本文關(guān)鍵詞：G-蛋白耦聯(lián)受體30參與子癇前期血管病變的分子機(jī)制研究

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【摘要】：背景：子癇前期(preeclampsia, PE)與血循環(huán)中的雌激素水平是密切相關(guān)的,通常認(rèn)為雌激素的主要作用是由其經(jīng)典雌激素受體(estrogen receptors, ERs)介導(dǎo)的；有趣的是,近期發(fā)現(xiàn)新型雌激素受體G-蛋白偶聯(lián)受體30(g-protein coupled receptor 30, GPR30)介導(dǎo)雌激素的許多作用,然而GPR30與PE發(fā)病的關(guān)系尚不明了。目的：探討胎盤,蛻膜及臍帶組織中新型雌激素受體GPR30的表達(dá)及其調(diào)控一氧化氮(Nitric oxide, NO)合成的信號通路,與PE發(fā)病的關(guān)系。方法：收集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2012年9月至2014年5月分娩的21例PE和20例正常產(chǎn)婦的胎盤,蛻膜和臍帶組織,用免疫組化法檢測GPR30在胎盤,蛻膜和臍帶組織中的表達(dá)。然后以人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)建立PE細(xì)胞模型,以免疫熒光技術(shù)和蛋白印跡技術(shù)(western blotting)檢測GPR30蛋白的表達(dá)情況。以蛋白印跡技術(shù)(Western blotting)檢測GPR30、p-eNOS (Ser1177)、p-PI3K(p85)和p-Akt (Ser473)在不同處理組HUVECs中的表達(dá)。以流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡、以體外小管形成實(shí)驗(yàn)檢測管腔成形能力、以遷移實(shí)驗(yàn)檢測遷移能力等。結(jié)果：GPR30在PE組胎盤,蛻膜和臍帶組織中表達(dá)均較正常組顯著降低(P0.05)；而在細(xì)胞模型中,經(jīng)缺氧/復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)處理后,GPR30蛋白的表達(dá)顯著降低(P0.05)；GPR30抑制劑-G15處理使其凋亡顯著增加(P0.05)；而GPR30激動劑-G1能促進(jìn)其管腔成形和遷移(P0.05),同時,G15能抑制17p-雌二醇(17-estradiol, E2)對其管腔成形和遷移的保護(hù)作用(P0.05)。同時H/R處理后,GPR30和p-eNOS (Ser1177)表達(dá)較對照組顯著降低(P0.05)；GPR30激動劑G1和17-p-雌二醇(17β-estradiol, E2)預(yù)處理使各組GPR30、p-PI3K(p85)、p-Akt (Ser473)及p-eNOS(Ser1177)的表達(dá)較H/R組均上調(diào)(P0.05),而GPR30抑制劑G15又可使上述指標(biāo)表達(dá)明顯下調(diào)(P0.05)。結(jié)論：GPR30表達(dá)下降可能與PE胎盤血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能異常相關(guān)；GPR30是胎盤NO合成的一個重要調(diào)節(jié)因子；PE患者胎盤中,GPR30表達(dá)下降可能通過PI3K/Akt通路下調(diào)NO合成,從而導(dǎo)致胎盤血管舒縮功能失調(diào)。
【關(guān)鍵詞】：子癇前期 GPR30 血管內(nèi)皮 NO
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R714.244
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-15
• 第一部分 GPR30在子癇前期胎盤,蛻膜及臍帶組織中的差異表達(dá)及其與HUVECs功能的關(guān)系15-40
• 1 實(shí)驗(yàn)材料15-22
• 2 實(shí)驗(yàn)方法22-30
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-38
• 4 討論38-39
• 5 小結(jié)39-40
• 第二部分 GPR30通過PI3K/Akt信號通路調(diào)控HUVECs中NO的合成40-49
• 1 實(shí)驗(yàn)材料40-42
• 2 實(shí)驗(yàn)方法42-44
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-47
• 4 討論47-48
• 5 小結(jié)48-49
• 文獻(xiàn)綜述49-54
• 參考文獻(xiàn)54-62
• 致謝62-63
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文63

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本文編號：936502