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pRNA納米基因載體構建及其對哮喘STAT5b基因的沉默作用研究

發(fā)布時間:2022-01-23 09:20
  目的構建出攜帶小干擾RNA(siRNA)和RNA適配體(aptamer)的包裝RNA (packaging RNA, pRNA)納米基因載體,研究其對哮喘小鼠脾淋巴細胞STAT5b基因的沉默作用。方法使用PCR和體外轉錄的方法構建靶向沉默STAT5b基因的pRNA/siRNA單體、靶向結合CD4分子的pRNA/aptamer(8)單體及pRNA/aptamer(14)單體,進而構建出pRNA/siRNA-pRNA/aptamer(8)二聚體和pRNA/siRNA-pRNA/aptamer(14)二聚體。用卵清蛋白(OVA)致敏、激發(fā)的方法建立哮喘小鼠模型,用淋巴細胞分離液分離出脾淋巴細胞,再用已構建的pRNA單體、pRNA二聚體進行淋巴細胞體外干預,RT-PCR法檢測在有/無轉染試劑條件下pRNA單體和pRNA二聚體的干預效果,CCK—8法檢測pRNA/siRNA單體和pRNA/aptamer(8)單體的毒性作用。結果(1)臨床表現(xiàn)、肺組織病理檢查和肺泡灌洗液白細胞總數(shù)計數(shù)結果顯示,哮喘小鼠模型制備成功。(2)測序及二級結構預測結果顯示,pRNA/siRNA、pRNA/aptamer(... 

【文章來源】:暨南大學廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

pRNA納米基因載體構建及其對哮喘STAT5b基因的沉默作用研究


ThZ淋巴細胞在哮喘中的作用[l4]

二級結構,單體,示蹤分子


大學學位論文聚體。在pRNA的雙鏈螺旋區(qū)上添加siRNA、RNAaptamer、RNA酶或化學基團等功建出帶有相應功能的pRN刀siRNA、pRN刀aptamer、pRN刀核酶和pRNA/葉再通過左右環(huán)堿基互補的相互作用形成pRNA多聚體〔2’]。理論上,pRNA能能分子的pRNA六聚體,同時攜帶治療分子、靶向分子、示蹤分子等多個功安全高效、靶向性強的基因治療,故pRNA是非常有前景的納米基因載體。

三級結構,單體,示蹤分子,納米基


分子的pRNA六聚體,同時攜帶治療分子、靶向分子、示蹤分子等多個功全高效、靶向性強的基因治療,故pRNA是非常有前景的納米基因載體。一一,毓毓,,1!!!.1}!!1·}毅}{}二}.:落}}};;;“‘“腳U產劃護C了乒以石林~弘叮叮圖2pRNA單體二級結構陣]

【參考文獻】:
期刊論文
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[8]肺表面活性物質對發(fā)作期支氣管哮喘患者T淋巴細胞CD69的影響[J]. 史菲,邱晨,李富榮.  中華結核和呼吸雜志. 2004(05)
[9]整合素β1基因沉默對支氣管哮喘小鼠氣道平滑肌功能的影響[J]. 邱晨,刁振華,齊暉,李娜,任莉莉,張婷.  中華結核和呼吸雜志. 2010 (11)



本文編號:3604057

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