肺炎鏈球菌是世界范圍內最常見的高發(fā)病率和死亡率細菌性病原菌之一,能夠導致嚴重的敗血癥等侵襲性和非侵襲性疾病,是導致全球5歲以下兒童死亡的重要病原菌。由于疫苗覆蓋率不足、疫苗使用后期出現(xiàn)的血清型替代問題以及對傳統(tǒng)抗生素耐藥性問題的日益嚴重,目前臨床治療和預防肺炎鏈球菌感染面臨巨大的挑戰(zhàn),因此必須對新的藥物和疫苗進行研究。膽堿結合蛋白(Choline binding proteins,CBP)是在肺炎鏈球菌及相關鏈球菌屬中發(fā)現(xiàn)的多肽家族,具有模塊化的結構:功能模塊(Functional module,FM)和膽堿結合模塊(Choline binding module,CBM),其通過非共價作用將蛋白質錨定在細胞壁中存在的膽堿殘基上。肺炎鏈球菌CBP包括細胞壁水解酶,粘附素和其他毒力因子,它們對細菌活力和毒力起著重要的生理作用。噬菌體裂解酶是噬菌體編碼的特異水解肽聚糖的水解酶類,通過破壞細胞壁完整性釋放子代噬菌體顆粒。肺炎鏈球菌噬菌體裂解酶都具有模塊化結構,即N端催化域和C端細胞壁結合域。肺炎鏈球菌編碼的裂解酶類不具有信號肽序列,其通過holin系統(tǒng)穿過質膜以攻擊肽聚糖上底物。本研究對文獻已報道的肺炎鏈球菌裂解酶ClyJ、Cpl-1以及ClyR的協(xié)同殺菌效果進行研究,其中ClyJ和Cpl-1具有典型的CBM結構域。通過在體內外的實驗,探索不同裂解酶之間催化域、結合域以及催化域和結合域之間的協(xié)同作用,為裂解酶的聯(lián)合應用奠定基礎。實驗結果表明,肺炎鏈球菌裂解酶ClyJ與Cpl-1之間存在明顯的協(xié)同效果,體內體外都具有明顯的增強殺菌和提高小鼠保護效果的作用。同時,對具有CBM結構域的裂解酶進行小鼠免疫實驗,初步結果顯示裂解酶具有較好的免疫保護效果。本研究的結果進一步證實了裂解酶聯(lián)合應用體內外殺菌的高效性,不僅可以降低細菌耐藥的形成,同時可以作為新的抗菌藥和候選疫苗。
【學位單位】：中國科學院大學(中國科學院武漢病毒研究所)
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R378
【部分圖文】：

血癥的主要血清型 [63]。20世紀90年代，肺炎鏈球菌抗性基因流行并在北歐、東歐、北美、南美以及亞洲等國家迅速傳播 [64]。來自法國的一項研究數(shù)據(jù)（如圖1.2所示），所有年齡段患者中19,266例侵襲性肺炎球菌分離株對青霉素和紅霉素的耐藥趨勢，這種趨勢在2005年之后有所下降，主要原因在于PCV7的使用對于耐藥菌株的形成和傳播有一定的預防效果[65]。另一研究表明，肺炎鏈球菌耐藥率依然呈逐年上升趨勢，其主要是由于非疫苗血清型耐藥菌株在近10年迅速增加，尤其是多耐藥菌19A[52]，這種現(xiàn)象被稱為血清替代現(xiàn)象，即非疫苗血清型逐漸成為主要致病菌。

肺炎鏈球菌及其裂解酶編碼的 CBP 模塊化結構。藍色代表膽堿結合模塊（結合重復序列（CBR）；綠色表示非保守區(qū) CBRs；黃色表示 CW_bindi結合膽堿。CHAP：半胱氨酸，組氨酸依賴性酰胺水解酶/肽酶模塊；Lactof.白結合域；FH bind.：H結合因子結構域；R1和R2：具有粘附素功能的結構 1.3 Modular organization of host- and phage-encoded pneumococcal CBPs. Bepresent the choline-binding repeats (CBRs) which configure the choline-bindies (CBM). Non-consensus CBRs are shown in green. Yellow units represent reing to the CW_binding_1 PFAM family but unable to bind choline.Activities ral functional modules are shown: CHAP, cysteine, histidine-dependenthydrolase/peptidase module; Lactof. binding, lactoferrin-binding domain; FH bH-binding domain; R1 and R2, domains with adhesin functions[128]炎鏈球菌 CBPs 對于細菌生存和獨立具有重要的作用，且覆蓋所清型，因此是潛在的新型藥物靶標 [129]。作為新型藥物靶標，C勢：1）CBPs 在所有肺炎鏈球菌血清型細胞壁表面都有發(fā)現(xiàn)，因

圖 3.1 本研究所涉及的裂解酶 SDS-PAGE 圖Figure 3.1 12% SDS-PAGE analysis of the proteins used in this study表 3.1 裂解酶 ClyJ、Cpl-1 及 ClyR 內毒素含量Table 3.1 The endotoxin concentration of ClyJ, Cpl-1and ClyR裂解酶的分子解析ClyR、Cpl-1 結構組成如圖 3.2 所示。ClyJ 與 ClyR 是本實驗裂解酶，對肺炎鏈球菌有很好的殺菌活性。ClyJ 的催化域結xin concentrationL)ClyJCpl-1 ClyRremoval of endotoxin325 580 1430moval of endotoxin40 32 144
【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 熱合曼·牙生;穆凱代斯·塔伊爾;;羊肺炎鏈球菌病診斷與防治[J];畜牧獸醫(yī)科學(電子版);2019年07期

2 邵致遠;游雪甫;楊信怡;;肺炎鏈球菌自溶素研究進展[J];中國醫(yī)藥生物技術;2019年03期

3 劉俊娜;王小利;付國鵬;;對西安市長安區(qū)醫(yī)院住院患者檢測標本中121株肺炎鏈球菌耐藥情況的分析[J];當代醫(yī)藥論叢;2019年11期

4 徐璐;孫靜靜;;2014—2016年河南兒童感染肺炎鏈球菌耐藥性分析[J];醫(yī)藥論壇雜志;2017年11期

5 于會娜;付強;晏霞;周云;屈悅;王婷;周義正;楊嚴;;荊州地區(qū)肺炎鏈球菌流行特點的回顧性研究[J];臨床與病理雜志;2018年03期

6 努爾蘭·麥力克;;一種犢牛肺炎鏈球菌病的治療[J];農家參謀;2018年10期

7 何麗娟;徐國綱;李澤年;;肺炎鏈球菌的研究現(xiàn)狀和耐藥機制與應對措施[J];老年醫(yī)學與保健;2016年06期

8 林琳;劉曉民;賈琰琰;馬雨霞;張敏;;關于肺炎鏈球菌易感人群的研究進展[J];臨床肺科雜志;2016年06期

9 李端;壹圖;;預防肺炎有新疫苗[J];中老年保健;2017年06期

10 宋圣帆;葉露;胡善聯(lián);杜麗俠;施強;;上海市肺炎鏈球菌住院患者的醫(yī)療費用研究[J];中國衛(wèi)生資源;2014年04期

相關博士學位論文 前10條

1 孫天旭;廣譜肺炎鏈球菌蛋白疫苗和金黃色葡萄球菌蛋白疫苗的研究[D];吉林大學;2015年

2 盧井才;肺炎鏈球菌重組蛋白疫苗的研究[D];吉林大學;2015年

3 于今非;肺炎鏈球菌PspA蛋白疫苗的優(yōu)化及其廣譜性評價研究[D];吉林大學;2018年

4 楊宏波;肺炎鏈球菌多抗藥外排系統(tǒng)Spr0693-0694-0695的結構與功能研究[D];中國科學技術大學;2018年

5 孟江萍;應用啟動子誘捕策略篩選并初步鑒定肺炎鏈球菌宿主體內誘導基因[D];重慶醫(yī)科大學;2005年

6 胥文春;DFI體內篩選肺炎鏈球菌致腦膜炎相關基因[D];重慶醫(yī)科大學;2007年

7 張雪梅;肺炎鏈球菌轉化對細菌毒力和耐藥性影響的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2003年

8 于康;23F血清型肺炎鏈球菌和艱難梭菌相關多糖抗原的寡糖類似物合成研究[D];山東大學;2017年

9 閆文娟;肺炎鏈球菌ClpE相互作用蛋白的篩選鑒定[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

10 梁曉;基于二氫葉酸合成酶的磺胺類藥物多殘留快速檢測分析研究[D];中國農業(yè)大學;2014年

相關碩士學位論文 前10條

1 高凱杰;兒童侵襲性肺炎鏈球菌感染血清學分型及耐藥性研究[D];鄭州大學;2019年

2 王淑娟;肺炎鏈球菌噬菌體裂解酶協(xié)同作用的研究[D];中國科學院大學(中國科學院武漢病毒研究所);2019年

3 徐牽;肺炎鏈球菌ABC轉運蛋白Spr1677-78和膽堿結合蛋白CbpJ的結構和功能初探[D];中國科學技術大學;2019年

4 董運亮;肺炎鏈球菌PhtD和PcpA蛋白疫苗研究[D];吉林大學;2015年

5 王丹丹;以細菌樣顆粒為載體的肺炎鏈球菌表面蛋白A肺炎疫苗的研究[D];吉林大學;2016年

6 張競輝;MarR型轉錄調控因子FabT對肺炎鏈球菌莢膜多糖和磷壁酸多糖生物合成的調控研究[D];重慶醫(yī)科大學;2018年

7 張心愿;具有生物礦化能力的新型肺炎鏈球菌減毒活疫苗的制備[D];重慶醫(yī)科大學;2018年

8 嚴彩芳;肺炎鏈球菌分子分型方法的建立及應用[D];吉林大學;2018年

9 韓嬌;兒童肺炎鏈球菌耐藥性與耐藥基因分型研究[D];山西醫(yī)科大學;2018年

10 李玲;柳州5歲以下兒童醫(yī)院相關肺炎鏈球菌的耐藥和分子特征研究[D];廣東藥科大學;2018年

本文編號：2847138