【摘要】：目的:探討兔骨骼肌干細(xì)胞(MDSCs)分離、鑒定及誘導(dǎo)分化為平滑肌細(xì)胞的方法。方法:應(yīng)用酶消化法消化兔骨骼肌組織,應(yīng)用改良差速貼壁法獲得MDSCs,并用免疫組化和免疫熒光鑒定,體外誘導(dǎo)骨骼肌干細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞定向分化,鏡下觀察細(xì)胞生長情況;Real-time PCR和Western blot檢測(cè)平滑肌細(xì)胞特異標(biāo)記α-SMA和SM-MHC的表達(dá)情況。結(jié)果:骨骼肌干細(xì)胞具有良好的增殖能力和分化潛能,免疫細(xì)胞化學(xué)染色法和免疫細(xì)胞熒光法顯示MDSCs呈結(jié)蛋白、干細(xì)胞抗原-1(Sca-1)和CD34陽性,CD45陰性,誘導(dǎo)后細(xì)胞排列形態(tài)呈漩渦狀,Real-time PCR和Western blot結(jié)果提示α-SMA和SM-MHC表達(dá)增高。結(jié)論:骨骼肌干細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)及誘導(dǎo)后,呈明顯的平滑肌細(xì)胞特性,可作為輸尿管組織工程新的種子細(xì)胞來源。
[Abstract]:Aim: to investigate the method of (MDSCs) isolation, identification and differentiation of rabbit skeletal muscle stem cells into smooth muscle cells. Methods: the rabbit skeletal muscle tissue was digested by enzyme digestion and MDSCs, was obtained by modified differential adherent method. The differentiation of skeletal muscle stem cells into smooth muscle cells was induced by immunohistochemistry and immunofluorescence in vitro. Cell growth was observed under microscope. The expression of 偽-SMA and SM-MHC in smooth muscle cells was detected by Real-time PCR and Western blot. Results: skeletal muscle stem cells had good proliferative ability and differentiation potential. Immunocytochemical staining and immunocytofluorescence showed that MDSCs was desmin, stem cell antigen 1 (Sca-1) and CD34 were positive, and CD45 was negative. The results of Real-time PCR and Western blot showed that the expression of 偽-SMA and SM-MHC increased. Conclusion: skeletal muscle stem cells can be used as a new seed cell source for ureteral tissue engineering.
【作者單位】： 武漢大學(xué)中南醫(yī)院泌尿外科;
【分類號(hào)】：R329.28

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本文編號(hào)：2318012