目很少，甚至一些視野中未見陽M 組的大鼠大腦海馬區(qū)活化的小膠質(zhì)細(xì)胞很少；MCAO 手術(shù)膠質(zhì)細(xì)胞明顯被激活，葉酸缺乏后小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)一步被激活，與差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。對(duì)于 MCAO+FD 組的三個(gè)亞區(qū)得出 CA1 區(qū)相對(duì)于 DG 區(qū)和 CA3 區(qū)陽性細(xì)胞率顯著升高，差P<0.05），而 DG 區(qū)和 CA3 區(qū)差異尚不能認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（大鼠海馬組織蛋白的 Western blot 檢測(cè)進(jìn)一步證實(shí)，與 SHAM

激活 MCAO 后大鼠海馬區(qū)的小膠質(zhì)細(xì)胞。A：左、中、右分別 區(qū) Iba-1 免疫熒光單標(biāo)記及其放大圖（Iba-1 為紅色，DAPI 1 區(qū)和 CA3 區(qū) Iba-1 免疫熒光陽性細(xì)胞數(shù)/DAPI 細(xì)胞數(shù)均值及ot 檢測(cè)葉酸缺乏后腦組織中 Iba-1 的表達(dá)結(jié)果，a：與 SHAM，*表示 MCAO+FD 組 DG 區(qū)、CA1 區(qū)和 CA3 區(qū)兩兩比較，）乏對(duì) I/R 大鼠患側(cè)海馬區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞中 TNF-α表達(dá)的見，SHAM 組在 DG 區(qū)、CA1 區(qū)和 CA3 區(qū)幾乎未見 I，表明 SHAM 組的大鼠大腦海馬區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞幾乎未標(biāo)陽性細(xì)胞數(shù)目相對(duì)較多。同時(shí)可以明顯看出 MCAO更多陽性細(xì)胞的表達(dá)。分別對(duì) SHAM 組、MCAO 組A1 區(qū)和 CA3 區(qū) Iba-1/TNF-α陽性細(xì)胞數(shù)/DAPI 細(xì)胞數(shù)發(fā)現(xiàn)，MCAO 組三個(gè)亞區(qū)相對(duì)于 SHAM 組該比值增大CAO 組該比值增大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小膠質(zhì)細(xì)胞自噬在缺血性腦卒中中作用的研究進(jìn)展[J]. 王棟,侯博儒,楊文楨,康軍林,任海軍.  中國康復(fù)理論與實(shí)踐. 2016(12)
[2]葉酸、維生素B12、同型半胱氨酸代謝與腦梗死患者脂質(zhì)水平、炎癥反應(yīng)程度的相關(guān)性[J]. 丁莉.  海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2017(05)
[3]高血壓人群血清葉酸與炎癥因子的相關(guān)性研究[J]. 鄭輻,薛瑤純,李培德,韋柳,趙秀娟,馬靜.  中國熱帶醫(yī)學(xué). 2015(05)
[4]重度癡呆患者和血清維生素B12、葉酸及同型半胱氨酸水平及其相關(guān)性研究[J]. 丁仁峰,葉綠素,楊華,郭忠偉.  臨床精神醫(yī)學(xué)雜志. 2015(01)
[5]小膠質(zhì)細(xì)胞在缺血性腦卒中的神經(jīng)保護(hù)作用[J]. 李立,吳世政,張淑坤.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2014(23)
[6]Enteric glial cells and their role in the intestinal epithelial barrier[J]. Yan-Bo Yu,Yan-Qing.  World Journal of Gastroenterology. 2014(32)
[7]小膠質(zhì)細(xì)胞及免疫相關(guān)受體在老年癡呆癥中的作用研究進(jìn)展[J]. 何曉,孫秉貴.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2014(06)
[8]葉酸干預(yù)對(duì)運(yùn)動(dòng)人群血漿炎癥因子的影響[J]. 曾榛,張?jiān)?王力先,陳嚴(yán),石珊,馬靜.  華南預(yù)防醫(yī)學(xué). 2014(02)
[9]葉酸和維生素B12對(duì)伴有高同型半胱氨酸血癥腦梗死患者炎癥因子的干預(yù)研究[J]. 蘇牟瀟,姚力瑛.  中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2013(26)
[10]健腦安對(duì)血管性癡呆大鼠海馬區(qū)IL-1β誘導(dǎo)的c-fos蛋白表達(dá)的影響[J]. 時(shí)晶,田金洲,朱愛華,尹軍祥,高揚(yáng),林嘉友,王永炎.  中國中藥雜志. 2004(06)

博士論文
[1]調(diào)節(jié)性T細(xì)胞移植對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦缺血損傷的保護(hù)作用[D]. 李佩盈.復(fù)旦大學(xué) 2013

碩士論文
[1]Aβ在小膠質(zhì)細(xì)胞中的內(nèi)吞、轉(zhuǎn)運(yùn)和降解的研究[D]. 李佳.廈門大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3095433