支氣管哮喘是在一定遺傳背景之上,由多種因素參與的慢性氣道炎癥疾病,發(fā)病率與死亡率呈逐年升高的趨勢。白細胞介素-1 (IL-1)為體內(nèi)作用較強的致炎癥細胞因子之一,在哮喘病發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用。白細胞介素-1受體拮抗劑(IL-1ra)是天然的IL-1拮抗劑,能在受體水平拮抗IL-1的作用,研究證實,IL-1ra具有治療和預防哮喘的作用。在哮喘發(fā)病過程中,IgE與其高親和力受體的結合是觸發(fā)肥大細胞、嗜堿性粒細胞脫顆粒導致哮喘發(fā)病的關鍵因素之一。阻斷IgE與其高親和力受體的結合是治療哮喘的有效靶點,具有極大的發(fā)展?jié)摿�。本研究將IL-1ra和Fcε的功能進行了整合,利用基因工程技術將IL-1ra和IgE分子恒定區(qū)構建成融合蛋白,形成具有雙重功能活性的新型蛋白分子,一方面拮抗IL-1的生物學效應并延長IL-1ra半衰期,另一方面抑制IgE與其高親和力受體結合,從而達到防治哮喘的目的。 本研究首次構建了人源及鼠源Fcε與人IL-1ra融合基因,并在原核表達系統(tǒng)中實現(xiàn)了高效表達,表達產(chǎn)物主要以包涵體形式存在。采用分子篩和離子交換層析對表達產(chǎn)物進行了純化,獲得了較高純度的重組IL-1ra-...

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【學位級別】：博士

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引言
    1 白細胞介素-1 受體拮抗劑(Interleukin-1 receptor antagonist 1,IL-1)與支氣管哮喘
    2 免疫球蛋白 E 與支氣管哮喘
    3 本研究的設計思路
第一部分 IL-1ra-Fcε融合基因的克隆、表達純化及功能研究
    一、鼠源 IL-1ra-Fcε 融合基因的克隆、表達純化及功能研究
    二、人源 IL-1ra-Fcε 融合基因的克隆、表達純化及功能研究
    三、討論
第二部分 pIRES2-EGFP-IL-1ra-Fcε真核表達載體的構建及鑒定
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
第三部分 IL-1ra-Fcε對過敏性哮喘的治療作用研究
    1 材料與方法
    2 結果與分析
    3 討論
第四部分 融合蛋白對變應性哮喘治療機制初步探討
    1 材料方法
    2 結果
    3 討論
第五部分 IL-1ra-Fcε融合蛋白藥物代謝動力學初步研究
    1 材料與方法
    2 結果
    3 討論
結論
全文創(chuàng)新點
參考文獻
文獻綜述
致謝
附錄



本文編號：4048637