發(fā)布時間：2017-11-19 23:17

  本文關鍵詞：人臍帶間充質干細胞植入大鼠肝切模型中的分化研究

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【摘要】：目的:探討攜帶增強型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)標記的人臍帶間充質干細胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSC)植入肝部分切除大鼠體內后,其在大鼠肝臟中的分化能力。方法:首先將人臍帶間充質干細胞分離培養(yǎng)并且進行表面標志物檢測,以攜帶EGFP標記的慢病毒載體(lentiviral vector,LV)轉染HUC-MSC。將SD大鼠隨機分成3組:空白組、模型組及實驗組,3組均建立大鼠肝切模型,空白組不注入HUC-MSC,模型組注入未標記的HUC-MSC,實驗組注入EGFP標記的HUC-MSC。3個月后分離大鼠肝臟細胞,繼而進行相關指標檢測。冰凍切片HE染色觀察病理結構,流式細胞儀檢測間充質干細胞的純度及CD90在肝細胞中的表達量,熒光顯微鏡觀察EGFP在肝組織的表達。結果:病理切片顯示帶有EGFP的人臍帶間充質干細胞在組織上表達,其中一部分聚集于血管內,形成栓子,附在血管壁上;手術后各組大鼠的肝都有炎癥反應,但組織結構良好,各組間未見明顯的形態(tài)學差異。HUC-MSC高表達CD44、CD29、CD105和CD90,不表達CD34、CD45、CD106、CD31、CD40和HLA-DR。流式結果顯示模型組EGFP的表達率為(0.27±0.21)%,實驗組為(11.68±1.46)%,與模型組相比具有統(tǒng)計學意義(P0.01)。CD90的表達結果顯示模型組CD90的表達量較高,為(0.843±0.146)%,實驗組低表達CD90,陽性率為(0.026±0.017)%,與模型組相比具有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結論:人間充質干細胞可以分化為肝細胞,LV介導EGFP標記的人間充質干細胞可以穩(wěn)定分化為肝細胞并且被檢測到,但是易于形成栓子,肝細胞低表達CD90,為以后干細胞的分化提供實驗依據(jù)。
【作者單位】： 番禺區(qū)中心醫(yī)院外g，

本文編號：1205261