Ac-SDKP在抑制人肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞分化中的作用
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【摘要】:[目的]探討N-乙;-絲氨酰-天門冬氨酰-賴氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否通過抑制熱休克蛋白27(HSP27)的表達(dá),而抑制轉(zhuǎn)化生長因子1(TGF-β1)誘導(dǎo)的人肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的分化以及Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá)。[方法]用5 ng/m L的TGF-β1誘導(dǎo)人肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞株A549 72 h,并分為對(duì)照組、TGF-β1誘導(dǎo)組和10-8 mol/L Ac-SDKP干預(yù)組。采用倒置相差顯微鏡觀察A549細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化中細(xì)胞形態(tài)變化;免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)角蛋白(CK8)、波形蛋白的定位;Western blot法檢測(cè)E-鈣黏蛋白(E-cad)、CK8、波形蛋白、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)及HSP27以及Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)。[結(jié)果]在TGF-β1的誘導(dǎo)下,A549細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的形態(tài)轉(zhuǎn)變,伴隨著上皮標(biāo)志物CK8、E-cad降低,分別是對(duì)照組的40%和50%,而間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物波形蛋白、α-SMA表達(dá)增強(qiáng),同時(shí)伴隨HSP27及Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)增強(qiáng),分別是對(duì)照組的1.9倍、1.8倍、1.9倍以及2.2倍、2.5倍(P0.05)。給予Ac-SDKP干預(yù)后,CK8、E-cad表達(dá)上調(diào),分別是TGF-β1的誘導(dǎo)組的2.6倍、2.0倍;而波形蛋白、α-SMA、HSP27及Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)明顯降低,分別是TGF-β1的誘導(dǎo)組的68%、66%、74%以及66%、44%(P0.05)。[結(jié)論]Ac-SDKP能夠通過對(duì)HSP27表達(dá)的調(diào)節(jié),而抑制肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化及膠原蛋白的合成。
【作者單位】: 河北聯(lián)合大學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中心 老年醫(yī)學(xué)國際科技合作基地;滄州市青縣人民醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: N-乙;-絲氨酰-天門冬氨酰-賴氨酰-脯氨酸 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞 肌成纖維細(xì)胞 熱休克蛋白
【基金】:國家自然科學(xué)基金(編號(hào):81072254,81302395) 河北省高等學(xué)?茖W(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(編號(hào):ZD20131035) 唐山市科技計(jì)劃項(xiàng)目任務(wù)書(編號(hào):13130299z)
【分類號(hào)】:R563
【正文快照】: 體,鼠β-actin單克隆抗體(SC-25778,SC-17778,美國Santa Cruz公司);SP(鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶)法免疫組織化學(xué)試劑盒(SP-9001,北京中杉);實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time PCR)試劑盒(C11733038,美國Invitrogen公司)。1.2細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)分組A549細(xì)胞用含10%胎牛血清的
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【共引文獻(xiàn)】
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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 鄧海靜;Ac-SDKP抑制矽肺上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化及其機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年
【相似文獻(xiàn)】
中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 鄧海靜;Ac-SDKP抑制矽肺上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化及其機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年
,本文編號(hào):829289
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